發(fā)布時(shí)間：2021-03-12 22:43

　　小分子熒光探針因結(jié)構(gòu)可調(diào)控、特異性好、毒性小和可視化檢測(cè)等獨(dú)特的性能,已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥理學(xué)和環(huán)境科學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域。目前,已報(bào)道了各種熒光探針用于生物學(xué)或環(huán)境科學(xué)中某些物質(zhì)的檢測(cè)。但是,在復(fù)雜的生物系統(tǒng)中,基于單個(gè)發(fā)射波長(zhǎng)熒光強(qiáng)度信號(hào)的測(cè)量容易受到探針濃度、固有熒光、儀器和環(huán)境因素的影響,從而導(dǎo)致定量分析不準(zhǔn)確;生物體系中不可避免的自吸收和自發(fā)熒光,使短波長(zhǎng)發(fā)射的熒光探針不適合在組織和活體中進(jìn)行深層成像,從而限制了它們?cè)谏锵到y(tǒng)中的進(jìn)一步應(yīng)用。因此,本文通過(guò)設(shè)計(jì)比率或近紅外（640-900 nm）的熒光探針,最大程度上減小自發(fā)熒光、自吸收等背景干擾,以實(shí)現(xiàn)復(fù)雜生物樣品中活性物質(zhì)的檢測(cè),并分別以常見(jiàn)生物活性物質(zhì)堿性磷酸酶（ALP）、過(guò)氧化氫（H₂O₂）和半胱氨酸（Cys）為研究對(duì)象,設(shè)計(jì)合成了三種不同類(lèi)型的熒光探針,具體內(nèi)容如下:（1）基于ALP可催化水解各種底物上磷酸基團(tuán)的特異性,設(shè)計(jì)合成了一種可見(jiàn)光發(fā)射的比率型熒光探針2,4-雙（苯并[d]噻唑-2-基）苯基磷酸二氫鹽（PDP）用于ALP檢測(cè)。當(dāng)加入ALP溶液時(shí),PDP分子中的磷酸基... 

【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：137 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 小分子熒光探針
    1.3 小分子熒光探針的響應(yīng)機(jī)制
    1.4 小分子熒光探針的分類(lèi)
        1.4.1 紫外-可見(jiàn)光激發(fā)/發(fā)射小分子熒光探針
        1.4.2 可見(jiàn)光激發(fā)/近紅外發(fā)射小分子熒光探針
        1.4.3 近紅外激發(fā)/發(fā)射小分子熒光探針
    1.5 小分子熒光探針在生物活性物質(zhì)檢測(cè)中的應(yīng)用
        1.5.1 堿性磷酸酶熒光探針的研究進(jìn)展
        1.5.2 過(guò)氧化氫熒光探針研究進(jìn)展
        1.5.3 半胱氨酸熒光探針的研究進(jìn)展
    1.6 本論文構(gòu)思
第二章 一種可見(jiàn)光發(fā)射的比率型熒光探針用于堿性磷酸酶的檢測(cè)
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 儀器與試劑
        2.2.2 探針PDP的合成及表征
        2.2.3 分析液的配置與檢測(cè)
        2.2.4 血清中ALP的檢測(cè)
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 探針的光譜性質(zhì)及可行性研究
        2.3.2 檢測(cè)機(jī)理研究
        2.3.3 檢測(cè)條件優(yōu)化
        2.3.4 探針對(duì)ALP響應(yīng)性能
        2.3.5 酶動(dòng)力學(xué)考察
        2.3.6 選擇性考察
        2.3.7 ALP抑制劑考察
        2.3.8 實(shí)際樣品檢測(cè)
    2.4 本章小結(jié)
第三章 一種近紅外發(fā)射的熒光探針用于細(xì)胞及斑馬魚(yú)中過(guò)氧化氫的成像
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 試劑與儀器
        3.2.2 探針DRP-B的合成及表征
        3.2.3 樣品的配置與檢測(cè)
        3.2.4 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        3.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)和熒光成像
        3.2.6 斑馬魚(yú)熒光成像
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 探針的光譜性質(zhì)及可行性研究
        3.3.2 探針對(duì)H2O2檢測(cè)機(jī)理
        3.3.3 檢測(cè)條件優(yōu)化
        3.3.4 探針對(duì)H2O2的響應(yīng)性能
        3.3.5 選擇性考察
        3.3.6 活細(xì)胞熒光成像
        3.3.7 斑馬魚(yú)的熒光成像
    3.4 本章小結(jié)
第四章 一種近紅外激發(fā)/發(fā)射的熒光探針用于細(xì)胞和斑馬魚(yú)中半胱氨酸的成像
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 試劑與儀器
        4.2.2 探針DXM的合成與表征
        4.2.3 檢測(cè)溶液的配置與檢測(cè)
        4.2.4 血清中Cys的檢測(cè)
        4.2.5 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        4.2.6 細(xì)胞培養(yǎng)和熒光成像
        4.2.7 斑馬魚(yú)熒光成像
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 探針的光譜性質(zhì)和可行性研究
        4.3.2 探針對(duì)Cys檢測(cè)機(jī)理
        4.3.3 檢測(cè)條件優(yōu)化
        4.3.4 探針對(duì)Cys的響應(yīng)性能
        4.3.5 選擇性考察
        4.3.6 實(shí)際樣品檢測(cè)
        4.3.7 活細(xì)胞熒光成像
        4.3.8 斑馬魚(yú)的熒光成像
    4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)語(yǔ)
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
    附錄2 常用縮寫(xiě)一覽表
    附錄3 表格和相關(guān)化合物的圖譜
致謝



本文編號(hào)：3079113