本文關鍵詞：慈竹BeSUSs基因表達模式分析及其遺傳轉化毛白楊的研究　出處：《西南科技大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：本文以慈竹為材料,克隆了BeSUS6和SeSUS7基因;對BeSUSs基因的生物信息學、表達模式以及亞細胞定位進行了分析;構建了過表達載體并轉化毛白楊,為SUS大型叢生竹遺傳改良中的應用提供理論依據。主要的研究結果如下:1.在實驗室已經得到5個SUS基因全長序列(BeSUS1、BeSUS2、BeSUS3、BeSUS4和BeSUS5)的基礎上,根據慈竹轉錄組數據庫繼續(xù)克隆得到2個慈竹新SUS基因,將其分別命名為BeSUS6和BeSUS7,全長分別為2526 bp和2550bp,編碼841和849個氨基酸。GenBank注冊號為 KY421768 和 KY421769。2.采用Real-Time PCR技術對慈竹BeSUS基因的組織表達模式進行了研究,結果表明,在根、莖、葉和筍都有表達,但表達情況各不相同。BeSUS3除展開葉以外,在其他所有組織中,其表達量均是最高的;BeSUS1和BeSUS7在所有組織中表達量均較低;BeSUS5基因只在筍中表達較高,在其它組織中表達很低;BeSUS6基因在展開葉中表達最高,在其它組織表達較低。3.慈竹BeSUSs基因ABA、MEJA和干旱脅迫表達分析表明,BeSUS4、BeSUS5和BeSUS5和BeSUS7基因響應ABA脅迫,BeSUS1、BeSUS5和BeSUS7基因響應MEJA脅迫;BeSUS6和BeSUS7基因響應干旱脅迫。BeSUS7基因同時對ABA、MEJA和干旱三種脅迫響應。4.筍不同部位BeSUSs基因表達量研究表明,BeSUS3、BeSUS4和BeSUS5對筍的生長發(fā)育有重要作用。5.亞細胞定位結果表明,BeSUS2定位在細胞膜上,BeSUS4則定位于細胞膜和細胞質。6.構建了pCAMBIA 1303N-BeSUS2/4/5/6/7過表達載體,并以農桿菌介導的葉盤法轉化毛白楊。經PCR鑒定,成功獲得了BeSUS2轉基因毛白楊11株,BeSUS4轉基因毛白楊11株;BeSUS5轉基因14株;BeSUS6轉基因13株。轉基因植株半定量PCR結果證明,pCAMBIA 1303-BeSUS2/4/5/6已整合到毛白楊基因組中,并成功表達。8.BeSUS2轉基因毛白楊與CK相比,其苗期葉片顏色較淺,光合色素含量下降,植株莖稈直徑減小,株高增高。
【學位授予單位】：西南科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：Q943.2

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