本文關(guān)鍵詞：ATP適體探針在微囊內(nèi)部的固定及信號傳導(dǎo)與傳感過程

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【摘要】：細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間存在著非常復(fù)雜的通訊機制,并且引發(fā)相應(yīng)的生命過程與現(xiàn)象。因此建立仿生體模擬細(xì)胞的信號傳導(dǎo)過程將有助于促進對生命現(xiàn)象的認(rèn)識。傳統(tǒng)的仿生信號傳導(dǎo)研究主要在于脂質(zhì)體囊泡表面構(gòu)建基于分子水平上的信號接收、傳遞及轉(zhuǎn)換。本論文從人工仿生細(xì)胞入手,構(gòu)建一個由熱效應(yīng)引發(fā)物質(zhì)傳遞,然后再由物質(zhì)傳遞引發(fā)熒光信號的仿生信號傳導(dǎo)與仿生傳感系統(tǒng)。主要開展了以下三個方面的工作:1.制備了一種磁性和溫敏性的智能納米反應(yīng)器。通過溶劑熱法合成直徑約為250 nm的Fe3O4磁性納米粒子,然后將Au納米粒子、Si02、聚(N-異丙基丙烯酰胺)(PNIPAM)依次涂覆與其表面,利用HF溶液刻蝕除去Si02層,得到Fe3O4/Au/vo:id/PNIPAM蛋殼微球,每個微球都具有可移動的核心(Fe3O4/Au)和溫敏響應(yīng)殼層(PNIPAM)。2.構(gòu)建出一種熒光ATP適體傳感器,建立了高靈敏度與高選擇性的ATP的分析方法。首先以合成的5'-FAM作為能量供體,采用檸檬酸鈉還原氯金酸法制取的Au納米粒子作為能量受體,通過Au-S鍵將單鏈DNA連接到表面。在pH=8.OTris-HCl緩沖液中通過DNA鏈間的雜交,構(gòu)建了熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系(FRET)。測定了 5'-FAM-DNA、探針體系和探針體系+ATP的熒光強度。3.研究了 ATP適體在仿生細(xì)胞內(nèi)外的傳導(dǎo)與傳感過程。首先利用多孔溫敏材料作為人工仿生細(xì)胞的細(xì)胞膜,被金納米粒子包覆的磁性納米微球為仿生細(xì)胞核,熒光ATP適體探針作為敏感單元,三磷酸腺苷(ATP)作為檢測靶目標(biāo)。通過對溫度的調(diào)節(jié)來控制人工細(xì)胞孔道的開和關(guān),從而控制胞外小分子ATP往胞內(nèi)的傳質(zhì)過程,而細(xì)胞核表面的熒光ATP探針則會對進入胞內(nèi)的ATP進行特異性結(jié)合,并釋放出可定量檢測的熒光信號,從而實現(xiàn)熱信號→物質(zhì)傳遞信號→光學(xué)信號的一系列仿生信號傳導(dǎo)與傳感過程。
【學(xué)位授予單位】：天津工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：Q25;TP212.3

【參考文獻】

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本文編號：1300979