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亞抑菌濃度抗生素對藍(lán)細(xì)菌聚集及生物膜形成的影響機制研究

發(fā)布時間:2019-08-05 14:52
【摘要】:抗生素的廣泛、大量使用,導(dǎo)致其進入生態(tài)環(huán)境。近年來,由于抗生素的生物學(xué)效應(yīng),對其研究已不止局限于作為一種污染物?股厝绾斡绊懳⑸锏纳頇C能,以及微生物對抗生素的耐受機制受到了廣泛關(guān)注。據(jù)報道,在環(huán)境中檢出的抗生素多為亞抑菌濃度。與高濃度抗生素的效能相比,亞抑菌濃度抗生素對微生物生理活動的影響不僅為抑菌性,還將作為信號分子改變微生物的群居性、運動性、抗壓性和生物膜形成,并促進微生物之間的協(xié)作或競爭關(guān)系。目前,國內(nèi)外研究主要集中在致病菌及模式微生物與抗生素的相互作用,而很少有研究考察環(huán)境中亞抑菌濃度抗生素對具有生態(tài)效應(yīng)的微生物的影響。藍(lán)細(xì)菌作為一種典型的,具有重要生態(tài)環(huán)境效應(yīng)的功能微生物,既是全球碳循環(huán)的主要承擔(dān)者;同時可能在富營養(yǎng)化水體中過度增殖導(dǎo)致水華或赤潮。鑒于藍(lán)細(xì)菌在生態(tài)環(huán)境中的重要作用,結(jié)合亞抑菌濃度抗生素在自然環(huán)境中廣泛存在的現(xiàn)狀,亞抑菌濃度抗生素與藍(lán)細(xì)菌之間的相互作用機制具有重要的研究意義。本研究主要內(nèi)容與結(jié)果如下:(1)本章研究選用兩種典型的抗生素(卡那霉素和妥布霉素)作為研究對象,考察了對細(xì)長聚球藻聚集的影響。結(jié)果表明,當(dāng)培養(yǎng)體系中存在亞抑菌濃度抗生素時,細(xì)長聚球藻聚集率有所提高。當(dāng)抗生素濃度為0.1μg/ml時,聚集率明顯提高30%~40%。相似的現(xiàn)象在短時接觸(24 h)實驗中也有存在。通過分析表面性質(zhì)發(fā)現(xiàn),在亞抑菌抗生素存在情況下,細(xì)長聚球藻的表面電荷、親疏水性及形態(tài)均發(fā)生改變,而這些變化導(dǎo)致聚集的增加。研究進一步分析了胞外聚合物中胞外蛋白和多糖的相對含量,發(fā)現(xiàn)抗生素的存在改變胞外蛋白的分泌量,導(dǎo)致細(xì)長聚球藻表面性質(zhì)的變化,進而影響聚集。為了進一步模擬在自然水體中亞抑菌濃度抗生素對細(xì)長聚球藻的作用,本研究考察了pH和離子強度的影響。結(jié)果表明,在較低pH和離子強度下,細(xì)長聚球藻的聚集能力更易受抗生素的影響。(2)銅綠微囊藻過量生長是導(dǎo)致水華的重要原因。因此,本研究進一步考察了亞抑菌濃度抗生素對銅綠微囊藻聚集的影響。結(jié)果表明,在0.02μg/ml卡那霉素或0.01 μg/ml妥布霉素濃度下,銅綠微囊藻聚集率分別增加約14.9%和25.4%。經(jīng)表面性質(zhì)分析發(fā)現(xiàn),表面電荷和親疏水性只發(fā)生了微弱的變化。在短時接觸實驗中,銅綠微囊藻與抗生素作用后聚集率和表面性質(zhì)均未發(fā)生明顯變化。這一方面說明了表面性質(zhì)在聚集中的重要作用;另一方面表明,在亞抑菌濃度抗生素存在條件下,不同藍(lán)細(xì)菌菌株有著不同的生理變化。(3)微生物的聚集是生物膜形成的第一步,結(jié)合第二章研究結(jié)果,本章研究以細(xì)長聚球藻為研究對象,考察了亞抑菌濃度卡那霉素對其生物膜形成的影響,并通過轉(zhuǎn)錄分析考察其生態(tài)效應(yīng)。結(jié)果表明,O.05~0.1 μg/mL卡那霉素能夠促進藍(lán)細(xì)菌生物膜的形成。通過對細(xì)長聚球藻的表面性質(zhì)及形態(tài)分析發(fā)現(xiàn),胞外蛋白對于調(diào)節(jié)生物膜形成起重要作用,且藍(lán)細(xì)菌形態(tài)的變化也對生物膜形成產(chǎn)生影響。同時,通過對抗生素存在條件下藍(lán)細(xì)菌的1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶及碳酸酐酶的轉(zhuǎn)錄分析,發(fā)現(xiàn)兩種酶的表達(dá)均發(fā)生了變化。綜合細(xì)長聚球藻生物膜及酶表達(dá)量的變化,我們推斷在亞抑菌抗生素存在情況下,由藍(lán)細(xì)菌介導(dǎo)的生物鈣化作用可能提高,而鈣化過程的提高可能間接引起大氣中二氧化碳濃度的提高,產(chǎn)生較大的生態(tài)效應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:X172;X52

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本文編號:2523182

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