發(fā)布時間：2017-12-31 22:20

  本文關(guān)鍵詞：異養(yǎng)小球藻保種技術(shù)研究與應(yīng)用　出處：《南陽師范學(xué)院》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：小球藻(Chlorella vulgaris)的異養(yǎng)培養(yǎng)克服了傳統(tǒng)小球藻培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的占地面積大、生長周期長、采收費用高、易受蟲害侵擾的缺點,但生長速度最高僅8 g/(L·D)、生長周期長達15 d,染菌率高達70%,與細菌、酵母菌等微生物相比,仍存在著生產(chǎn)效率低、生產(chǎn)成本高的問題,產(chǎn)業(yè)化難度極大。目前國內(nèi)對異養(yǎng)小球藻的研究僅停留在藻種選育、下游提取開發(fā)等方面,細胞培養(yǎng)是異養(yǎng)小球藻生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),無法解決細胞培養(yǎng)過程中存在的問題,就無法實現(xiàn)實業(yè)化。本課題以從提高細胞培養(yǎng)效率和成功率為目標(biāo),從篩選種子保存方法和抑菌劑入手,通過優(yōu)化種子保存工藝、選擇最佳抑菌劑,來達到快速接種、高比例接種的目的,在此基礎(chǔ)上異養(yǎng)小球藻能夠迅速達到對數(shù)生長期,從而縮短培養(yǎng)周期,進而降低能源消耗。而抑菌劑的應(yīng)用解決了染菌的問題,極大的降低了生產(chǎn)成本。在研究中得到了以下結(jié)論：1.繼代保存法采用15%接種量、液-固保存方法保存2個月的條件,獲得了90%的存活率,通過繼代保存方法達到種子保存的目的。2.噴霧干燥保存法選擇使用脫脂乳作為保護劑,保護劑添加比例為10%,在進風(fēng)溫度110℃、進風(fēng)頻率30 Hz、進料流量12 mL/min時作為最佳工藝參數(shù),在此條件下,異養(yǎng)小球藻細胞存活率可達29.3%、收粉率可達65.5%。3.冷凍真空干燥保存法選擇使用蔗糖作為冷凍真空干燥保護劑,保護劑添加比例為15%,在離心機轉(zhuǎn)速為5000 r/min、離心10 min、干燥時間為1 h、原料厚度為10 g/mm2時作為最佳工藝參數(shù),在此條件下,異養(yǎng)小球藻細胞存活率達到43%。4.固定化保存法選擇氯化鈣濃度為1%、海藻酸鈉濃度3%、固定化時間16 h,在此條件下5 min滲透率為85%、固定化小球的完整率為80%。5.在常規(guī)實驗室異養(yǎng)小球藻敞口培養(yǎng)5d的過程中,安菌素、克菌靈等抑菌劑的添加的確能夠避免染菌,但由于菌種特性差異,安菌素和克菌靈對異養(yǎng)小球藻的影響不大,而青霉素和山梨酸鉀則能夠抑制異養(yǎng)小球藻的培養(yǎng)。選擇添加100 mg/L的安菌素在常規(guī)實驗室敞口狀態(tài)下培養(yǎng)5 d,結(jié)果發(fā)現(xiàn)能夠取得與對照組接近的培養(yǎng)結(jié)果,100 mg/L安菌素的添加不僅能夠保證培養(yǎng)過程不染菌而且不影響異養(yǎng)小球藻細胞的正常生長。6.使用液-固繼代保存實驗組在培養(yǎng)257 h獲得了130 g/L的質(zhì)量體積濃度,優(yōu)于其它實驗組,能夠起到提高異養(yǎng)小球藻生長效率的作用,而應(yīng)用液-固保存法、添加安菌素培養(yǎng),在千噸級藻粉生產(chǎn)線上,每年可節(jié)約物料和能源損耗達17.22萬元。
[Abstract]:The growth rate of Chlorella vulgaris is only 8 g / ( L 路 D ) , the growth period is up to 15 days , the growth period is up to 15 days , the growth period is up to 15 days , the growth period is up to 15 days , the growth period is up to 15 days , the growth period is up to 15 days , and the culture period is reduced . The results showed that the concentration of calcium chloride was 1 % , the concentration of sodium alginate was 3 % and the immobilization time was 16 h .

【學(xué)位授予單位】：南陽師范學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：Q949.2

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1 吳慶余;;自養(yǎng)小球藻轉(zhuǎn)化為異養(yǎng)代謝生長后細胞的超微結(jié)構(gòu)與相關(guān)生化組成[J];南京大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);1993年04期

2 詹發(fā)萃;鄧家齊;夏宜，

本文編號：1361722