【摘要】：1 有機(jī)磷農(nóng)藥降解菌的分離、鑒定 從福建三明農(nóng)藥廠附近的土壤分離、篩選獲得一株能夠高效降解甲基1605、辛硫磷、三唑磷等有機(jī)磷農(nóng)藥的菌株JS018，該菌在LB平板培養(yǎng)基上形成的菌落為粉紅色，圓形，有光澤；經(jīng)電鏡觀察，為小球狀菌，，直徑0.5μm～0.75μm；革蘭氏染色為陰性；能夠在30℃～38℃溫度范圍內(nèi)和pH7.0～9.0范圍內(nèi)很好的生長，最適生長溫度為32℃，最適pH7.5～8.0；在含有6％NaCl以上的培養(yǎng)基中，不能生長。抗生素敏感性實(shí)驗(yàn)表明：JS018菌對(duì)安比西林、青霉素、林肯霉素有抗性；對(duì)卡那霉素、四環(huán)素、慶大霉素等敏感。碳源發(fā)酵實(shí)驗(yàn)表明：該菌株能發(fā)酵葡萄糖，發(fā)酵海藻糖、松三糖、乙醇；不能發(fā)酵阿拉伯糖、蔗糖、甘露糖、木糖、果糖、半乳糖、麥芽糖、乳糖等；不能利用棕檬酸鹽，不能液化明膠，不產(chǎn)生硫化氫，能還原硝酸鹽，不產(chǎn)生吲哚，接觸酶陽性，脲酶陽性。根據(jù)其形態(tài)特征，生理生化特性、16S rDNA序列分析，初步鑒定JS018為Roseomonas(玟瑰單胞菌屬)，Roseomonas共有6個(gè)基因型種，其中的三個(gè)已正式命名，另外三個(gè)還沒有正式命名。從16S rDNA序列同源性分析，JS018與Roseomonas genomospecfes 4同源性最高，而從其它生理生化特征分析，尤其是對(duì)七葉苷水解、甘露糖氧化、葡萄糖發(fā)酵等方面與Roseomonas屬的6個(gè)基因型種都有差別，JS018菌很可能是一種新種，國內(nèi)還沒有關(guān)于Roseomonas屬的任何菌株的報(bào)道，且國內(nèi)外尚未報(bào)道過該屬內(nèi)有降解農(nóng)藥的菌株。 2 JS018菌對(duì)農(nóng)藥的降解性能及產(chǎn)酶條件的優(yōu)化 JS018對(duì)甲基1605、辛硫磷、三唑磷、敵敵畏等有機(jī)磷農(nóng)藥的降解率很高，在LB培養(yǎng)基中發(fā)酵36小時(shí)，降解率分別為96％、99％、98.9％、69.0％；對(duì)喹硫磷、馬拉辛硫磷的降解率較高，分別為49.3％、49.4％；而對(duì)毒死婢幾乎不降解，對(duì)溴氰菊酯和甲氰菊酯的降解率也非常低，幾乎也不降解。 JS018產(chǎn)酶的最適培養(yǎng)基配方為：0.07％KH_2PO_4，0.03％K_2HPO_4，0.02％MgSO_4，0.1％葡萄糖，0.1％酵母粉，最適溫度為37℃，pH7.0。 3 JS018菌有機(jī)磷農(nóng)藥降解酶的純化及同源性分析 JS018菌有機(jī)磷農(nóng)藥降解酶經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀，Sephadex G-100凝膠過濾，
【圖文】：

從平板中挑取周圍呈黃色的菌落，經(jīng)過篩選獲得一株降解能力較強(qiáng)的菌株SJI，將sJl菌、JZS、.Ec口，1’劃線于平板培養(yǎng)基上(農(nóng)藥濃度為300mg.L一‘)結(jié)果如圖2一1(圖2一1中編號(hào)Jsl后改為JSO18)，而JsZ、.Ecoli雖可在農(nóng)藥上生長，但經(jīng)測定幾乎不能降解農(nóng)藥.2.2降解產(chǎn)物的鑒定sJosl降解甲基1605后的產(chǎn)物和純的對(duì)硝基苯酚液在350一800mn波長掃描的結(jié)果見圖2一2.對(duì)比兩圖可以看出:它們的波形和峰值所在的波長基本一致，因此可以初步判定降解酶作用甲墓1605后的產(chǎn)物為對(duì)硝基苯酚，有效波長為405mn，這與相關(guān)參考文獻(xiàn)報(bào)道的一致(傅國平等，200;4楚曉娜等，2003.)圖2一1JS018菌在含有甲基1605的培養(yǎng)基上生長Fig.2一1JS018growingonmediaeon而ningParathio-nmehytl注:上排為Kc

從平板中挑取周圍呈黃色的菌落，經(jīng)過篩選獲得一株降解能力較強(qiáng)的菌株SJI，將sJl菌、JZS、.Ec口，1’劃線于平板培養(yǎng)基上(農(nóng)藥濃度為300mg.L一‘)結(jié)果如圖2一1(圖2一1中編號(hào)Jsl后改為JSO18)，而JsZ、.Ecoli雖可在農(nóng)藥上生長，但經(jīng)測定幾乎不能降解農(nóng)藥.2.2降解產(chǎn)物的鑒定sJosl降解甲基1605后的產(chǎn)物和純的對(duì)硝基苯酚液在350一800mn波長掃描的結(jié)果見圖2一2.對(duì)比兩圖可以看出:它們的波形和峰值所在的波長基本一致，因此可以初步判定降解酶作用甲墓1605后的產(chǎn)物為對(duì)硝基苯酚，有效波長為405mn，這與相關(guān)參考文獻(xiàn)報(bào)道的一致(傅國平等，200;4楚曉娜等，2003.)圖2一1JS018菌在含有甲基1605的培養(yǎng)基上生長Fig.2一1JS018growingonmediaeon而ningParathio-nmehytl注:上排為Kc
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：X172

【引證文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2705526