發(fā)布時(shí)間：2018-06-27 08:29

  本文選題：CHO細(xì)胞 + 細(xì)胞培養(yǎng)��； 參考：《吉林大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是當(dāng)今生物工程領(lǐng)域中的前沿技術(shù)之一,無(wú)論是在研究還是在生產(chǎn)實(shí)踐方面都對(duì)當(dāng)代生物技術(shù)有著重要的影響。雖然目前市售的商業(yè)化培養(yǎng)基已具有非常好的廣譜性,但是卻缺少針對(duì)性。針對(duì)某一細(xì)胞品種設(shè)計(jì)對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基成分無(wú)疑是需要耗費(fèi)大量的金錢和時(shí)間,利用多種市售的培養(yǎng)基進(jìn)行不同比例的混合,可以在較短時(shí)間內(nèi)使細(xì)胞培養(yǎng)得到針對(duì)性優(yōu)化,從而提高產(chǎn)物的產(chǎn)量。方法:本文利用了市售的幾種常用培養(yǎng)基,對(duì)CHO細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),采用先篩選后優(yōu)化組合的方式進(jìn)行針對(duì)文中的CHO細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行優(yōu)化。篩選和優(yōu)化又分為兩部分進(jìn)行:一是基礎(chǔ)培養(yǎng)基的篩選和優(yōu)化;二是補(bǔ)料培養(yǎng)基的篩選和優(yōu)化。在培養(yǎng)過(guò)程中檢測(cè)細(xì)胞的活率、密度以及產(chǎn)物的表達(dá)量作為培養(yǎng)基的評(píng)價(jià)指標(biāo),用以考察培養(yǎng)基的優(yōu)劣。結(jié)果:通過(guò)對(duì)基礎(chǔ)培養(yǎng)基和補(bǔ)料培養(yǎng)基的篩選、優(yōu)化,使得最終的利用混合培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞不論是在細(xì)胞密度、活率還是產(chǎn)物蛋白的表達(dá)量方面都優(yōu)于單一培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞。通過(guò)優(yōu)化使得基礎(chǔ)培養(yǎng)基篩在最細(xì)胞高密度方面:混合培養(yǎng)基的平均最高密度高出單一培養(yǎng)基的平均最高密度9.8%;在最后細(xì)胞活率方面,混合培養(yǎng)基的最終平均活率高出單一培養(yǎng)基的最終平均活率11.8%;在最終蛋白產(chǎn)量方面,混合培養(yǎng)基的最終產(chǎn)量高出單一培養(yǎng)基的最終產(chǎn)量17.4%。通過(guò)優(yōu)化補(bǔ)料培養(yǎng)基在最細(xì)胞高密度方面:混合培養(yǎng)基的平均最高密度高出單一培養(yǎng)基的平均最高密度11.0%;在最后細(xì)胞活率方面,混合培養(yǎng)基的最終平均活率高出單一培養(yǎng)基的最終平均活率26.6%;在最終蛋白產(chǎn)量方面,混合培養(yǎng)基的最終產(chǎn)量高出單一培養(yǎng)基的最終產(chǎn)量20.6%。結(jié)論通過(guò)初步篩選和優(yōu)化組合的方式進(jìn)行多種培養(yǎng)基的成分配比可以在短時(shí)間內(nèi)提高細(xì)胞密度、提升細(xì)胞活率的維持時(shí)間從而提高目的蛋白的產(chǎn)量。
[Abstract]:Objective: animal cell culture technology is one of the frontier technologies in the field of bioengineering. It has important influence on modern biotechnology in both research and production practice. Although the commercial media on the market has a very good broad spectrum, but the lack of pertinence. It is necessary to design the corresponding culture medium components for a certain cell variety. It takes a lot of money and time to mix the different proportion of the medium sold on the market, which can optimize the cell culture in a short period of time. Thus, the output of the product is increased. Methods: Cho cells were cultured on several commonly used culture media in this paper. Cho cell culture was optimized by first screening and then optimizing combination. Screening and optimization are divided into two parts: one is the screening and optimization of the basic medium, the other is the screening and optimization of the supplement medium. In the process of culture, the cell viability, density and the expression of the product were measured as the evaluation indexes of the culture medium to evaluate the quality of the medium. Results: by screening and optimizing the basic medium and the supplement medium, the cells cultured in the mixed medium could be cultured in the cell density. Both the viability and the expression of protein were superior to those of the cells cultured on a single medium. By optimizing the basic medium sieve, the cell density is the highest: the average maximum density of the mixed medium is higher than the average maximum density of the single medium, and the final cell viability is 9.80% higher than the average maximum density of the single medium. The final average survival rate of the mixed medium was higher than that of the single medium, and the final yield of the mixed medium was 17.4% higher than that of the single medium, and the final protein yield of the mixed medium was 17.4% higher than that of the single medium. The maximum cell density of the mixed medium was higher than that of the single medium, and the final cell viability was higher than that of the single medium. The final average survival rate of the mixed medium was higher than that of the single medium, and the final yield of the mixed medium was 20.6 higher than that of the single medium. Conclusion by preliminary screening and optimizing combination, the composition ratio of various media can increase cell density and maintain time of cell viability in a short time, so as to increase the yield of target protein.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：Q813.11

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本文編號(hào)：2073311