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豬嗜血支原體SYBR Green qPCR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2016-12-18 20:43

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《山西農(nóng)業(yè)大學(xué)》 2015年

豬嗜血支原體SYBR Green qPCR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用

王永威  

【摘要】:目的:建立檢測(cè)M.suis的SYBR Green qPCR方法。方法:通過(guò)克隆qPCR擴(kuò)增片段建立質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)行qPCR擴(kuò)增獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線;通過(guò)敏感性試驗(yàn),特異性試驗(yàn)和重復(fù)性試驗(yàn)評(píng)估qPCR方法。結(jié)果:qPCR可以特異性擴(kuò)增到M.suis 16S rRNA基因中大小為157bp的片段,而對(duì)PRRSV、PCV2、PPV、PRV、E. coli和S. aureus等病原體沒(méi)有擴(kuò)增;標(biāo)準(zhǔn)曲線的r2=0.996,E=98.4%; qPCR的靈敏度是常規(guī)PCR的100倍;qPCR與常規(guī)PCR對(duì)樣品檢測(cè)無(wú)顯著差異(p0.05)。結(jié)論:成功建立了檢測(cè)M.suis感染的SYBR Green qPCR方法,其靈敏性高,特異性和重復(fù)性良好,適用于臨床上和實(shí)驗(yàn)室中對(duì)M.suis進(jìn)行定量檢測(cè)。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S852.62
【目錄】:

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  本文關(guān)鍵詞:豬嗜血支原體SYBR Green qPCR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):219435

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