【摘要】：大氣顆粒物是引起霧霾以及危害人體健康的主要因素。其中大氣亞微米顆粒物(Particulate Matter 1.0,PM_(1.0))在PM_(2.5)中所占的比例約為60%~70%,與人群健康密切相關(guān)。選取人支氣管上皮細胞(BEAS-2b細胞)、ICR小鼠為暴露對象,進行體外、體內(nèi)大氣亞微米顆粒物及其不同組分的氧化損傷效應及炎癥作用研究。將采集的PM_(1.0)制成全顆粒物組分、溶于血清組分、不溶于血清組分以及溶于PBS組分的試樣,對BEAS-2b細胞進行暴露,檢測細胞活性、胞內(nèi)ROS水平、SOD活力以及GSH/GSSG,研究不同組分試樣對細胞損傷作用。結(jié)果表明,隨著PM_(1.0)的濃度增大,各組分試樣均使受試細胞活性明顯降低,并呈現(xiàn)顯著的劑量-效應關(guān)系。BEAS-2b細胞活性的抑制作用依次為:全顆粒物組分溶于血清組分不溶于血清組分溶于PBS組分。BEAS-2b細胞進行6h暴露后,細胞ROS相對產(chǎn)生量顯著增加。其中PM_(1.0)中不溶于血清組分的試樣對細胞ROS產(chǎn)生量的影響明顯弱于其他三種試樣。SOD相對活力隨著暴露濃度的增大而減小,全顆粒物組分試樣對SOD活力的影響最大,下降趨勢最為明顯,其次為不溶于血清組分試樣、溶于血清組分試樣以及溶于PBS組分試樣。隨著暴露濃度的升高,GSH/GSSG比值呈現(xiàn)明顯的下降趨勢,其中全顆粒物組分的試樣導致GSH/GSSG比值降低程度最顯著,溶于血清組分次之。進一步檢測不同暴露時間胞內(nèi)ROS產(chǎn)生量發(fā)現(xiàn),隨著試樣暴毒過程的持續(xù)(3-15h),細胞內(nèi)ROS水平出現(xiàn)了先升后降的趨勢。選用ICR小鼠進行大氣亞微米顆粒物暴露,研究PM_(1.0)制成的氣溶膠對小鼠亞慢性毒性,發(fā)現(xiàn)各組小鼠皮膚和皮毛未見異常,活動輕微減弱,未出現(xiàn)小鼠死亡。解剖觀察小鼠肺部病理切片發(fā)現(xiàn),暴露組出現(xiàn)大量炎性細胞浸潤,上皮細胞出現(xiàn)脫落,并疑似出現(xiàn)顆粒物,且暴露濃度越高組織損傷越嚴重。試驗組小鼠血清以及肺組織內(nèi)GSH/GSSG比值均低于對照組(P0.05),并隨著暴露濃度增大,GSH/GSSG顯著減小;高濃度組小鼠血清GSH/GSSG降低最為明顯(P0.05)。試驗組小鼠肺組織勻漿GSH/GSSG比值均低于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),與血清中GSH/GSSG的變化趨勢一致。另外小鼠肺組織ROS熒光強度隨暴露濃度的增加而增大。隨著暴露濃度的增大,血清以及肺組織中炎性因子TNF-α、IL-6以及IL-17均呈現(xiàn)上升趨勢。IL-6以及IL-17含量明顯高于對照組,呈現(xiàn)劑量-效應關(guān)系,與對照組相比均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。炎性抑制因子IL-10隨著暴露濃度的增加,其含量逐漸下降,與對照組相比,存在顯著差異,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。肺組織中炎性因子水平明顯高于血清,同樣抗炎因子IL-10水平也高于血清。
【圖文】：

血球計數(shù)板Figure2-1.Bloodcountingplate

PM1.0對BEAS-2b細胞的細胞活性的影響
【學位授予單位】：浙江工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：X503.22;X513

【參考文獻】

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本文編號：2685727