【摘要】：隨著我國(guó)工業(yè)化的迅猛發(fā)展,自然環(huán)境中的重金屬污染問題日益嚴(yán)重,尤其是水體受污染情況最為突出。在之前的報(bào)道中,研究者認(rèn)為魚類可以作為反映重金屬的重要指標(biāo)之一,一旦水中的重金屬污染升高,水體中的魚類就將會(huì)出現(xiàn)毒理學(xué)反應(yīng),例如行為失常、生理調(diào)節(jié)紊亂以及細(xì)胞或者組織出現(xiàn)毒理學(xué)變化等。同時(shí),也能對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)和生殖活動(dòng)造成影響。研究環(huán)境污染物對(duì)魚類生理及生殖性能的影響,不僅可以闡明污染物毒性的發(fā)生機(jī)制,而且可為判斷水環(huán)境污染物毒性效應(yīng)提供依據(jù)。本文以吉富羅非魚為研究對(duì)象,通過水相和食物相的鎘暴露,研究重金屬鎘對(duì)羅非魚主要生長(zhǎng)指標(biāo)的影響;分析羅非魚體內(nèi)的鎘富集,探討鎘在不同組織中的累積效應(yīng);研究鎘對(duì)不同組織抗氧化性系統(tǒng)(包括CAT、GSH、GSSG、MDA和SOD)的影響,并對(duì)這些因子的差異進(jìn)行分析;采用組織切片的手段,分析了鎘對(duì)肝臟、腎臟、腸、鰓以及生殖腺組織結(jié)構(gòu)的影響;分析了血清中的性激素(雌二醇和睪丸酮)和生殖腺中的性腺發(fā)育相關(guān)基因(ER、PR、GR、AR、VTG和3β-HSD1)在鎘暴露后的表達(dá)變化;通過配組繁殖獲得子一代,探討暴露后對(duì)其繁育性能及代際轉(zhuǎn)移的影響。通過本研究,不僅可闡明鎘在羅非魚中的毒理學(xué)作用和分子機(jī)制,還可為生態(tài)治理和魚類繁殖生理研究提供理論基礎(chǔ)。1.鎘對(duì)吉富羅非魚半致死濃度及生長(zhǎng)影響研究設(shè)置8個(gè)鎘濃度梯度,記錄實(shí)驗(yàn)魚的死亡情況,利用log(agonist)vs.normalized response--Variable slope分析方法進(jìn)行回歸分析,得出羅非魚(2月齡)的96小時(shí)半致死濃度為17.42 mg/L,為后續(xù)研究提供了參考;另外,通過設(shè)置對(duì)照組、三個(gè)濃度梯度水相添加組(50μg/L、100μg/L和200μg/L)以及三個(gè)濃度梯度食物相添加組(50 mg/kg、100mg/kg和200mg/kg),養(yǎng)殖30天和60天后分別取材,計(jì)算死亡率并測(cè)定各處理組羅非魚生長(zhǎng)等數(shù)據(jù)。50μg/L、100μg/L和2000μg/L水相添加組的水體中實(shí)測(cè)鎘含量分別為33.02±0.12μg/L、70.32±1.0μg/L和143.78±2.58μg/L。50 mg/kg、100 mg/kg和200mg/kg食物相添加組的飼料中實(shí)測(cè)鍋含量分別為39.88±1.52mg/kg、78.63±2.43mg/kg和161.15±3.54mg/kg。在所有組別中,死亡率未達(dá)到顯著性差異(P0.05),各生長(zhǎng)指標(biāo)也未出現(xiàn)明顯差異。僅在39.88 mg/kg組暴露60天后肝體比有明顯上升,其比值為1.86±0.47,差異極顯著。2.鎘在吉富羅非魚的組織中積累與分布研究取經(jīng)水相和食物相暴露30天和60天的各組羅非魚的肝臟、腎臟、腸、鰓和性腺,分別進(jìn)行鎘含量測(cè)定;采用不同暴露組的羅非魚配組繁殖后代,并檢測(cè)鎘在羅非魚魚卵和子代中的積累。結(jié)果顯示,鎘可以累積到所有被研究的組織中。在水相處理后鎘富集能力為:肝臟腎臟腸性腺鰓,而在食物相處理后鎘富集的能力為:腎臟腸肝臟性腺鰓。另外,鎘暴露可引起親本卵子中的鎘含量明顯增高,然而,在子代中,各組之間鎘含量并沒有顯著性差異。3.鎘對(duì)吉富羅非魚抗氧化性系統(tǒng)的影響采用酶聯(lián)免疫的方法測(cè)定CAT、GSH、GSSG、MDA和SOD。結(jié)果顯示,鎘可下調(diào)肝臟GSH的表達(dá)和SOD的酶活,對(duì)肝臟的抗氧化系統(tǒng)有明顯的抑制作用。同時(shí),鎘暴露可導(dǎo)致腎臟中MDA的含量和CAT的活性增高,而SOD明顯下降。但鍋暴露對(duì)腸和鰓的抗氧化系統(tǒng)影響不大。4.鍋對(duì)吉富羅非魚組織結(jié)構(gòu)的影響取經(jīng)水相和食物相暴露30天和60天的各組羅非魚肝臟、腎臟、腸、鰓和性腺,進(jìn)行組織學(xué)切片觀察。在鎘暴露后肝臟細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性、部分肝細(xì)胞核濃縮變小,甚至溶解,同時(shí)出現(xiàn)了肝竇增寬、結(jié)構(gòu)紊亂等現(xiàn)象;鎘暴露的羅非魚中,腎小管排列結(jié)構(gòu)紊亂加重,腎小管出現(xiàn)上皮細(xì)胞變性、壞死情況;在鍋暴露后,腸絨毛無序,杯狀細(xì)胞數(shù)目異常增多和水腫等現(xiàn)象;在鰓中鎘能夠引起鰓絲部分?jǐn)嗔�、鰓小片出現(xiàn)病變;在鎘暴露后,卵巢中的變化較小。卵巢的初級(jí)卵泡和次級(jí)卵泡數(shù)量增加;而在雄性中精母及精子細(xì)胞的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于對(duì)照組。5.鎘對(duì)吉富羅非魚性激素含量、相關(guān)基因表達(dá)及繁殖力的影響取經(jīng)水相和食物相暴露30天和60天的各組羅非魚的血液和性腺組織,測(cè)定血清中雌性雌二醇和雄性睪丸酮的含量,并利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù),檢測(cè)ER、PR、GR、AR、VTG和3β-HSD1在性腺中的表達(dá)變化。鎘能夠提升血清中雌二醇的含量,但對(duì)睪丸酮含量影響不明顯。在基因水平,鎘能夠提高卵巢中的ER表達(dá),但鎘暴露可以抑制VTG的生成。在精巢中,鎘通過提高GR的表達(dá)抑制精細(xì)胞和精子的發(fā)育。另外,采用經(jīng)過60天不同鎘暴露組的羅非魚配組繁殖后代,研究鎘對(duì)羅非魚相對(duì)產(chǎn)卵量、出苗數(shù)、孵化率以及崎形率的影響。結(jié)果顯示,鎘暴露的親本可導(dǎo)致羅非魚孵化率降低和畸形率的升高。
【圖文】：

腸絨毛排列奈亂，水腫加重的情況，出現(xiàn)空泡變性。水相暴露的雄性羅非魚中，，隨劑逡逑量的增加，出現(xiàn)腸絨毛排列奈亂，水腫的情況，出現(xiàn)空泡變性；食物相暴露組中，隨逡逑劑量的增加，出現(xiàn)腸絨毛排列奈亂，水腫加重的情況，出現(xiàn)輕微的空泡變性（圖５－６）。逡逑５１逡逑

食物相為２７．３０＋５．３８?jìng)�(gè)／視野，７８．６３邋ｍｇ／ｋｇ食物相處理組為２９．０８邋＋邋７．％個(gè)／視野，１６１．１５逡逑ｍｇ／ｋｇ食物相處理組為３５．７４邋＋邋７．５４個(gè)／視野。隨著濃度的X椄擼嗪褪澄鏘啵叮疤旄１╁義下逗螅倉械木趕赴肯陸擔(dān)揖酉赴壤災(zāi)跎伲ㄍ跡擔(dān)保埃�。辶x希擔(dān)靛義

本文編號(hào)：2682422