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有機磷農藥降解菌的篩選及其降解酶特性

發(fā)布時間:2020-06-10 00:51
【摘要】:1 有機磷農藥降解菌的分離、鑒定 從福建三明農藥廠附近的土壤分離、篩選獲得一株能夠高效降解甲基1605、辛硫磷、三唑磷等有機磷農藥的菌株JS018,該菌在LB平板培養(yǎng)基上形成的菌落為粉紅色,圓形,有光澤;經電鏡觀察,為小球狀菌,,直徑0.5μm~0.75μm;革蘭氏染色為陰性;能夠在30℃~38℃溫度范圍內和pH7.0~9.0范圍內很好的生長,最適生長溫度為32℃,最適pH7.5~8.0;在含有6%NaCl以上的培養(yǎng)基中,不能生長。抗生素敏感性實驗表明:JS018菌對安比西林、青霉素、林肯霉素有抗性;對卡那霉素、四環(huán)素、慶大霉素等敏感。碳源發(fā)酵實驗表明:該菌株能發(fā)酵葡萄糖,發(fā)酵海藻糖、松三糖、乙醇;不能發(fā)酵阿拉伯糖、蔗糖、甘露糖、木糖、果糖、半乳糖、麥芽糖、乳糖等;不能利用棕檬酸鹽,不能液化明膠,不產生硫化氫,能還原硝酸鹽,不產生吲哚,接觸酶陽性,脲酶陽性。根據其形態(tài)特征,生理生化特性、16S rDNA序列分析,初步鑒定JS018為Roseomonas(玟瑰單胞菌屬),Roseomonas共有6個基因型種,其中的三個已正式命名,另外三個還沒有正式命名。從16S rDNA序列同源性分析,JS018與Roseomonas genomospecfes 4同源性最高,而從其它生理生化特征分析,尤其是對七葉苷水解、甘露糖氧化、葡萄糖發(fā)酵等方面與Roseomonas屬的6個基因型種都有差別,JS018菌很可能是一種新種,國內還沒有關于Roseomonas屬的任何菌株的報道,且國內外尚未報道過該屬內有降解農藥的菌株。 2 JS018菌對農藥的降解性能及產酶條件的優(yōu)化 JS018對甲基1605、辛硫磷、三唑磷、敵敵畏等有機磷農藥的降解率很高,在LB培養(yǎng)基中發(fā)酵36小時,降解率分別為96%、99%、98.9%、69.0%;對喹硫磷、馬拉辛硫磷的降解率較高,分別為49.3%、49.4%;而對毒死婢幾乎不降解,對溴氰菊酯和甲氰菊酯的降解率也非常低,幾乎也不降解。 JS018產酶的最適培養(yǎng)基配方為:0.07%KH_2PO_4,0.03%K_2HPO_4,0.02%MgSO_4,0.1%葡萄糖,0.1%酵母粉,最適溫度為37℃,pH7.0。 3 JS018菌有機磷農藥降解酶的純化及同源性分析 JS018菌有機磷農藥降解酶經硫酸銨分級沉淀,Sephadex G-100凝膠過濾,
【圖文】:

波形,甲基1605,對硝基苯酚


從平板中挑取周圍呈黃色的菌落,經過篩選獲得一株降解能力較強的菌株SJI,將sJl菌、JZS、.Ec口,1’劃線于平板培養(yǎng)基上(農藥濃度為300mg.L一‘)結果如圖2一1(圖2一1中編號Jsl后改為JSO18),而JsZ、.Ecoli雖可在農藥上生長,但經測定幾乎不能降解農藥.2.2降解產物的鑒定sJosl降解甲基1605后的產物和純的對硝基苯酚液在350一800mn波長掃描的結果見圖2一2.對比兩圖可以看出:它們的波形和峰值所在的波長基本一致,因此可以初步判定降解酶作用甲墓1605后的產物為對硝基苯酚,有效波長為405mn,這與相關參考文獻報道的一致(傅國平等,200;4楚曉娜等,2003.)圖2一1JS018菌在含有甲基1605的培養(yǎng)基上生長Fig.2一1JS018growingonmediaeon而ningParathio-nmehytl注:上排為Kc

波形,長掃描,降解產物,全波


從平板中挑取周圍呈黃色的菌落,經過篩選獲得一株降解能力較強的菌株SJI,將sJl菌、JZS、.Ec口,1’劃線于平板培養(yǎng)基上(農藥濃度為300mg.L一‘)結果如圖2一1(圖2一1中編號Jsl后改為JSO18),而JsZ、.Ecoli雖可在農藥上生長,但經測定幾乎不能降解農藥.2.2降解產物的鑒定sJosl降解甲基1605后的產物和純的對硝基苯酚液在350一800mn波長掃描的結果見圖2一2.對比兩圖可以看出:它們的波形和峰值所在的波長基本一致,因此可以初步判定降解酶作用甲墓1605后的產物為對硝基苯酚,有效波長為405mn,這與相關參考文獻報道的一致(傅國平等,200;4楚曉娜等,2003.)圖2一1JS018菌在含有甲基1605的培養(yǎng)基上生長Fig.2一1JS018growingonmediaeon而ningParathio-nmehytl注:上排為Kc
【學位授予單位】:福建農林大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:X172

【引證文獻】

相關期刊論文 前2條

1 谷月;姜華;;農藥污染土壤的微生物降解[J];遼寧農業(yè)科學;2013年04期

2 王繼雯;甄靜;劉瑩瑩;李冠杰;慕琦;賈彬;謝寶恩;周伏忠;陳國參;;一株有機磷農藥高效降解菌的篩選及酶學性質研究[J];中國農學通報;2013年21期

相關博士學位論文 前1條

1 高春明;DDT降解質粒pDOD及其對土壤中殘留DDTs降解的生物強化[D];浙江大學;2011年



本文編號:2705526

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