本文關(guān)鍵詞：川西高原貢嘎山區(qū)土壤纖維素降解菌的分離與篩選，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：纖維素作為植物細(xì)胞壁的主要成分,是地球上最豐富的生物質(zhì)類可再生資源。我國是農(nóng)業(yè)大國,每年在農(nóng)作物生產(chǎn)活動(dòng)中產(chǎn)生的包括秸稈、棉籽殼、木屑等農(nóng)業(yè)廢棄物的量十分巨大。分離并篩選出能夠高效利用纖維素的纖維素降解菌是提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中纖維素物質(zhì)轉(zhuǎn)化率的關(guān)鍵所在。本研究旨在分離、純化并篩選出能夠高效利用纖維素的纖維素降解菌株,并經(jīng)過一系列實(shí)驗(yàn)探究出所分離出的菌株在秸稈降解過程中的最佳組合方式,以期應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)環(huán)節(jié)中。主要研究結(jié)果如下：1.本研究采用選擇性培養(yǎng)基從川西甘孜州高海拔區(qū)林下森林土壤中,共獲得79株以纖維素物質(zhì)作為其唯一碳源的菌株。2.從79株菌中篩選出了15株能在剛果紅平板上形成明顯水解圈的菌株,根據(jù)形態(tài)學(xué)鑒定表明,細(xì)菌4株、放線菌11株。以DNS法測試并計(jì)算了這15株菌株的纖維素酶活性,結(jié)果顯示菌株112、110、174、154和146表現(xiàn)出較高的產(chǎn)纖維素酶能力,其CMC酶活性分別達(dá)到了78.13 U、75.05 U、71.75 U、70.65 U和65.15 U。3.15株供試菌株間拮抗試驗(yàn)結(jié)果表明,大部分細(xì)菌之間與放線菌之間無明顯拮抗作用,如菌株112、146、171、174之間無拮抗;部分菌株具有較強(qiáng)的拮抗性,如細(xì)菌110不能與146、147、154、171共存。該結(jié)果為混合菌群組合方式提供了參考。4.以玉米秸稈為底物,研究了單菌株與混合菌群對玉米秸稈的降解能力。結(jié)果表明,單菌株110、116、145、150、153、154、174和179在玉米秸稈降解過程中的酶活水平相對較高,其中154接種9d后的酶活為所有單菌株中最高,達(dá)到48.90U；混合菌群組合A(110、116、174)和F(A+B)的纖維素酶活最高分別達(dá)到了47.74U和57.03 U,而組合F(A+B)對玉米秸稈降解酶活高于所有單菌株。5.通過分子生物學(xué)手段確定混合菌群組合F各單菌株110、116、174、147、154、171的分類地位,其中菌株110為類芽孢桿菌(Paenibacillus pabuli),菌株116為類芽孢桿菌(Paenibacillus xylanexedens)、菌株147、154為羅氏鏈霉菌(Streptomyces rochei),菌株171為吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus),菌株174為瓊氏不動(dòng)桿菌(Acinetobacter junii)
【關(guān)鍵詞】：纖維素降解菌 菌株分離與篩選 拮抗實(shí)驗(yàn) 作物秸稈降解 菌株鑒定
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S182
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 1 文獻(xiàn)綜述9-15
• 1.1 引言9
• 1.2 纖維素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)9-10
• 1.3 環(huán)境中能降解纖維素的微生物10-11
• 1.4 纖維素酶的組成11
• 1.5 纖維素酶在生產(chǎn)中的應(yīng)用11-13
• 1.6 主要研究內(nèi)容13-15
• 1.6.1 研究意義與目標(biāo)13-14
• 1.6.2 技術(shù)路線14-15
• 2 材料與方法15-21
• 2.1 土壤纖維素降解菌的分離與篩選15-17
• 2.1.1 樣品來源15
• 2.1.2 供試培養(yǎng)基15
• 2.1.3 主要試劑15-16
• 2.1.4 菌株的分離與純化16
• 2.1.5 菌株的初步篩選16
• 2.1.6 菌株纖維素酶活力測定16-17
• 2.2 供試菌株之間的拮抗實(shí)驗(yàn)17-19
• 2.2.1 供試菌株17
• 2.2.2 供試培養(yǎng)基17
• 2.2.3 各細(xì)菌之間與各放線菌之間的拮抗實(shí)驗(yàn)17-18
• 2.2.4 細(xì)菌與放線菌之間的拮抗實(shí)驗(yàn)18-19
• 2.3 供試菌株對玉米秸稈的降解效果研究19
• 2.3.1 供試菌株19
• 2.3.2 供試培養(yǎng)基19
• 2.3.3 實(shí)驗(yàn)方法19
• 2.4 代表菌株的分子生物學(xué)鑒定19-21
• 2.4.1 供試菌株19
• 2.4.2 菌株總DNA的提取19-20
• 2.4.3 菌株16S rDNA的擴(kuò)增20
• 2.4.4 菌株16S rDNA序列測定及系統(tǒng)發(fā)育分析20-21
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析21-35
• 3.1 土壤纖維素降解菌的分離與篩選21-27
• 3.1.1 纖維素降解菌的分離與純化21-23
• 3.1.2 纖維素降解菌的初步篩選23-25
• 3.1.3 纖維素降解菌的酶活力測定25-27
• 3.2 供試菌株之間的拮抗實(shí)驗(yàn)27-29
• 3.3 供試菌株對玉米秸稈的降解效果研究29-34
• 3.3.1 單菌株對玉米秸稈的降解效果29-31
• 3.3.2 混合菌群對玉米秸稈的降解效果31-34
• 3.4 代表菌株的分子生物學(xué)鑒定34-35
• 4 討論35-40
• 4.1 纖維素降解菌的分離與篩選35-36
• 4.2 菌株間的拮抗表現(xiàn)36
• 4.3 供試菌株對玉米秸稈的降解效果36-38
• 4.4 代表菌株的分類地位與應(yīng)用展望38-40
• 5 結(jié)論40-42
• 5.1 土壤纖維素降解菌的分離與篩選40
• 5.2 供試菌株的拮抗試驗(yàn)40
• 5.3 供試菌株的玉米秸稈降解試驗(yàn)40-41
• 5.4 代表菌株的分類地位41-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 致謝46-47
• 附錄：代表菌株16S rDNA序列47-48

【相似文獻(xiàn)】

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5 劉韞滔;yな縵

本文編號：327075