發(fā)布時間：2023-11-09 20:28

　　多氯聯(lián)苯(PCB)因其具有出色的穩(wěn)定性,絕緣性以及不易燃性而被廣泛應用于工業(yè)生產當中。多氯聯(lián)苯的積累會影響人類的健康,引起許多疾病,例如：癌癥、神經性疾病、甲狀腺疾病以及免疫功能的缺失。環(huán)境中的多氯聯(lián)苯以及聯(lián)苯除了會對陸生及水生動物造成一系列的危害以外,還會抑制微生物的生長,影響細胞形態(tài),抑制微生物細胞分裂,甚至影響微生物蛋白質的表達。紅球菌Rhodococcus sp. R04是一株聯(lián)苯降解菌株,本文以聯(lián)苯為唯一碳源培養(yǎng)紅球菌R04發(fā)現(xiàn),與對照相比,聯(lián)苯抑制紅球菌R04的生長,并且隨著培養(yǎng)基中聯(lián)苯濃度的增大存在劑量效應關系。當以0.4mM Aroclors1221為碳源時,與對照相比,紅球菌R04的生長明顯受到抑制,并且延長了對數期。使用顯微鏡對紅球菌R04不同時期菌體細胞進行觀察發(fā)現(xiàn),進入對數期后紅球菌R04菌體出現(xiàn)絲狀化。當培養(yǎng)基中聯(lián)苯濃度高達42mM時或者以0.4mM Aroclors1221為碳源時,細胞分裂隔膜的形成受阻,菌體細胞絲狀化后最長可達16μm。通過使用熒光顯微鏡對經細胞膜染料FM1-43染色后紅球菌R04的生長發(fā)育進行觀察發(fā)現(xiàn),當培養(yǎng)基中聯(lián)苯濃度劑量較低時,細胞...

【文章頁數】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 多氯聯(lián)苯的危害
    1.2 多氯聯(lián)苯對微生物轉錄組的影響
    1.3 細菌氣囊蛋白
        1.3.1 氣囊蛋白分類
        1.3.2 氣囊結構蛋白 GvpA和GvpC的結構
        1.3.3 氣囊蛋白的功能
        1.3.4 氣囊蛋白研究進展
    1.4 細胞分裂蛋白FtsZ
    1.5 本課題研究目的和意義
    參考文獻
第二章 聯(lián)苯/PCB對紅球菌RO4細胞形態(tài)及分裂的影響
    2.1 材料
        2.1.1 菌株、培養(yǎng)基和生長條件
        2.1.2 主要的酶和化學試劑
        2.1.3 主要儀器設備
    2.2 方法
        2.2.1 生物量試驗
        2.2.2 紅球菌細胞形態(tài)學顯微鏡觀察
        2.2.3 cDNA的獲得
        2.2.4 實時熒光PCR
        2.2.5 熒光光譜分析
        2.2.6 極化實驗
    2.3 結果與討論
        2.3.1 Bp/PCB對紅球菌R04生長的影響
        2.3.2 聯(lián)苯對紅球菌細胞形態(tài)及分裂的影響
        2.3.3 聯(lián)苯對紅球菌細胞膜著色熒光強度的影響
        2.3.4 紅球菌細胞膜的極化值
    2.4 小結
    參考文獻
第三章 紅球菌R04氣囊蛋白GvpA與GvpJ的定位
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 氣囊結構蛋白gvpA與gvpJ基因的克隆和鑒定
        3.1.3 蛋白的誘導表達
        3.1.4 熒光顯微鏡觀察
    3.2 結果
        3.2.1 氣囊結構蛋白GvpA、GvpJ及綠色熒光蛋白的表達
        3.2.2 氣囊結構蛋白的定位
    3.3 討論
    3.4 結論
    參考文獻
第四章 紅球菌R04氣囊蛋白的表達
    4.1 材料和方法
        4.1.1 菌株和生長條件
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 主要化學試劑和儀器設備
        4.1.4 靜息細胞的制備
        4.1.5 紅球菌R04的培養(yǎng)
        4.1.6 總RNA的分離
        4.1.7 總RNA的純度檢測
        4.1.8 cDNA的獲得
        4.1.9 實時熒光PCR
    4.2 結果與討論
        4.2.1 紅球菌R04總RNA的分離
        4.2.2 RT-PCR結果
    4.3 結論
    參考文獻
第五章 紅球菌氣囊蛋白生理功能的初步探究
    5.1 材料
        5.1.1 菌株與質粒
        5.1.2 主要的酶和化學試劑
        5.1.3 主要培養(yǎng)基
        5.1.4 主要儀器設備
    5.2 方法
        5.2.1 紅球菌的培養(yǎng)
        5.2.2 紅球菌細胞形態(tài)顯微鏡觀察
        5.2.3 氣囊蛋白缺陷基因載體的構建
        5.2.4 紅球菌電轉感受態(tài)的制備
        5.2.5 氣囊蛋白GvpA的基因敲除
    5.3 結果與討論
        5.3.1 紅球菌R04的培養(yǎng)及靜置
        5.3.2 紅球菌細胞形態(tài)
        5.3.3 氣囊蛋白GvpA缺陷型載體的制備
        5.3.4 紅球菌氣囊蛋gvpA基因的同源重組
    5.4 結論
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡況及聯(lián)系方式



本文編號：3861966