發(fā)布時間：2024-05-28 21:55

　　生物法提取草本纖維能有效降低化學(xué)方法對環(huán)境造成的嚴(yán)重污染,降低生產(chǎn)成本,提高產(chǎn)品質(zhì)量,是草本纖維利用的發(fā)展方向。甘露聚糖酶在非纖維素降解中具有重要作用,在造紙、紡織、食品、醫(yī)藥、石油等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。 E.carotovora CXJZ95—198是迄今報道草本纖維提取效率最高的菌種。本文對該菌種的單糖利用、草本纖維提取過程中非纖維素物質(zhì)脫除規(guī)律與方式等進(jìn)行了深入研究;并對其manA基因進(jìn)行了克隆、生物信息學(xué)分析與表達(dá)研究。結(jié)果如下: 該菌株嗜好甘露糖,使精制苧麻纖維中不含甘露糖,甘露聚糖酶在該菌株的草本纖維原料生物提取過程中發(fā)揮了重要的作用。草本纖維原料接種該菌種后,通過“非纖維素物質(zhì)培養(yǎng)菌-菌分泌酶-酶降解非纖維素物質(zhì)”的螺旋式生化反應(yīng),降解非纖維素物質(zhì)。草類原料發(fā)酵液糖類、不溶性有機(jī)物等在發(fā)酵6—8hr達(dá)到最高,發(fā)酵液中大分子和不溶性物質(zhì)占有機(jī)質(zhì)總量的90%以上,發(fā)酵過程可以脫除草本纖維原料重量8%—11%的非纖維素物,能使原料中的非纖維素物質(zhì)發(fā)生塊狀崩潰而脫落。進(jìn)一步證實了劉正初先生提出的“塊狀崩潰”假說。 采用優(yōu)化的Sau3AI部分酶切條件,獲...

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖2.1菌種CXJZ95一198具有甘露聚糖酶活性(圖左)和果膠酶活性(圖右)

嗜好甘露糖、半乳糖。該菌種在果膠、甘露聚糖、木聚糖等篩選培養(yǎng)基上都能出現(xiàn)很明顯的透明圈，證明該菌種具有較強(qiáng)的相關(guān)酶活性(見圖2.1)。譚秀山、李寶坤對該菌株胞外果膠酶、木聚糖酶和甘露聚糖酶活性檢驗與這一結(jié)果一致(譚秀山，2004;李寶坤，2005)。表2.1菌種cxjz95一19....

圖3.1基因組文庫的構(gòu)建Fig.3.1Theeonstruetionofgeno皿ielibraryNote:ThesizesofthereeombinedPlasmidsvariedwiththesizesoftheinsertedfra卿ents.

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士論文第三章Cxzj95一198甘露聚糖酶基因的克隆與表達(dá)研究種引物的解鏈溫度(Tnl)為56一58℃�？紤]到高保真DNA聚合酶刀幾2的DNA聚合速度以及保真性的要求，我們在亞克隆時適當(dāng)增加了代R的延長時間滾3.2)。反應(yīng)體系為4u0l。擴(kuò)增完成以后進(jìn)行瓊脂糖凝膠....

圖3.2表達(dá)載體的構(gòu)建Fig.3.2TheeonstuetionofexPerssingvectosrNote:Thesizesofthereeombinedplasmidsvaried賈iththesizesoftheinsertedfra卿ents.酸脂酶消化3n0如，然后采用瓊脂糖凝膠回收試劑盒回收

otvoarCXJZ95一198基因組NDA不同限制性內(nèi)切酶198genomieDNAdigestedwithdieffrentendoerstri:geno而eDNAof.Eacorotvoar，3ands:geno而eeaorotvoradigestedwithSau3AI分....

圖3.5.EeaorotvoraCXJZ95一198基因組DNA部分酶切凝膠電泳(0.8%agarose)

CXJZ95一198基因組NDA不同限制性內(nèi)切nomieDNAdigestedwithdieffrentendoersteDNAof.Eacorotvoar，3ands:geno而evoradigestedwithSau3AI露聚糖酶基因的核營酸序列長度分子量也在25一55KD之....

本文編號：3983781