近幾十年來，隨著環(huán)境激素類人工合成化學(xué)品和藥品使用的日益增多，對人和動物體的生理活性造成了很大的影響。環(huán)境激素是環(huán)境中的激素類似物，它能通過與激素受體結(jié)合，干擾生物體正常的生理代謝、內(nèi)分泌和生殖機(jī)能，直接影響生物多樣性，危及生物安全，對人類未來構(gòu)成潛在威脅。環(huán)境激素污染問題已成為繼臭氧層、地球氣候變暖之后全球的第三大環(huán)境問題，成為環(huán)境科學(xué)研究領(lǐng)域中的熱門課題。 本課題利用免疫分析方法具有快速靈敏、操作簡便、經(jīng)濟(jì)適用等方面的特點，將其運用于環(huán)境中微量的環(huán)境激素的檢測中，填補(bǔ)了傳統(tǒng)色譜分析中的分析時間長、前處理繁瑣及儀器昂貴的不足。當(dāng)前，免疫分析技術(shù)應(yīng)用于小分子物質(zhì)的檢測日益受到重視，已經(jīng)成為監(jiān)測分析環(huán)境中痕量污染物研究的熱點，若將其與傳統(tǒng)分析技術(shù)聯(lián)用，相互借鑒相互補(bǔ)充，必然會有一個更為廣闊的應(yīng)用前景。 本課題為探討有關(guān)環(huán)境激素的免疫化學(xué)特性，選擇具有代表性的酚類環(huán)境激素中的三種氯苯酚：2,4-二氯苯酚(DCP)、2,4,6-三氯苯酚(TCP)和五氯苯酚(PCP)作為研究對象。將不具免疫原性小分子氯苯酚進(jìn)行修飾改造合成半抗原，并與蛋白質(zhì)偶聯(lián)合成具有免疫原性的人工抗原，免疫動物產(chǎn)生抗體，根據(jù)...

【文章頁數(shù)】：190 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 環(huán)境激素的概述
    1.2 酚類環(huán)境激素的研究現(xiàn)狀
    1.3 酚類環(huán)境激素監(jiān)測概況
    1.4 酚類環(huán)境激素免疫分析技術(shù)
    1.5 本課題的研究對象、內(nèi)容和技術(shù)路線
第二章 三種氯苯酚類環(huán)境激素半抗原和人工抗原的合成
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 儀器設(shè)備
    2.3 實驗部分
        2.3.1 半抗原的合成與鑒定
        2.3.2 人工抗原的合成與鑒定
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 半抗原的鑒定
        2.4.2 人工抗原的鑒定
    2.5 本章小結(jié)
第三章 三種氯苯酚抗體的制備
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 儀器設(shè)備
    3.3 實驗部分
        3.3.1 動物免疫過程
        3.3.2 抗體的純化
        3.3.3 抗體的鑒定
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 2,4-二氯苯酚多克隆抗體的鑒定
        3.4.2 2,4,6-三氯苯酚多克隆抗體的鑒定
        3.4.3 五氯苯酚多克隆抗體的鑒定
    3.5 本章小結(jié)
第四章 2,4-二氯苯酚間接競爭酶聯(lián)免疫分析方法的研究
    4.1 引言
    4.2 材料與儀器
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 儀器設(shè)備
    4.3 實驗部分
        4.3.1 抗原抗體工作濃度的選擇
        4.3.2 ELISA法條件優(yōu)化
        4.3.3 間接競爭ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        4.3.4 抗原抗體的親合性考察
        4.3.5 抗體的特異性考察
        4.3.6 靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度實驗
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        4.4.2 ELISA條件優(yōu)化
        4.4.3 抗原抗體的親合性
        4.4.4 抗體的特異性考察
        4.4.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        4.4.6 精密度實驗
        4.4.7 樣品測定
    4.5 本章小結(jié)
第五章 2,4-二氯苯酚間接競爭熒光免疫分析方法的研究
    5.1 引言
    5.2 材料與儀器
        5.2.1 實驗試劑
        5.2.2 儀器設(shè)備
    5.3 實驗部分
        5.3.1 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        5.3.2 間接競爭FIA條件的優(yōu)化
        5.3.3 間接競爭FIA標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        5.3.4 抗體的特異性考察
        5.3.5 精密度實驗
        5.3.6 樣品測定
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        5.4.2 FIA條件的優(yōu)化
        5.4.3 抗體的特異性考察
        5.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        5.4.5 精密度實驗
        5.4.6 樣品測定
    5.5 本章小結(jié)
第六章 2,4-二氯苯酚直接競爭熒光免疫分析方法的研究
    6.1 引言
    6.2 材料與儀器
        6.2.1 實驗試劑
        6.2.2 儀器設(shè)備
    6.3 實驗部分
        6.3.1 FITC熒光標(biāo)記抗體的制備
        6.3.2 FITC-DCP-IgG標(biāo)記抗體效價的測定
        6.3.3 FITC-DCP-IgG標(biāo)記抗體穩(wěn)定性試驗
        6.3.4 直接競爭FIA標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        6.3.5 抗體的特異性考察
        6.3.6 樣品測定
    6.4 結(jié)果與討論
        6.4.1 FITC-DCP-IgG抗體結(jié)合比率的測定
        6.4.2 FITC-DCP-IgG抗體的效價鑒定
        6.4.3 FITC標(biāo)記抗體穩(wěn)定性試驗
        6.4.4 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        6.4.5 FIA條件的優(yōu)化
        6.4.6 抗體的特異性考察
        6.4.7 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        6.4.8 樣品測定
    6.5 本章小結(jié)
第七章 2,4,6-三氯苯酚間接競爭熒光免疫分析方法的研究
    7.1 引言
    7.2 材料與儀器
        7.2.1 實驗材料
        7.2.2 儀器設(shè)備
    7.3 實驗部分
        7.3.1 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        7.3.2 間接競爭FIA條件的優(yōu)化
        7.3.3 間接競爭FIA標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        7.3.4 抗體特異性的考察
        7.3.5 靈敏度和精密度實驗
        7.3.6 樣品測定
    7.4 結(jié)果與討論
        7.4.1 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        7.4.2 FIA條件的優(yōu)化
        7.4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        7.4.4 抗體的特異性考察
        7.4.5 精密度實驗
        7.4.6 樣品測定
    7.5 本章小結(jié)
第八章 2,4,6-三氯苯酚直接競爭熒光免疫分析方法的研究
    8.1 引言
    8.2 材料與儀器
        8.2.1 實驗材料
        8.2.2 儀器設(shè)備
    8.3 實驗部分
        8.3.1 攪拌法制備FITC熒光標(biāo)記抗體
        8.3.2 FITC-TCP-IgG標(biāo)記抗體效價的測定
        8.3.3 直接競爭FIA標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        8.3.4 抗體特異性的考察
        8.3.5 樣品測定
    8.4 結(jié)果與討論
        8.4.1 FITC-TCP-IgG抗體結(jié)合比率的測定
        8.4.2 FITC-TCP-IgG抗體的效價鑒定
        8.4.3 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        8.4.4 FIA條件的優(yōu)化
        8.4.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        8.4.6 抗體的特異性考察
        8.4.7 樣品測定
    8.5 本章小結(jié)
第九章 五氯苯酚間接競爭熒光免疫分析方法的研究
    9.1 引言
    9.2 材料與儀器
        9.2.1 實驗材料
        9.2.2 儀器設(shè)備
    9.3 實驗部分
        9.3.1 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        9.3.2 間接競爭FIA條件的優(yōu)化
        9.3.3 間接競爭FIA標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        9.3.4 抗體特異性的考察
        9.3.5 靈敏度和精密度實驗
        9.3.6 試劑盒的初步研制
        9.3.7 樣品測定
    9.4 結(jié)果與討論
        9.4.1 抗原與抗體最佳工作濃度的選擇
        9.4.2 FIA條件的優(yōu)化
        9.4.3 抗體的特異性考察
        9.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        9.4.5 精密度實驗
        9.4.6 試劑盒的初步研究
        9.4.7 樣品測定
    9.5 本章小結(jié)
第十章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀博士期間發(fā)表和待發(fā)表學(xué)術(shù)論文及申請專利
致謝



本文編號：3857300