慈竹BeSUSs基因表達(dá)模式分析及其遺傳轉(zhuǎn)化毛白楊的研究
本文關(guān)鍵詞:慈竹BeSUSs基因表達(dá)模式分析及其遺傳轉(zhuǎn)化毛白楊的研究 出處:《西南科技大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:本文以慈竹為材料,克隆了BeSUS6和SeSUS7基因;對BeSUSs基因的生物信息學(xué)、表達(dá)模式以及亞細(xì)胞定位進(jìn)行了分析;構(gòu)建了過表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化毛白楊,為SUS大型叢生竹遺傳改良中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。主要的研究結(jié)果如下:1.在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)得到5個(gè)SUS基因全長序列(BeSUS1、BeSUS2、BeSUS3、BeSUS4和BeSUS5)的基礎(chǔ)上,根據(jù)慈竹轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫繼續(xù)克隆得到2個(gè)慈竹新SUS基因,將其分別命名為BeSUS6和BeSUS7,全長分別為2526 bp和2550bp,編碼841和849個(gè)氨基酸。GenBank注冊號(hào)為 KY421768 和 KY421769。2.采用Real-Time PCR技術(shù)對慈竹BeSUS基因的組織表達(dá)模式進(jìn)行了研究,結(jié)果表明,在根、莖、葉和筍都有表達(dá),但表達(dá)情況各不相同。BeSUS3除展開葉以外,在其他所有組織中,其表達(dá)量均是最高的;BeSUS1和BeSUS7在所有組織中表達(dá)量均較低;BeSUS5基因只在筍中表達(dá)較高,在其它組織中表達(dá)很低;BeSUS6基因在展開葉中表達(dá)最高,在其它組織表達(dá)較低。3.慈竹BeSUSs基因ABA、MEJA和干旱脅迫表達(dá)分析表明,BeSUS4、BeSUS5和BeSUS5和BeSUS7基因響應(yīng)ABA脅迫,BeSUS1、BeSUS5和BeSUS7基因響應(yīng)MEJA脅迫;BeSUS6和BeSUS7基因響應(yīng)干旱脅迫。BeSUS7基因同時(shí)對ABA、MEJA和干旱三種脅迫響應(yīng)。4.筍不同部位BeSUSs基因表達(dá)量研究表明,BeSUS3、BeSUS4和BeSUS5對筍的生長發(fā)育有重要作用。5.亞細(xì)胞定位結(jié)果表明,BeSUS2定位在細(xì)胞膜上,BeSUS4則定位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。6.構(gòu)建了pCAMBIA 1303N-BeSUS2/4/5/6/7過表達(dá)載體,并以農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤法轉(zhuǎn)化毛白楊。經(jīng)PCR鑒定,成功獲得了BeSUS2轉(zhuǎn)基因毛白楊11株,BeSUS4轉(zhuǎn)基因毛白楊11株;BeSUS5轉(zhuǎn)基因14株;BeSUS6轉(zhuǎn)基因13株。轉(zhuǎn)基因植株半定量PCR結(jié)果證明,pCAMBIA 1303-BeSUS2/4/5/6已整合到毛白楊基因組中,并成功表達(dá)。8.BeSUS2轉(zhuǎn)基因毛白楊與CK相比,其苗期葉片顏色較淺,光合色素含量下降,植株莖稈直徑減小,株高增高。
【學(xué)位授予單位】:西南科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:Q943.2
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本文編號(hào):1330220
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