目的研究lncRNA SNHG20在神經(jīng)元活化過程中的作用。方法通過對KCl激活的神經(jīng)元數(shù)據(jù)庫進(jìn)行分析,篩選出變化明顯的lncRNA;使用實時熒光定量PCR（RT-qPCR）對在體外培養(yǎng)的KCl活化的神經(jīng)元以及學(xué)習(xí)記憶模式刺激的實驗動物的海馬腦區(qū)進(jìn)行結(jié)果驗證;RT-qPCR以及Western blot檢測過表達(dá)SNHG20的神經(jīng)元中相關(guān)基因的表達(dá);使用4-Thiouridine（4sU）標(biāo)記新生成的RNA并通過RT-qPCR檢測新生成的c-Fos mRNA水平;海馬腦區(qū)AAV病毒腦注射后,對小鼠進(jìn)行相關(guān)的行為學(xué)檢測。結(jié)果 SNHG20的表達(dá)水平在神經(jīng)元活化后快速并且明顯下降。SNHG20過表達(dá)后,抑制了早期響應(yīng)基因c-Fos的RNA以及蛋白質(zhì)水平,且新生成的c-Fos的mRNA水平較對照組明顯下降。SNHG20也抑制了c-Fos通路下游靶基因,特別是Annexin A2（ANXA2）的水平。在體的海馬腦區(qū)SNHG20過表達(dá)的小鼠表現(xiàn)出明顯的學(xué)習(xí)記憶功能障礙。結(jié)論 SNHG20能夠通過抑制c-Fos的表達(dá)參與調(diào)控學(xué)習(xí)記憶過程。 

【文章來源】：中國藥理學(xué)通報. 2020,36(11)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 原代神經(jīng)元的培養(yǎng)
    1.2 RNA提取和RT-qPCR
    1.3 蛋白質(zhì)免疫印跡分析
    1.4 質(zhì)粒構(gòu)建
    1.5 慢病毒制取
    1.6 AAV病毒制取及海馬注射
    1.7 4-Thiouridine pulldown
    1.8 行為學(xué)實驗
    1.9 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 神經(jīng)元活化后SNHG20明顯下調(diào)
    2.2 SNHG20通過抑制c-Fos的轉(zhuǎn)錄影響c-Fos的水平
    2.3 SNHG20抑制c-Fos下游基因表達(dá)
    2.4 SNHG20損傷小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鈣信號在糖尿病周圍神經(jīng)病變中感覺神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞功能異常的研究進(jìn)展[J]. 薛蕓,梁尚棟.  中國藥理學(xué)通報. 2017(03)



本文編號：2982283