本文選題：發(fā)光細(xì)菌 + 諸氏鯔蝦虎魚��； 參考：《青島科技大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：海洋污染生物毒性的檢測(cè)是海洋環(huán)境保護(hù)的重要內(nèi)容,發(fā)光細(xì)菌法(luminescentbacteriatest,簡(jiǎn)稱LBT)是一種綜合檢測(cè)判定毒性物質(zhì)濃度與生物效應(yīng)關(guān)系的生物毒性檢測(cè)技術(shù),能夠全面地反映各種毒性物質(zhì)對(duì)環(huán)境的綜合毒性效應(yīng)。本文針對(duì)LBT在海洋環(huán)境中應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)化問(wèn)題,以經(jīng)遺傳改造的不動(dòng)桿菌Acinetobactersp.Tox2和Acinetobactersp.RecA作為研究對(duì)象,開展了以下主要研究?jī)?nèi)容:(1)以Tox2菌株為受試生物對(duì)4種重金屬和2種石油烴的急性毒性進(jìn)行了檢測(cè),并通過(guò)傳統(tǒng)方法諸氏鯔蝦虎魚的暴露試驗(yàn)對(duì)其結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證。Hg~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)、Cd~(2+)和原油水容納組分對(duì)Tox2的EC50分別為:0.12mg/L、71.81mg/L、0.68mg/L、43.67mg/L、2.01mg/L,對(duì)蝦虎魚的LC50分別為:0.14mg/L、107.73mg/L、3.23mg/L、39.83mg/L、2.69mg/L,柴油水容納組分對(duì)蝦虎魚的LC50為4.96mg/L。結(jié)果顯示:兩者檢測(cè)結(jié)果匹配度較好,但在急性毒性響應(yīng)時(shí)間上發(fā)光細(xì)菌法(30min)要優(yōu)于傳統(tǒng)的魚類暴露實(shí)驗(yàn)(96h)。(2)通過(guò)正交試驗(yàn),結(jié)合石油烴含量分析得到了檢測(cè)沉積物生物毒性的最優(yōu)預(yù)處理方法:用模擬海水在25℃提取0.5h,固液比=1:4。采用該方法對(duì)實(shí)地修復(fù)過(guò)程中溢油污染的海洋岸灘沉積物樣品進(jìn)行預(yù)處理,并分別利用Tox2菌株和RecA菌株評(píng)價(jià)了不同時(shí)間下樣品急性毒性和遺傳毒性的變化規(guī)律。結(jié)果顯示,修復(fù)區(qū)和自然風(fēng)化區(qū)沉積物樣品的急性毒性均為無(wú)毒(2ClHNg為負(fù)值),但遺傳毒性差異較大。從不同站位來(lái)看,同一時(shí)間修復(fù)區(qū)樣品遺傳毒性小于未修復(fù)區(qū)樣品。從時(shí)間上來(lái)看,遺傳毒性隨時(shí)間的推移而降低,且修復(fù)區(qū)樣品降低更快。修復(fù)區(qū)初始樣品(第1天)的遺傳毒性為高毒(NMMC為1.65mg/L),第14天樣品降至中毒(NMMC為0.17mg/L),第30天樣品的降至無(wú)毒(NMMC為負(fù)值)。自然風(fēng)化區(qū)初始樣品的遺傳毒性為高毒(NMMC為1.41mg/L),第60天樣品開始出現(xiàn)中毒(NMMC為0.18mg/L),第120天樣品降至無(wú)毒(NMMC為負(fù)值)。遺傳毒性的檢測(cè)結(jié)果與PAHs的含量有相同的遞減趨勢(shì)。(3)利用脫脂牛奶和NaCl溶液(或LB培養(yǎng)基)構(gòu)成雙因素多梯度的冷凍干燥保護(hù)劑,分別探究Tox2菌株和RecA菌株的最佳冷凍干燥條件,得到二者的最佳凍干保護(hù)劑條件分別為:24%脫脂牛奶、0.5%NaCl溶液和24%脫脂牛奶、NaCl含量為0.5%的LB。凍干后Tox2菌株和RecA菌株的相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度分別大于88.58%、85.13%。用凍干前后的Tox2菌株和RecA菌株分別對(duì)HgCl2和MMC的生物毒性進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示,兩株菌凍干前后的發(fā)光曲線趨勢(shì)相同,在相同物質(zhì)濃度下的發(fā)光抑制率、誘導(dǎo)率基本相當(dāng)。其中HgCl_2對(duì)Tox2菌株凍干前后的EC50相等(均為0.11mg/L),MMC對(duì)RecA菌株凍干前后的EC50差別較小(分別為0.92mg/L、1.02mg/L)。表明所建立的凍干技術(shù)可用于發(fā)光細(xì)菌的長(zhǎng)期保存,且不影響生物毒性檢測(cè)效果。
[Abstract]:The detection of biological toxicity of marine pollution is an important part of marine environmental protection. Luminescentbacterium species (LBTT) is a kind of biotoxicity detection technology, which comprehensively detects the relationship between the concentration of toxic substances and biological effects. It can comprehensively reflect the comprehensive toxic effect of various toxic substances on the environment. Aiming at the standardization of the application of LBT in marine environment, the genetically modified Acinetobacter Acinetobacter Acinetobactersp.Tox2 and Acinetobactersp.RecA were studied. The following main research contents were carried out: (1) the acute toxicity of four heavy metals and two petroleum hydrocarbons was detected by using Tox2 strain as the tested organism. 騫墮，

本文編號(hào)：1788314