目的:探討敲除Cx43后心臟發(fā)育缺陷以及第二生心區(qū)和心臟神經(jīng)嵴前體細胞的遷移分化是否異常。方法:取胚齡10d¹3d的Cx43基因敲除純合(Cx43^-/-)小鼠和Cx43野生型(Cx43^+/+)小鼠石蠟包埋連續(xù)切片,進行免疫組織化學和免疫熒光顯色以及心臟的三維重建。結(jié)果:1.Cx43基因敲除后的小鼠在胚齡10d¹1d,Isl1陽性第二生心區(qū)細胞仍由前腸腹側(cè)經(jīng)弓動脈延續(xù)至心包腔背側(cè)壁,以及經(jīng)鰓弓核心間充質(zhì)、心包腔背側(cè)壁延續(xù)至流出道遠端。至胚齡13d,升主動脈、肺動脈干形成后,其管壁以及心室左、右流出道壁均可見Isl1陽性細胞的分布,但Isl1陽性細胞數(shù)量明顯減少（P<0.01）。2.Cx43基因敲除后的小鼠在胚齡10d¹1d,Ap2α陽性神經(jīng)嵴細胞仍可見于弓動脈壁以及動脈囊背側(cè)與腹側(cè)壁,但其數(shù)量少于野生型小鼠胚胎（P<0.01）。結(jié)論:1.Cx43基因敲除后第二生心區(qū)Isl1陽性細胞和Ap2α陽性神經(jīng)嵴細胞的遷移路徑和分布模式未發(fā)生異常,只是表現(xiàn)為遷移細胞數(shù)量的減少。2... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

胚齡10dCx43-/-小鼠橫切面免疫組化染色A示Cx43；B~D示Isl1；E，F(xiàn)分別示SMA、MHC免疫組化染色；Cx43-/-小鼠胚胎未見Cx43陽性（A），前腸腹側(cè)內(nèi)胚層的正中部仍表達Isl1，相鄰間充質(zhì)內(nèi)也可見Isl1陽性細胞密集分布

山西醫(yī)科大學碩士學位論文11圖3胚齡11dCx43+/+小鼠橫切面免疫組化和免疫熒光雙染色A，B示Isl1；B為A的放大圖；C，D分別示SMA、MHC免疫組化染色；E示Isl1、Cx43熒光雙染；Cx43+/+小鼠胚胎前腸內(nèi)胚層腹側(cè)Isl1陽性細胞形成錐形結(jié)構(gòu)（A，B星號），經(jīng)兩側(cè)弓動脈之間延伸至流出道遠端壁（B箭頭），該部位為α-SMA、MHC陽性(C，D箭頭)。前腸腹側(cè)Isl1、Cx43雙陽性間充質(zhì)細胞較胚齡10d增多（E）。A：Bar=500μm；B~D：Bar=200μm；E：Bar=100μm。fg：前腸；oft：流出道；aa：弓動脈圖4胚齡11dCx43-/-小鼠橫切面免疫組化染色A示Isl1；B，C分別示SMA、MHC免疫組化染色；Cx43-/-小鼠胚胎前腸內(nèi)胚層腹側(cè)的間充質(zhì)（A星號）、心包腔背側(cè)壁（A箭頭）可見isl1陽性細胞，但前腸腹側(cè)未能形成典型的錐形結(jié)構(gòu)（A星號）。相鄰切片染色顯示Isl1陽性的流出道遠端可見α-SMA，MHC的陽性表達（B，C箭頭）。A~C：Bar=200μm。fg：前腸；oft：流出道

山西醫(yī)科大學碩士學位論文12圖5胚齡11.5dCx43+/+小鼠橫切面免疫組化染色A，B示Isl1；C，D分別示MHC、SMA免疫組化染色；B為A的放大圖；Cx43+/+小鼠胚胎前腸腹側(cè)Isl1陽性的錐形結(jié)構(gòu)體積增大（A，B星號）。動脈囊進入心包腔，MHC染色陰性（C箭頭），錐形結(jié)構(gòu)的尖端Isl1陽性細胞向流出道非心肌部延伸（B箭頭），該部位α-SMA陽性（D細箭頭），流出道心內(nèi)膜墊也可見α-SMA強陽性表達（D粗箭頭）。A，C，D：Bar=500μm；B：Bar=200μm。fg：前腸；oft：流出道

【參考文獻】：
期刊論文
[1]鼠胚呼吸內(nèi)胚層相關(guān)第二生心區(qū)發(fā)育中的上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化[J]. 師亮,李慧超,景雅,謝建山,陳浩,蔡玉瑾,楊艷萍.  解剖學報. 2018(04)
[2]連接蛋白43在小鼠胚胎心的時空表達規(guī)律[J]. 喬愛秀,景雅,蔡玉瑾,馮雅琴,楊艷萍,李海榮,師亮.  解剖學雜志. 2012 (04)
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[4]Cx43基因剔除小鼠心臟錐干部的異常發(fā)育[J]. 趙曉晴,黃國英,謝利劍,彭濤,周國民.  中華醫(yī)學雜志. 2005(38)



本文編號：3061623