自生命在地球上誕生之日起,就以高度復(fù)雜且協(xié)調(diào)的機(jī)制運(yùn)轉(zhuǎn)。在有機(jī)生命體中,諸如核酸,氨基酸,糖之類化合物是機(jī)體運(yùn)轉(zhuǎn)的物質(zhì)基礎(chǔ)。含硫化合物是含有硫原子的一類化合物,例如硫醇（包括半胱氨酸（Cys）、谷胱甘肽（GSH）、同型半胱氨酸（Hcy）等）、硫化氫等。這些都是生命活動(dòng)過(guò)程中的重要參與者,其中大多以游離或蛋白質(zhì)的形式存在于肽鏈的合成和折疊過(guò)程中,在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞凋亡、氧化還原反應(yīng)等生命過(guò)程中起著調(diào)節(jié)作用。檢測(cè)生物體內(nèi)這些小分子濃度的實(shí)時(shí)變化對(duì)阿爾茲海默癥、糖尿病、慢性腎病、唐氏綜合征等類疾病的早期預(yù)防和監(jiān)控,以及疾病生理病理學(xué)探究有重要意義。熒光探針以其對(duì)待測(cè)物的分析具有低組織損傷性、高靈敏度、檢測(cè)快速的優(yōu)點(diǎn)而引起人們的注意。并且對(duì)于熒光探針而言,其突出的優(yōu)勢(shì)在于可以在共聚焦激光掃描顯微鏡下以非侵入的方式實(shí)現(xiàn)在活細(xì)胞中對(duì)生物分析物的高時(shí)空觀察。在種類繁多的熒光團(tuán)中,香豆素類熒光團(tuán)具有易于修飾、斯托克斯位移大、光學(xué)性能穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),近年來(lái)一直是研究的熱點(diǎn)。本文以識(shí)別小分子硫醇為設(shè)計(jì)思路,基于空間效應(yīng),設(shè)計(jì)并合成了兩種以香豆素衍生物為熒光團(tuán)的熒光探針,并對(duì)探針的光學(xué)性能和生物應(yīng)用進(jìn)行了探索... 

【文章來(lái)源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

探針1-1與Cys和SO32-的作用機(jī)理2-

基于香豆素的硫醇熒光探針設(shè)計(jì)及生物應(yīng)用4圖1.1探針1-1與Cys和SO32-的作用機(jī)理Figure1.1Reactionmechanismof1-1withCysandSO32-Wang的研究小組報(bào)告了用于檢測(cè)Hg2+的熒光增強(qiáng)型化學(xué)傳感器1-2[25]。熒光團(tuán)由7-二乙基氨基-3-甲�；愣顾貥�(gòu)成，以2,3-二巰基琥珀酸為基礎(chǔ)的1,3-二硫代烷保護(hù)甲�；�。DMSA是已知的Hg2+高親和力配體，因此，在含0.2％DMSO的水溶液中添加該金屬離子會(huì)導(dǎo)致Hg2+-DMSA復(fù)合物的形成以及7-二乙基氨基-3-甲�；愣顾氐拿摫Ｗo(hù)，從而導(dǎo)致在502nm處出現(xiàn)明亮的熒光信號(hào)，熒光增強(qiáng)23倍，檢出限約為10nM。在測(cè)試的金屬離子中。隨后，探針1-2進(jìn)一步成功應(yīng)用于感測(cè)MCF細(xì)胞中的Hg2+。圖1.2探針1-2與F-的作用機(jī)理Figure1.2Interactionmodeof1-2withF-根據(jù)Dey等人的報(bào)道[26]，探針1-3基于FRET機(jī)理表現(xiàn)出紅色熒光增強(qiáng)型響應(yīng)。在該體系中添加Cu2+后，絡(luò)合物伴隨該二聯(lián)體羅丹明部分的螺環(huán)開(kāi)口。由于熒光共振能量轉(zhuǎn)移效應(yīng)（FRET），香豆素的激發(fā)導(dǎo)致羅丹明發(fā)射熒光。監(jiān)測(cè)香豆素（藍(lán)色）和羅丹明（紅色）發(fā)射譜帶，可以在HeLa細(xì)胞中清楚地檢測(cè)到Cu2+。圖1.3探針1-3與Cu2+的結(jié)合機(jī)理Figure1.3Bindingmechanismof1-1withCu2+

基于香豆素的硫醇熒光探針設(shè)計(jì)及生物應(yīng)用4圖1.1探針1-1與Cys和SO32-的作用機(jī)理Figure1.1Reactionmechanismof1-1withCysandSO32-Wang的研究小組報(bào)告了用于檢測(cè)Hg2+的熒光增強(qiáng)型化學(xué)傳感器1-2[25]。熒光團(tuán)由7-二乙基氨基-3-甲�；愣顾貥�(gòu)成，以2,3-二巰基琥珀酸為基礎(chǔ)的1,3-二硫代烷保護(hù)甲�；�。DMSA是已知的Hg2+高親和力配體，因此，在含0.2％DMSO的水溶液中添加該金屬離子會(huì)導(dǎo)致Hg2+-DMSA復(fù)合物的形成以及7-二乙基氨基-3-甲酰基香豆素的脫保護(hù)，從而導(dǎo)致在502nm處出現(xiàn)明亮的熒光信號(hào)，熒光增強(qiáng)23倍，檢出限約為10nM。在測(cè)試的金屬離子中。隨后，探針1-2進(jìn)一步成功應(yīng)用于感測(cè)MCF細(xì)胞中的Hg2+。圖1.2探針1-2與F-的作用機(jī)理Figure1.2Interactionmodeof1-2withF-根據(jù)Dey等人的報(bào)道[26]，探針1-3基于FRET機(jī)理表現(xiàn)出紅色熒光增強(qiáng)型響應(yīng)。在該體系中添加Cu2+后，絡(luò)合物伴隨該二聯(lián)體羅丹明部分的螺環(huán)開(kāi)口。由于熒光共振能量轉(zhuǎn)移效應(yīng)（FRET），香豆素的激發(fā)導(dǎo)致羅丹明發(fā)射熒光。監(jiān)測(cè)香豆素（藍(lán)色）和羅丹明（紅色）發(fā)射譜帶，可以在HeLa細(xì)胞中清楚地檢測(cè)到Cu2+。圖1.3探針1-3與Cu2+的結(jié)合機(jī)理Figure1.3Bindingmechanismof1-1withCu2+


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