發(fā)布時(shí)間：2021-03-26 20:03

　　RNA甲基化修飾在RNA的正常功能中起著至關(guān)重要的作用,影響著RNA的分子結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性,在胚胎發(fā)育過(guò)程中起著潛在的作用。研究表明,RNA甲基化在環(huán)境應(yīng)激、核糖體生物發(fā)生、抗生素耐藥性等方面發(fā)揮重要作用,可作為腫瘤標(biāo)志物,對(duì)預(yù)防癌癥具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。因此,定量和定性檢測(cè)RNA甲基化是非常重要的。目前,RNA甲基化的檢測(cè)方法包括二維薄層色譜、高效液相色譜、定量質(zhì)譜分析和甲基化RNA免疫沉淀后測(cè)序以及電化學(xué)傳感器和光電化學(xué)傳感器。本課題組選擇了靈敏度高、操作簡(jiǎn)單的光電化學(xué)傳感器檢測(cè)兩種主要的RNA甲基化修飾,即N⁶-甲基腺嘌呤（m⁶A）和N¹-甲基腺嘌呤（m¹A）。因?yàn)樵赗NA序列中,兩種甲基化分子以核苷酸的形式存在,因此本論文分別以m⁶A和m¹A的核苷酸為檢測(cè)對(duì)象。（1）以黑色二氧化鈦（B-TiO₂）和三氧化二鉍（Bi₂O₃）為光活性材料,以[Ru（bpy）₃]

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

(A)光電化學(xué)免疫傳感器制作過(guò)程示意圖

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文233.1.3不同修飾電極的電化學(xué)及光電化學(xué)行為圖3.3不同修飾的電極的交流阻抗圖(A)和光電流圖(C)(a)ITO,(b)Bi2O3/B-TiO2/ITO,(c)AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(d)MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(e)Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(f)m6ATP/Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(g)Ru/m6ATP/Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO。(B)(a)Bi2O3/ITO,(b)B-TiO2/ITOand(c)Bi2O3/B-TiO2/ITO的光電流圖和(D)(a)Bi2O3/B-TiO2/ITO,(b)UiO-66/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(c)Ru/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(d)Ru@UiO-66/Bi2O3/B-TiO2/ITO的光電流圖。Fig.3.3(A)NyquistdiagramsshowingEISdatafordifferentelectrodesrecordedfrom0.01Hzto105Hzin5mmolL-1[Fe(CN)6]3/4(1:1)solutioncontaining10mmolL-1KCl:(a)ITO,(b)B-TiO2/ITO,(c)Bi2O3/B-TiO2/ITO,(d)AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(e)MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(f)Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(g)m6ATP/Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(h)Ru/m6ATP/Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO(B)Thephotocurrentof(a)Bi2O3/ITO,(b)B-TiO2/ITOand(c)Bi2O3/B-TiO2/ITOin0.01molL-1PBS(pH7.4)containing0.01molL-1AA.(C)Thephotocurrentresponseofdifferentelectrodesin0.01molL-1PBScontaining0.01molL-1AA.(a)ITO,(b)Bi2O3/B-TiO2/ITO,(c)AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(d)MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(e)Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(f)m6ATP/Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO,(g)Ru/m6ATP/Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO(D)Thephotocurrentresponsein0.01molL-1PBS(pH7.4)containing0

基于黑色二氧化鈦和釩酸鉍異質(zhì)結(jié)材料光電化學(xué)檢測(cè)RNA甲基化的研究26影響。從圖3.4D和圖3.4E可以看出，Ru@UiO-66的最佳濃度和反應(yīng)時(shí)間分別為4mg/mL和60分鐘。圖3.4B-TiO2濃度(A)，Bi2O3濃度(B)，m6A抗體免疫反應(yīng)時(shí)間(C)，Ru@UiO-66濃度(D)和Ru@UiO-66固定化時(shí)間(E)對(duì)生物傳感器光電化學(xué)響應(yīng)的影響。Fig.3.4EffectsofB-TiO2concentration(A)andBi2O3concentration(B),m6Aantibodyimmunoreactiontime(C),Ru@UiO-66concentration(D)andRu@UiO-66immobilizationtime(E)onthePECresponseofthebiosensor.Theerrorbarsrepresentthestandarddeviationofthreemeasurements.3.1.5光電化學(xué)傳感器的檢測(cè)性能在最佳反應(yīng)條件下，構(gòu)建光電化學(xué)免疫傳感器用于評(píng)價(jià)光電流與m6ATP濃度的關(guān)系。如圖3.5A所示，隨著m6ATP濃度的增加，免疫傳感器的光電流響應(yīng)增加，在0.05–30nmolL1范圍內(nèi)，光電流與m6ATP濃度的對(duì)數(shù)成正比（圖3.5B）。線性回歸方程為I(nA)=343.63logc(nmolL1)+534.45(R=0.9979)，檢測(cè)限（LOD）為0.0167nmolL1（S/N=3）。為了驗(yàn)證PEC生物傳感器具有良好的檢測(cè)特異性，我們用AMP、CMP、GMP和UMP替代m6ATP制備了4個(gè)生物傳感器。記錄各組的PEC反應(yīng)。圖3.5C顯示了光電流的變化（ΔI=I1I0），其中I0是Ab/MPBA/AuNPs/Bi2O3/B-TiO2/ITO電極的光電流，I1是全電極的光電流�？梢杂^察到由AMP、CMP、GMP和UMP處理的電極的光電流

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Synthesis of BiVO4-g-C3N4 Composite Photocatalyst with Improved Visible Light-induced Photocatalytic Activity[J]. 楊明,JIN Xiaoqi.  Journal of Wuhan University of Technology（Materials Science Edition）. 2015(02)



本文編號(hào)：3102168