本文關(guān)鍵詞：斑馬魚hemgn基因的克隆、表達(dá)模式和功能初探，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中國(guó)海洋大學(xué)》 2015年

斑馬魚hemgn基因的克隆、表達(dá)模式和功能初探

于丹丹  

【摘要】：Hemgn是一種定位于細(xì)胞核內(nèi)的核蛋白,已有的研究表明它可能與哺乳動(dòng)物的造血過程有關(guān)。在小鼠中,hemgn與人的EDAG (Embryonic Develop Associated Gene)及大鼠RP59高度同源,在胚胎發(fā)育過程中表達(dá)在卵黃囊的血島、原始造血細(xì)胞,胚胎肝組織、成年后主要表達(dá)在骨髓和脾臟。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),hemgn受GATA-1調(diào)控,且具有轉(zhuǎn)錄激活活性,可調(diào)節(jié)多種造血相關(guān)基因的表達(dá)。RP59在大鼠胚胎發(fā)育階段的表達(dá)與hemgn相似,但同時(shí)與大鼠的骨發(fā)育有關(guān)。在家禽雞中也存在其同源基因cHEMGN,它不僅表達(dá)于造血器官中,而且還表達(dá)于性腺中,推測(cè)它可能參與雞的性別分化。因此,hemgn是一種造血組織特異表達(dá),對(duì)造血細(xì)胞增殖、分化起重要調(diào)控作用的新基因,參與了造血發(fā)生多個(gè)過程的調(diào)控。但目前對(duì)其作用機(jī)制尚缺乏深入的了解。與在哺乳動(dòng)物中的研究相比,在魚類中還未見對(duì)hemgn基因的報(bào)道。本論文首先對(duì)斑馬魚hemgn基因進(jìn)行了克隆和進(jìn)化分析、然后對(duì)其組織分布、胚胎發(fā)育時(shí)期的時(shí)空表達(dá)進(jìn)行了研究。序列分析顯示,斑馬魚hemgn基因全長(zhǎng)1075bp,編碼198個(gè)氨基酸,它與其他脊椎動(dòng)物物種的同源性較低,約為19%。共線性分析顯示,它與人、小鼠的同源基因都處于相似的基因座位上,因此,我們認(rèn)為所克隆的基因即為斑馬魚的hemgn,命名為zhmgn。更進(jìn)一步的進(jìn)化分析顯示,hemgn僅存在于部分脊椎動(dòng)物中,推測(cè)可能是進(jìn)化過程中出現(xiàn)的一種新基因。用實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)進(jìn)行組織表達(dá)分析顯示,zhmgn基因的轉(zhuǎn)錄本在腎臟中的表達(dá)量最高,其次在肝臟、脾臟、腸及心臟中表達(dá),在眼、肌肉和腦中的表達(dá)量相對(duì)較低。胚胎整體原位雜交顯示,受精卵發(fā)育到咽裂期之前(24hr),hemgn沒有檢測(cè)到轉(zhuǎn)錄本表達(dá),在咽裂期之后有表達(dá),在48hr表達(dá)于孵化腺,胸鰭以及鼻板處等部位。另外,zhmgn轉(zhuǎn)染人白血病細(xì)胞K562后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目明顯減少,說明zhmgn對(duì)K562細(xì)胞生長(zhǎng)有一定抑制作用。本文描述了zhmgn基因的組織表達(dá)以及胚胎時(shí)空表達(dá)模式,zhmgn具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)(或可能有促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用),這些結(jié)果為以后zhmgn基因功能的深入研究奠定了一定的基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：Q78
【目錄】：

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