本文關(guān)鍵詞：利用TALEN技術(shù)建立低免疫原性的人類胚胎干細胞　出處：《湖北工業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：器官或細胞移植是治療臟器器官終末病變的根本方法,然而供體細胞表面的人類白細胞抗原(Human leukocyte antigens,HLAs)與受體間的不兼容性是導(dǎo)致供體器官短缺及器官移植失敗的最主要原因。人類的胚胎干細胞特點是在體外培養(yǎng)條件下具有無限增殖及多向分化潛能,是一種理想的種子細胞,但是若直接將由胚胎干細胞分化的功能性細胞用于異體移植,卻存在引發(fā)機體免疫排斥反應(yīng)的風(fēng)險,免疫排斥極大地阻礙了人類胚胎干細胞在臨床上的應(yīng)用[1]。本研究設(shè)計并構(gòu)建了特異性識別人類胚胎干細胞系X2的HLA-A以及HLA-B5101基因的類轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALENs)[2],從多對打靶TALENs中篩選出效率較高的TALENs在X2細胞系首先進行了HLA-A基因的敲除,建立了HLA-A在基因和蛋白水平均表達缺失的人類胚胎干細胞系X2#1,進而在該X2#1細胞系基礎(chǔ)上,又利用靶向HLA-B5101基因的TALENs進行了第二輪基因敲除,在基因水平敲除了HLA-B5101基因。本研究在人類胚胎干細胞系中特異性敲除了人類白細胞抗原I類分子的HLA-A以及HLA-B5101基因,建立了HLA-A以及HLA-B5101表達缺失的人類胚胎干細胞系,該細胞系有望用作低免疫原性的種子細胞。本研究將有利于推動人類胚胎干細胞的臨床應(yīng)用,促進基于人類胚胎干細胞的移植治療的應(yīng)用發(fā)展。
[Abstract]:Organ or cell transplantation is the basic way to treat organ and organ terminal lesions. However, the incompatibility between Human leukocyte antigens (HLAs) and receptors is the main reason leading to donor organ shortage and failure of organ transplantation. Human embryonic stem cells in culture is characterized with unlimited proliferation and differentiation in vitro under, is a kind of ideal seed cells, but functional cells if directly by differentiation of embryonic stem cells for allogeneic transplantation, has raised the risk of immune rejection, immune rejection greatly hindered human embryonic stem the application of [1] cells in clinic. This study design and construct the specific recognition of human embryonic stem cell line HLA-A X2 and HLA-B5101 gene transcription activator effector nuclease (Transcription activator-like effector nuclease, TALENs [2]), from the targeting of TALENs screened high efficiency of TALENs in X2 cell line was the first knockout of HLA-A. A HLA-A expression in both gene and protein levels of human embryonic stem cell line X2#1 deletion, and then in the X2#1 cell line basis, and by targeting HLA-B5101 gene TALENs in the second round knockout, in the level of gene knock out the HLA-B5101 gene. In this study, we specifically knocked out the HLA-A and HLA-B5101 genes of human leukocyte antigen class I molecules in human embryonic stem cell lines, and established HLA-A and HLA-B5101 deficient human embryonic stem cell lines. This cell line is expected to be used as a low immunogenic seed cell. This study will help promote the clinical application of human embryonic stem cells and promote the application and development of transplantation therapy based on human embryonic stem cells.
【學(xué)位授予單位】：湖北工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R329.2

【參考文獻】

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