發(fā)布時間：2017-04-25 21:08

  本文關鍵詞：川西高原貢嘎山區(qū)土壤纖維素降解菌的分離與篩選，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：纖維素作為植物細胞壁的主要成分,是地球上最豐富的生物質類可再生資源。我國是農業(yè)大國,每年在農作物生產活動中產生的包括秸稈、棉籽殼、木屑等農業(yè)廢棄物的量十分巨大。分離并篩選出能夠高效利用纖維素的纖維素降解菌是提高農業(yè)生產中纖維素物質轉化率的關鍵所在。本研究旨在分離、純化并篩選出能夠高效利用纖維素的纖維素降解菌株,并經過一系列實驗探究出所分離出的菌株在秸稈降解過程中的最佳組合方式,以期應用到實際生產環(huán)節(jié)中。主要研究結果如下：1.本研究采用選擇性培養(yǎng)基從川西甘孜州高海拔區(qū)林下森林土壤中,共獲得79株以纖維素物質作為其唯一碳源的菌株。2.從79株菌中篩選出了15株能在剛果紅平板上形成明顯水解圈的菌株,根據形態(tài)學鑒定表明,細菌4株、放線菌11株。以DNS法測試并計算了這15株菌株的纖維素酶活性,結果顯示菌株112、110、174、154和146表現出較高的產纖維素酶能力,其CMC酶活性分別達到了78.13 U、75.05 U、71.75 U、70.65 U和65.15 U。3.15株供試菌株間拮抗試驗結果表明,大部分細菌之間與放線菌之間無明顯拮抗作用,如菌株112、146、171、174之間無拮抗;部分菌株具有較強的拮抗性,如細菌110不能與146、147、154、171共存。該結果為混合菌群組合方式提供了參考。4.以玉米秸稈為底物,研究了單菌株與混合菌群對玉米秸稈的降解能力。結果表明,單菌株110、116、145、150、153、154、174和179在玉米秸稈降解過程中的酶活水平相對較高,其中154接種9d后的酶活為所有單菌株中最高,達到48.90U；混合菌群組合A(110、116、174)和F(A+B)的纖維素酶活最高分別達到了47.74U和57.03 U,而組合F(A+B)對玉米秸稈降解酶活高于所有單菌株。5.通過分子生物學手段確定混合菌群組合F各單菌株110、116、174、147、154、171的分類地位,其中菌株110為類芽孢桿菌(Paenibacillus pabuli),菌株116為類芽孢桿菌(Paenibacillus xylanexedens)、菌株147、154為羅氏鏈霉菌(Streptomyces rochei),菌株171為吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus),菌株174為瓊氏不動桿菌(Acinetobacter junii)
【關鍵詞】：纖維素降解菌 菌株分離與篩選 拮抗實驗 作物秸稈降解 菌株鑒定
【學位授予單位】：四川農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S182
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 1 文獻綜述9-15
• 1.1 引言9
• 1.2 纖維素的結構特點9-10
• 1.3 環(huán)境中能降解纖維素的微生物10-11
• 1.4 纖維素酶的組成11
• 1.5 纖維素酶在生產中的應用11-13
• 1.6 主要研究內容13-15
• 1.6.1 研究意義與目標13-14
• 1.6.2 技術路線14-15
• 2 材料與方法15-21
• 2.1 土壤纖維素降解菌的分離與篩選15-17
• 2.1.1 樣品來源15
• 2.1.2 供試培養(yǎng)基15
• 2.1.3 主要試劑15-16
• 2.1.4 菌株的分離與純化16
• 2.1.5 菌株的初步篩選16
• 2.1.6 菌株纖維素酶活力測定16-17
• 2.2 供試菌株之間的拮抗實驗17-19
• 2.2.1 供試菌株17
• 2.2.2 供試培養(yǎng)基17
• 2.2.3 各細菌之間與各放線菌之間的拮抗實驗17-18
• 2.2.4 細菌與放線菌之間的拮抗實驗18-19
• 2.3 供試菌株對玉米秸稈的降解效果研究19
• 2.3.1 供試菌株19
• 2.3.2 供試培養(yǎng)基19
• 2.3.3 實驗方法19
• 2.4 代表菌株的分子生物學鑒定19-21
• 2.4.1 供試菌株19
• 2.4.2 菌株總DNA的提取19-20
• 2.4.3 菌株16S rDNA的擴增20
• 2.4.4 菌株16S rDNA序列測定及系統(tǒng)發(fā)育分析20-21
• 3 實驗結果與分析21-35
• 3.1 土壤纖維素降解菌的分離與篩選21-27
• 3.1.1 纖維素降解菌的分離與純化21-23
• 3.1.2 纖維素降解菌的初步篩選23-25
• 3.1.3 纖維素降解菌的酶活力測定25-27
• 3.2 供試菌株之間的拮抗實驗27-29
• 3.3 供試菌株對玉米秸稈的降解效果研究29-34
• 3.3.1 單菌株對玉米秸稈的降解效果29-31
• 3.3.2 混合菌群對玉米秸稈的降解效果31-34
• 3.4 代表菌株的分子生物學鑒定34-35
• 4 討論35-40
• 4.1 纖維素降解菌的分離與篩選35-36
• 4.2 菌株間的拮抗表現36
• 4.3 供試菌株對玉米秸稈的降解效果36-38
• 4.4 代表菌株的分類地位與應用展望38-40
• 5 結論40-42
• 5.1 土壤纖維素降解菌的分離與篩選40
• 5.2 供試菌株的拮抗試驗40
• 5.3 供試菌株的玉米秸稈降解試驗40-41
• 5.4 代表菌株的分類地位41-42
• 參考文獻42-46
• 致謝46-47
• 附錄：代表菌株16S rDNA序列47-48

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5 劉韞滔;yな縵

本文編號：327075