發(fā)布時(shí)間：2021-01-01 14:11

　　犬細(xì)小病毒（Canine parvovirus,CPV）感染犬主要表現(xiàn)為出血性腸炎,對(duì)幼犬的致死率高達(dá)70%,該病呈全球性流行。CPV極易發(fā)生變異,自20世紀(jì)70年代后期出現(xiàn)至今,已出現(xiàn)了多種抗原型流行毒株,包括CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c以及New CPV-2a、New CPV-2b等。對(duì)流行毒株的流行病學(xué)調(diào)查和病原特征研究有助于該病的防控,本研究的目的是調(diào)查成都市CPV的流行情況及病原生物學(xué)特征。主要研究結(jié)果如下:1.CPV的分布及其混合感染情況為了解成都市CPV的感染情況,采用CPV特異PCR方法,對(duì)2016-2018年采自成都市6家寵物醫(yī)院176份幼犬腹瀉糞便樣本進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)CPV陽(yáng)性樣本中犬冠狀病毒（Canine coronavirus,CCoV）、犬瘟熱病毒（Canine distemper virus,CDV）、犬輪狀病毒（Canine rotavirus,CRV）、犬微小病毒（Minute virus of canines,MVC）、犬腺病毒2型（Canine Adenovirus type 2,CAV-2）、犬圓環(huán)病毒（CanineCircovirus,... 

【文章來(lái)源】：西南民族大學(xué)四川省

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CPV的基因組結(jié)構(gòu)圖

成都市犬細(xì)小病毒的分子檢測(cè)及病原生物學(xué)特征20：代表本研究獲得的CPVVP2基因序列;：CPVVP2geneinthisstudy;圖2-3基于VP2基因核苷酸序列系統(tǒng)發(fā)育樹（N-J）Fig2-3Phylogenetictree(N-J)basedonthecompleteVP2geneofCPV-22.3.2VP2基因片段的氨基酸位點(diǎn)變化本研究所鑒定的60個(gè)VP2基因片段所推導(dǎo)的氨基酸序列片段與參考毒株相比共出現(xiàn)了4個(gè)氨基酸位點(diǎn)的突變，分別為Ser297Ala100%（60/60）、Tyr324Ile96.67%（58/60）、Gln370Arg16.67%（10/60）、Thr440Ala78.33%（47/60），60個(gè)氨基酸序列中除2個(gè)NewCPV-2b型毒株外的58個(gè)毒株均在在第324位氨基酸位點(diǎn)發(fā)生了突變，而第370位氨基酸位點(diǎn)的突變僅出現(xiàn)在了所有CPV-2c型毒株中（10/10）；第440位氨基酸位點(diǎn)在60個(gè)CPV毒株中共有47（78.3%）個(gè)存在位點(diǎn)突變，分別為95.35%（41/43）的NewCPV-2a型毒株、71.43%（5/7）的NewCPV-2b

成都市犬細(xì)小病毒的分子檢測(cè)及病原生物學(xué)特征32M:DNAMarker;P:陽(yáng)性對(duì)照;N:陰性對(duì)照;1~3:SC-16/2017、SC-13/2017、SC-14/2017分離株目的條帶M:DNAMarker;P:Positivecontrol;N:Negativecontrol;1~3：SC-16/2017、SC-13/2017、SC-14/2017isolates圖3-2分離毒株第5代培養(yǎng)物的PCR檢測(cè)結(jié)果Fig3-2PCRdetectionresultsofthefifthgenerationcultureofisolatedstrains對(duì)第5代細(xì)胞培養(yǎng)液的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序分型顯示與最初接毒樣本的抗原型相同（VP2基因第426位氨基酸位點(diǎn)變化情況），即SC-16/2017為NewCPV-2a型、SC-13/2017為NewCPV-2b型、SC-14/2017為CPV-2c型（圖3-3）。圖3-3分離株P(guān)CR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果Fig3-3PCRproductsequencingresultsofisolates2.2.2間接免疫熒光鑒定CPV各分離毒株的間接免疫熒光試驗(yàn)表明，熒光顯微鏡下觀察可見(jiàn)分離毒株感染細(xì)胞具有亮綠色的特異性熒光，而陰性對(duì)照未出現(xiàn)綠色熒光，見(jiàn)圖3-4。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]抗CPV-2a卵黃抗體的制備及其毒理學(xué)評(píng)價(jià)[D]. 魏勝男.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]犬瘟熱病毒和犬細(xì)小病毒高免卵黃抗體的制備及其殼聚糖微球的研究[D]. 張婧蘭.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[5]犬細(xì)小病毒（CPV）的分離鑒定及其卵黃抗體（IgY）治療制劑的研制[D]. 劉志強(qiáng).石河子大學(xué) 2008
[6]犬細(xì)小病毒單克隆抗體在治療犬細(xì)小病毒病上的應(yīng)用研究[D]. 王彤光.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2003



本文編號(hào)：2951435