鼠衣原體TC0668突變株在小鼠生殖道感染模型中免疫原性和免疫保護(hù)作用的初步研究
發(fā)布時(shí)間：2021-08-04 04:40
背景:衣原體（Chlamydia）是一類嚴(yán)格胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物,可對(duì)人和動(dòng)物均致病。衣原體感染人類結(jié)膜、呼吸道、生殖道可以引起結(jié)膜炎、呼吸道和生殖道感染等多種疾病。沙眼衣原體（C.trachomatis,Ct）作為眾多國家與地區(qū)性傳播感染（sexually transmitted infection,STI）的主要病原體之一,其感染人類不僅可引起沙眼與包涵體結(jié)膜炎,還能引起生殖道感染等疾病。鼠衣原體（C.muridarum,Cm）因與Ct種系關(guān)系較接近,常用于建立Ct感染女性生殖道的小鼠模型。Cm TC0668是一種染色體毒力蛋白,與Cm感染引起的小鼠輸卵管炎性病變有關(guān)。將TC0668野生型單克隆菌株(Cm TC0668wt)與TC0668突變型單克隆菌株(Cm TC0668mut)平行接種小鼠建立生殖道感染模型,與Cm TC0668wt菌株比較,Cm TC0668mut菌株感染小鼠生殖道致病率明顯降低,但Cm TC0668mut菌株作為減毒活疫苗在預(yù)防衣原體感染性輸卵...
【文章來源】：南華大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】：111 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
IFA檢測(cè)衣原體感染HeLa細(xì)胞后形成的包涵體數(shù)目
25圖2小鼠免疫時(shí)間流程圖Fig.2Thetimelineofimmunizationandallexperimentsviatheterminaltimepointonday125.4.2.2小鼠免疫后下生殖道衣原體載量檢測(cè)小鼠陰道免疫后每隔3天或7天收集陰道分泌物，通過IFA檢測(cè)陰道分泌物中的衣原體載量來檢測(cè)衣原體在下生殖道的清除情況。結(jié)果顯示：各組小鼠陰道拭子中衣原體檢出率相似，不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠帶菌陽性率也相似（陰性對(duì)照SPG組除外）。在免疫后3天，各組小鼠陰道帶菌量均較高，并且在免疫后第3~7天，各組小鼠陰道中衣原體載量相比較于免疫后第3天所檢測(cè)的載量均有所上升或保持第3天衣原體載量相似水平，未出現(xiàn)衣原體清零情況；在免疫7天后，各組小鼠陰道拭子中衣原體的檢出率呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)，并且在免疫后第28天小鼠陰道拭子中衣原體完全清除，陰性對(duì)照組陰道拭子中在不同時(shí)間點(diǎn)均無衣原體檢出（圖3A）。圖3B為免疫后不同時(shí)間點(diǎn)每組小鼠陰道拭子中衣原體未完全清除的小鼠所占各組小鼠總數(shù)的百分比（即每組小鼠帶菌陽性率）。在免疫后第3~7天，各組小鼠帶菌陽性率均為100%（陰性對(duì)照SPG組除外）；在免疫后第3~7天，各組小鼠帶菌陽性率均逐漸下降，且CmPF組和G28.51.1菌株組小鼠其帶菌陽性率于免疫后第21天降為0，CmNiggⅡ菌株組和G13.11.1菌株組小鼠帶菌陽性率于免疫后第28天降為0，陰性對(duì)照組帶菌陽性率一直為0。
26圖3BALB/c小鼠感染衣原體后下生殖道衣原體載量Fig.3SheddingoflivechlamydialorganismfromlowergenitaltractofBALB/cmiceafterinfectionwithChlamydia.A.TheliveorganismsrecoveredfromeachswabareexpressedasLog10IFUalongtheyaxis.B.Thepercentageofmiceremainingpositiveforsheddingoflivechlamydialorganismateachtimepointwasplottedalongtheyaxis.4.2.3小鼠免疫后誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答水平4.2.3.1小鼠免疫后血清特異性IgG和IgA抗體水平衣原體菌株通過陰道免疫小鼠后，收集免疫后28天（4周）和56天（8周）的小鼠尾靜脈血，間接ELISA法檢測(cè)免疫后小鼠血清中特異性IgG和IgA抗體水平。通過階段性的檢測(cè)小鼠血清特異性抗體應(yīng)答水平，發(fā)現(xiàn)各實(shí)驗(yàn)組血清特異性IgG抗體水平隨著免疫時(shí)間的延長呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)且均在第8周達(dá)到峰值（陰性對(duì)照SPG組無變化），免疫后第4周和第8周Cm（NiggⅡ）組、G28.51.1（TC0668mut）組、G13.11.1（TC0668mut）組以及PF組的IgG抗體水平均逐漸升高且明顯高于陰性對(duì)照SPG組，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），結(jié)果如圖4A所示。圖4B為小鼠血清IgA抗體應(yīng)答水平，發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間的延長，免疫后第4周和第8周各組小鼠血清IgA抗體應(yīng)答水平均無顯著變化（P>0.05）。
本文編號(hào)：3321023
【文章來源】：南華大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】：111 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
IFA檢測(cè)衣原體感染HeLa細(xì)胞后形成的包涵體數(shù)目
25圖2小鼠免疫時(shí)間流程圖Fig.2Thetimelineofimmunizationandallexperimentsviatheterminaltimepointonday125.4.2.2小鼠免疫后下生殖道衣原體載量檢測(cè)小鼠陰道免疫后每隔3天或7天收集陰道分泌物，通過IFA檢測(cè)陰道分泌物中的衣原體載量來檢測(cè)衣原體在下生殖道的清除情況。結(jié)果顯示：各組小鼠陰道拭子中衣原體檢出率相似，不同時(shí)間點(diǎn)各組小鼠帶菌陽性率也相似（陰性對(duì)照SPG組除外）。在免疫后3天，各組小鼠陰道帶菌量均較高，并且在免疫后第3~7天，各組小鼠陰道中衣原體載量相比較于免疫后第3天所檢測(cè)的載量均有所上升或保持第3天衣原體載量相似水平，未出現(xiàn)衣原體清零情況；在免疫7天后，各組小鼠陰道拭子中衣原體的檢出率呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)，并且在免疫后第28天小鼠陰道拭子中衣原體完全清除，陰性對(duì)照組陰道拭子中在不同時(shí)間點(diǎn)均無衣原體檢出（圖3A）。圖3B為免疫后不同時(shí)間點(diǎn)每組小鼠陰道拭子中衣原體未完全清除的小鼠所占各組小鼠總數(shù)的百分比（即每組小鼠帶菌陽性率）。在免疫后第3~7天，各組小鼠帶菌陽性率均為100%（陰性對(duì)照SPG組除外）；在免疫后第3~7天，各組小鼠帶菌陽性率均逐漸下降，且CmPF組和G28.51.1菌株組小鼠其帶菌陽性率于免疫后第21天降為0，CmNiggⅡ菌株組和G13.11.1菌株組小鼠帶菌陽性率于免疫后第28天降為0，陰性對(duì)照組帶菌陽性率一直為0。
26圖3BALB/c小鼠感染衣原體后下生殖道衣原體載量Fig.3SheddingoflivechlamydialorganismfromlowergenitaltractofBALB/cmiceafterinfectionwithChlamydia.A.TheliveorganismsrecoveredfromeachswabareexpressedasLog10IFUalongtheyaxis.B.Thepercentageofmiceremainingpositiveforsheddingoflivechlamydialorganismateachtimepointwasplottedalongtheyaxis.4.2.3小鼠免疫后誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答水平4.2.3.1小鼠免疫后血清特異性IgG和IgA抗體水平衣原體菌株通過陰道免疫小鼠后，收集免疫后28天（4周）和56天（8周）的小鼠尾靜脈血，間接ELISA法檢測(cè)免疫后小鼠血清中特異性IgG和IgA抗體水平。通過階段性的檢測(cè)小鼠血清特異性抗體應(yīng)答水平，發(fā)現(xiàn)各實(shí)驗(yàn)組血清特異性IgG抗體水平隨著免疫時(shí)間的延長呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)且均在第8周達(dá)到峰值（陰性對(duì)照SPG組無變化），免疫后第4周和第8周Cm（NiggⅡ）組、G28.51.1（TC0668mut）組、G13.11.1（TC0668mut）組以及PF組的IgG抗體水平均逐漸升高且明顯高于陰性對(duì)照SPG組，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），結(jié)果如圖4A所示。圖4B為小鼠血清IgA抗體應(yīng)答水平，發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間的延長，免疫后第4周和第8周各組小鼠血清IgA抗體應(yīng)答水平均無顯著變化（P>0.05）。
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