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鼠傷寒沙門氏菌鞭毛FlgE蛋白表達(dá)及flhA、flhB基因缺失株構(gòu)建

發(fā)布時間:2021-06-07 03:26
  鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella Typhimurium)作為多種宿主感染的病原菌,能夠?qū)е挛改c炎等疾病。它的致病性和許多毒力因子息息相關(guān),比如三型分泌系統(tǒng)、毒力質(zhì)粒、鞭毛、菌毛等。其中鞭毛作為細(xì)菌的主要毒力因子之一,不僅是細(xì)菌重要的運(yùn)動器官,而且也參與了菌膜形成和上皮細(xì)胞的粘附等重要的生物學(xué)過程。另外鞭毛結(jié)構(gòu)的主要成分-鞭毛蛋白也是一種重要的免疫激活劑,通過結(jié)合TLR5受體激活免疫應(yīng)答,進(jìn)而刺激一系列細(xì)胞因子的產(chǎn)生。鞭毛結(jié)構(gòu)由鞭毛絲、鞭毛鉤、基體(馬達(dá)、至少四個環(huán)狀結(jié)構(gòu)和鞭毛三型分泌系統(tǒng))三部分組成。其中鞭毛鉤由FlgE蛋白構(gòu)成,作用是連接鞭毛絲和基體。鞭毛三型分泌系統(tǒng)又稱鞭毛輸出系統(tǒng),主要用于合成和輸出鞭毛蛋白。鞭毛鉤和鞭毛輸出系統(tǒng)的存在對于鼠傷寒沙門氏菌的鞭毛結(jié)構(gòu)具有重要作用。為了深入了解鞭毛結(jié)構(gòu)中相關(guān)基因的特性及相關(guān)分子機(jī)制,詮釋細(xì)菌的致病機(jī)制,本文從以下3個方面開展了研究:(1)鞭毛鉤蛋白由flgE基因編碼,通過異源表達(dá)獲得該蛋白并制備多克隆抗體。本實(shí)驗(yàn)通過克隆flgE基因并連接pET28a質(zhì)粒,通過誘導(dǎo)表達(dá)得到的蛋白大小為42 kDa且具有可溶性。利用該蛋白免疫小鼠制備... 

【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

鼠傷寒沙門氏菌鞭毛FlgE蛋白表達(dá)及flhA、flhB基因缺失株構(gòu)建


鼠傷寒沙門氏菌形態(tài)結(jié)構(gòu)圖[3]

電鏡圖,鞭毛,傷寒,沙門氏菌


碩士學(xué)位論文4增強(qiáng)細(xì)菌的致病性等[24]。圖1-2兩種鼠傷寒沙門氏菌鞭毛電鏡圖A[25]、B[26]Figure1-2ElectronmicrographsofflagellaofS.Typhimurium1.2.1鞭毛的結(jié)構(gòu)鞭毛是一種復(fù)雜的結(jié)構(gòu)(如圖1-3),它的裝配需要幾十個基因的協(xié)同表達(dá),調(diào)控層次通常被組織分成三類[27]。最早表達(dá)的是Ⅰ類基因即flhD和flhC,它們編碼一個主調(diào)節(jié)因子flhDC,它能夠激活Ⅱ類鞭毛基因的轉(zhuǎn)錄[28]。第二類基因通常編碼形成基體、鞭毛鉤以及和分泌機(jī)制相關(guān)的結(jié)構(gòu)成分。第三類基因則負(fù)責(zé)編碼鞭毛絲蛋白FliC和鞭毛發(fā)育后期需要的其他蛋白質(zhì)組分。圖1-3鼠傷寒沙門氏菌鞭毛結(jié)構(gòu)圖[29]Figure1-3StructureofflagellainS.Typhimurium

結(jié)構(gòu)圖,鞭毛,傷寒,沙門氏菌


碩士學(xué)位論文4增強(qiáng)細(xì)菌的致病性等[24]。圖1-2兩種鼠傷寒沙門氏菌鞭毛電鏡圖A[25]、B[26]Figure1-2ElectronmicrographsofflagellaofS.Typhimurium1.2.1鞭毛的結(jié)構(gòu)鞭毛是一種復(fù)雜的結(jié)構(gòu)(如圖1-3),它的裝配需要幾十個基因的協(xié)同表達(dá),調(diào)控層次通常被組織分成三類[27]。最早表達(dá)的是Ⅰ類基因即flhD和flhC,它們編碼一個主調(diào)節(jié)因子flhDC,它能夠激活Ⅱ類鞭毛基因的轉(zhuǎn)錄[28]。第二類基因通常編碼形成基體、鞭毛鉤以及和分泌機(jī)制相關(guān)的結(jié)構(gòu)成分。第三類基因則負(fù)責(zé)編碼鞭毛絲蛋白FliC和鞭毛發(fā)育后期需要的其他蛋白質(zhì)組分。圖1-3鼠傷寒沙門氏菌鞭毛結(jié)構(gòu)圖[29]Figure1-3StructureofflagellainS.Typhimurium

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]重組嗜肺軍團(tuán)菌鞭毛蛋白A(rflaA)體外誘導(dǎo)小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞分泌IL-6和IL-1β[J]. 佳莉娟,曹秀琴,楊志偉.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(05)
[2]鞭毛介導(dǎo)的運(yùn)動性與細(xì)菌生物膜的相互關(guān)系[J]. 丁莉莎,王瑤.  微生物學(xué)報. 2009(04)



本文編號:3215749

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