轉(zhuǎn)錄因子（transcription factor, TF）是一種具有特殊結(jié)構(gòu)、行使調(diào)控基因表達(dá)功能的蛋白質(zhì),又稱反式作用因子。通過識(shí)別與結(jié)合真核基因啟動(dòng)子中的順式作用元件,使目的基因的表達(dá)得到精準(zhǔn)的調(diào)控。擬南芥在植物結(jié)構(gòu)功能、進(jìn)化遺傳及生態(tài)學(xué)領(lǐng)域的研究被廣泛使用,是大家廣為熟悉的植物遺傳學(xué)研究中的模式生物。擬南芥模式植物的優(yōu)點(diǎn)是其功能基因較容易獲得。在植物功能基因的研究中,常常需要實(shí)現(xiàn)目的基因以特定的強(qiáng)度、在特定的時(shí)間和空間表達(dá)的效果,而這正是因?yàn)檗D(zhuǎn)錄因子在這過程中所起的作用。CBF1和NAC是兩種重要的激活植物抗逆基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子。擬南芥CBF1轉(zhuǎn)錄因子能調(diào)控一組抗干旱和抗低溫基因的表達(dá),從而有效提高植物體對(duì)干旱和低溫的抗性能力；擬南芥NAC主要參與調(diào)控植物低溫、干旱、激素、高鹽、生長(zhǎng)發(fā)育及病原脅迫反應(yīng)等相關(guān)過程。本研究以擬南芥（Arabidopsis thaliana）葉片為研究材料,通過基因克隆和表達(dá)的方法初步研究了植物轉(zhuǎn)錄因子CBFl和NAC的功能,為后續(xù)植物抗逆性能改良打好基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)首先用Trizol試劑法提取總RNA,經(jīng)RT-PCR反轉(zhuǎn)錄,之后擴(kuò)增CBF1基因和NAC基... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：41 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 擬南芥簡(jiǎn)介
    1.2 轉(zhuǎn)錄因子的介紹
        1.2.1 轉(zhuǎn)錄因子CBF1的一般介紹
        1.2.2 轉(zhuǎn)錄因子NAC的介紹
    1.3 轉(zhuǎn)錄因子CBF及NAC的研究進(jìn)展
        1.3.1 轉(zhuǎn)錄因子CBF的研究進(jìn)展
        1.3.2 轉(zhuǎn)錄因子NAC的研究進(jìn)展
    1.4 轉(zhuǎn)錄因子的常用分離方法
第2章 研究意義
第3章 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 菌株、植物材料和載體
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 緩沖液配制
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 擬南芥總RNA的提取
        3.2.2 反轉(zhuǎn)錄
        3.2.3 引物的設(shè)計(jì)
        3.2.5 DNA片段的回收
        3.2.6 PCR片段與T載體的連接
        3.2.7 轉(zhuǎn)化
        3.2.8 鑒定轉(zhuǎn)化子
        3.2.9 質(zhì)粒DNA的提取
        3.2.10 雙酶切鑒定
        3.2.11 CBF1基因的原核表達(dá)
第4章 結(jié)果與分析
    4.1 總RNA的提取
    4.2 RT-PCR擴(kuò)增CBF1、NAC基因
    4.3 擴(kuò)增片段與T載體連接
        4.3.1 擴(kuò)增CBF1基因片段與T載體連接
        4.3.2 擴(kuò)增NAC基因片段與T載體連接
    4.4 轉(zhuǎn)錄因子基因序列分析
        4.4.1 CBF1基因序列分析
        4.4.2 NAC基因序列分析
    4.5 CBF1基因的原核表達(dá)
第5章 討論
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]擬南芥abi5基因的分子克隆及其在原核細(xì)胞中的表達(dá)和純化[J]. 馬燕林,馬建忠,王永剛.  植物生理學(xué)報(bào). 2014(02)
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[4]與擬南芥抗寒性相關(guān)的CBF3和AtGolS3基因克隆及其表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 鐘克亞,葉妙水,胡新文,符少萍,郭建春.  植物生理學(xué)通訊. 2006(04)
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[6]轉(zhuǎn)錄因子與植物抗逆性研究進(jìn)展[J]. 劉欣,李云.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2006(04)
[7]DREB轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展[J]. 王平榮,鄧曉建,高曉玲,陳靜,萬(wàn)佳,姜華,徐正君.  遺傳. 2006(03)
[8]一個(gè)新的編碼大豆DREB轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及鑒定[J]. 王巧燕,陳明,邱志剛,程憲國(guó),徐兆師,李連城,馬有志.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2005(05)
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[10]轉(zhuǎn)錄因子CBF4誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的克隆及功能分析[J]. 霍秀文,米福貴,云錦鳳,魏建華.  分子植物育種. 2005(03)

博士論文
[1]甘菊NAC基因的功能研究及對(duì)露地菊花的遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 董鳳麗.東北林業(yè)大學(xué) 2014
[2]真菌蛋白激發(fā)子誘導(dǎo)棉花抗病增產(chǎn)的作用機(jī)制及其基因?qū)γ藁ㄟz傳轉(zhuǎn)化的研究[D]. 張志剛.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]擬南芥抗旱候選基因的SNP及其與抗旱性狀的相關(guān)性分析以及ATHK1基因的功能研究[D]. 郝崗平.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004

碩士論文
[1]擬南芥abi5基因的分子克隆及其在原核細(xì)胞中的表達(dá)[D]. 曹如星.蘭州理工大學(xué) 2012
[2]小麥葉片水分脅迫下cDNA-AFLP差異表達(dá)分析[D]. 李劍峰.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]利用DREB轉(zhuǎn)錄因子改良小麥耐鹽性的研究[D]. 梁欣欣.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2004



本文編號(hào)：3080288