【摘要】：鼠傷寒沙門(mén)氏菌rfbN基因編碼的蛋白為合成0-抗原的鼠李糖轉(zhuǎn)移酶,它負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)鼠李糖。我們構(gòu)建了鼠傷寒沙門(mén)氏菌rfbN基因缺失株以及阿拉伯糖調(diào)控rfbN基因表達(dá)的突變株,并對(duì)其進(jìn)行生物學(xué)特性的初步研究,主要內(nèi)容可歸納如下：1鼠傷寒沙門(mén)氏菌rfbN基因缺失株的構(gòu)建鼠傷寒沙門(mén)氏菌rfbN基因大小945bp,我們構(gòu)建了重組自殺性質(zhì)粒pYA4286-ΔrfbN,利用自殺性質(zhì)粒介導(dǎo)的同源重組方法,構(gòu)建了rfbN基因缺失株。LPS圖譜顯示,ArfbN缺失株沒(méi)有完整的LPS,其LPS結(jié)構(gòu)包括類脂A、核心多糖和一個(gè)半乳糖。我們構(gòu)建了15a-rfbN回補(bǔ)質(zhì)粒,將其電轉(zhuǎn)化入ΔrfbN缺失株,LPS圖譜顯示,15a-rfbN回補(bǔ)質(zhì)粒能夠恢復(fù)ΔrfbN缺失株的LPS結(jié)構(gòu),表明成功構(gòu)建rfbN基因缺失株。2鼠傷寒沙門(mén)氏菌阿拉伯糖調(diào)控rfbN基因突變株的構(gòu)建我們通過(guò)改造rfbN基因的SD序列和起始密碼子,構(gòu)建了重組自殺性質(zhì)粒pYA4286-ApagL-TT araC PBADrfbN,利用自殺性質(zhì)粒介導(dǎo)的同源重組方法,構(gòu)建了兩株阿拉伯糖調(diào)控rfbN基因表達(dá)的突變株:ΔrfbNΔpagL::TT araC PBADrfbN(起始密碼子ATG)和ΔrfbNΔpagL::TT araC PBADrfbN(起始密碼子GTG)。在有阿拉伯糖存在條件下,ArfbNApagL::TT araC PBADrfbN(起始密碼子ATG)突變株,調(diào)控表達(dá)rfbN基因,使細(xì)菌能夠合成完整的LPS；而沒(méi)有阿拉伯糖的條件下,rfbN基因不表達(dá),其LPS表型與ΔrfbN株相同。然而,在有阿拉伯糖存在條件下,ΔrfbNΔpagL:;TT araC PBADrfbN(起始密碼子GTG)突變株,rfbN基因少量表達(dá),細(xì)菌沒(méi)有完全恢復(fù)LPS結(jié)構(gòu)。3鼠傷寒沙門(mén)氏菌突變株生物學(xué)特性研究為了解析rfbN基因?qū)κ髠抽T(mén)氏菌生物學(xué)特性的影響,我們系統(tǒng)地比較了突變株與野生株在生長(zhǎng)曲線、泳動(dòng)與群集、對(duì)多粘菌素B的抵抗力、粘附與入侵及毒力這幾個(gè)方面的差異。結(jié)果表明,ArfbN缺失株與ΔrfbNApagL::TT araC PBADrfbN(起始密碼子ATG)突變株在體外生長(zhǎng)曲線、細(xì)胞粘附率、細(xì)胞入侵率與野生株無(wú)顯著性差異。相比之下,rfbN基因缺失后,菌株的泳動(dòng)和群集能力顯著下降(P0.001),在多粘菌素B作用下的存活率顯著下降(P0.001),毒力下降。同時(shí),在阿拉伯糖存在條件下,△rfbNΔpagL:TT araC PBADrfbN(起始密碼子ATG)突變株的泳動(dòng)和群集能力得到提升,而完全恢復(fù)對(duì)多粘菌素B的抵抗力。綜上所述,我們證實(shí),rfbN基因的缺失對(duì)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的體外繁殖、粘附與入侵沒(méi)有影響,卻能顯著降低細(xì)菌的毒力和對(duì)生物活性物質(zhì)的抵抗力。
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S852.61

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃倩;鼠傷寒沙門(mén)氏菌腸炎的大便觀察[J];護(hù)士進(jìn)修雜志;1993年07期

2 梁燕霞;李小南;伍紹東;;204例兒童感染鼠傷寒沙門(mén)氏菌臨床分析[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2016年17期

3 李文波;柳寶財(cái);修潔;;家兔鼠傷寒沙門(mén)氏菌病的診斷與防治[J];吉林畜牧獸醫(yī);2009年08期

4 張廣業(yè);警惕醫(yī)院內(nèi)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的感染[J];西藏醫(yī)藥雜志;2004年02期

5 徐志偉,陳益平,盧朝升,汪洪姣;鼠傷寒沙門(mén)氏菌腸炎24例分析[J];浙江臨床醫(yī)學(xué);2003年11期

6 張錦周,黃海雄,黃鈺,莊志雄,張炳堯,慈捷元;三氯乙烯對(duì)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的致突變實(shí)驗(yàn)[J];職業(yè)與健康;2002年03期

7 宋桂華,楊曉霞;加味葛根芩連湯治療小兒鼠傷寒沙門(mén)氏菌腸炎[J];河南中醫(yī);2001年01期

8 王龍,李維游,楊明華,張永蓮;家兔鼠傷寒沙門(mén)氏菌病綜合防制研究[J];中國(guó)養(yǎng)兔;2000年06期

9 錢開(kāi)成;鼠傷寒沙門(mén)氏菌腸炎1例[J];南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1996年01期

10 鞠孟范,張錫武,丁秀義;氟嶝酸藥灌腸治療鼠傷寒沙門(mén)氏菌腸炎113例療效觀察[J];醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志;1996年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 官玉容;劉作義;;35株鼠傷寒沙門(mén)氏菌藥物敏感及臨床情況分析[A];重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)2004年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2004年

2 何雪萍;劉書(shū)亮;敖曉琳;陳姝娟;鄒立扣;;鼠傷寒沙門(mén)氏菌對(duì)消毒劑的耐藥性[A];中國(guó)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會(huì)第十五屆年會(huì)論文摘要集[C];2018年

3 黃春;李沛;代勤龍;羅雅莉;趙新新;劉青;孔慶科;;腸桿菌共同抗原對(duì)鼠傷寒沙門(mén)氏菌生物特性和毒力影響研究[A];第三屆水禽疫病防控研討會(huì)論文集[C];2015年

4 郭愛(ài)珍;Dieter M.Schifferli;;鼠傷寒沙門(mén)氏菌1型菌毛介導(dǎo)細(xì)菌對(duì)小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞的粘附及侵襲研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下）[C];2003年

5 李正;程相朝;張春杰;張明亮;田芳華;龍塔;;鼠傷寒沙門(mén)氏菌crp/cya缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性初步研究[A];2012年中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分會(huì)暨中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)動(dòng)物病理生理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

6 黃春;李沛;代勤龍;羅雅莉;趙新新;劉青;孔慶科;;鼠傷寒沙門(mén)氏菌rm1C基因突變株的構(gòu)建及生物特性研究[A];第三屆水禽疫病防控研討會(huì)論文集[C];2015年

7 楊志偉;呂忠;王敖全;;DNA修復(fù)系統(tǒng)在鼠傷寒沙門(mén)氏菌5-28適應(yīng)突變產(chǎn)生中的作用[A];首屆中國(guó)青年學(xué)者微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2002年

8 黃靜瑋;程安春;汪銘書(shū);朱德康;劉馬峰;孫昆峰;楊喬;陳舜;賈仁勇;劉菲;吳英;陳孝躍;;鼠傷寒沙門(mén)氏菌特異性PCR、FQ-PCR和LAMP檢測(cè)敏感性比較[A];第三屆水禽疫病防控研討會(huì)論文集[C];2015年

9 朱森林;陳e

本文編號(hào)：2745388