甲基磺草酮對(duì)土壤微生物和蚯蚓的生態(tài)毒性研究
本文選題:甲基磺草酮 切入點(diǎn):土壤酶 出處:《山東農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:甲基磺草酮是一種三酮類的除草劑,廣泛應(yīng)用于玉米等農(nóng)田,用來防除禾本科雜草和闊葉雜草。該除草劑呈弱酸性,它的水溶液具有較強(qiáng)穩(wěn)定性,不易光解、揮發(fā),被廣泛大量的使用。該除草劑使用不當(dāng)或長(zhǎng)期大量重復(fù)使用,會(huì)對(duì)土壤的生態(tài)環(huán)境造成危害。本文利用室內(nèi)培養(yǎng)的方法,采用常規(guī)的生理生化方法并結(jié)合限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(T-RFLP)與實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(RT-PCR)等分子生物學(xué)的技術(shù)評(píng)價(jià)甲基磺草酮對(duì)土壤微生物與土壤酶的生態(tài)效應(yīng),還研究了甲基磺草酮對(duì)蚯蚓的氧化脅迫與DNA損傷,為科學(xué)的評(píng)價(jià)甲基磺草酮環(huán)境生態(tài)的效應(yīng)提供了科學(xué)依據(jù)。主要的研究結(jié)果如下:1、本文運(yùn)用平板計(jì)數(shù)法測(cè)定了不同濃度的甲基磺草酮對(duì)土壤中微生物的數(shù)量影響。結(jié)果表明培養(yǎng)20天內(nèi)對(duì)甲基磺草酮在土壤中濃度為0.1、1.0、5.0mg/kg時(shí)對(duì)土壤中的細(xì)菌、真菌和放線菌起到明顯的抑制作用,培養(yǎng)到20天時(shí),細(xì)菌、放線菌數(shù)量恢復(fù)到對(duì)照水平,真菌數(shù)量依然被抑制?偟膩碚f,實(shí)驗(yàn)設(shè)定濃度下的甲基磺草酮對(duì)土壤中微生物的毒性比較小。2、本文測(cè)定了甲基磺草酮對(duì)土壤中脲酶、磷酸酶、β-葡萄糖苷酶的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)低濃度(0.1、1.0mg/kg)的甲基磺草酮對(duì)脲酶的活性產(chǎn)生了先激活后抑制的作用,高濃度(5.0mg/kg)的甲基磺草酮對(duì)脲酶活性一直表現(xiàn)出抑制作用,但最后均恢復(fù)到對(duì)照水平;0.1mg/kg的甲基磺草酮在2天時(shí)對(duì)磷酸酶活性抑制,隨時(shí)間延長(zhǎng)出現(xiàn)激活,1.0、5.0mg/kg的甲基磺草酮在5天前對(duì)磷酸酶的活性激活,隨時(shí)間延長(zhǎng)抑制;對(duì)β-葡萄糖苷酶呈現(xiàn)出先激活再抑制逐漸恢復(fù)到對(duì)照水平的作用。3、應(yīng)用T-RFLP技術(shù),分析甲基磺草酮對(duì)土壤微生物群落多樣性的影響,研究結(jié)果表明各濃度甲基磺草酮均未改變土壤微生物群落的主要結(jié)構(gòu),但是多樣性受到了顯著的抑制,而且群落結(jié)構(gòu)的平衡的穩(wěn)定性被打亂,呈現(xiàn)出了混亂趨勢(shì)。4、運(yùn)用RT-PCR研究后發(fā)現(xiàn),除0.1mg/kg的處理組在第5天時(shí)甲基磺草酮對(duì)AOB-amoA產(chǎn)生了促進(jìn)作用外,其余甲基磺草酮各濃度的處理組均對(duì)AOA-amoA、AOB-amoA基因拷貝數(shù)均產(chǎn)生了顯著的抑制,且抑制作用存在明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。5、運(yùn)用OECD人工土壤法進(jìn)行甲基磺草酮對(duì)蚯蚓的氧化脅迫與DNA損傷的研究,發(fā)現(xiàn)蚯蚓在甲基磺草酮的暴露下,ROS含量在28天內(nèi)均比對(duì)照高;SOD活性在前14天均被激活高于對(duì)照水平,后14天中SOD活性均被抑制低于對(duì)照水平;CAT、POD與GST酶活性在21天內(nèi)均被激活高于對(duì)照水平,到第28天時(shí),恢復(fù)至對(duì)照水平;MDA在第7天時(shí),只有0.1mg/kg的處理組受到抑制低于對(duì)照組,其余均與對(duì)照無差異,14、21天時(shí),MDA被激活高于對(duì)照組水平,28天時(shí)除2.5mg/kg的處理組MDA含量仍被激活外,其余均恢復(fù)到對(duì)照水平;彗星實(shí)驗(yàn)比較靈敏,甲基磺草酮在28天的處理下,都引起了蚯蚓的體腔細(xì)胞DNA的損傷,且時(shí)間越長(zhǎng)、濃度越大,損傷越嚴(yán)重,呈現(xiàn)出顯著的劑量-效應(yīng)關(guān)系。本研究也說明,不同種生物標(biāo)志物的共同使用,能夠正確的評(píng)價(jià)農(nóng)藥等環(huán)境污染物對(duì)土壤的生態(tài)毒性,為土壤污染狀況的監(jiān)測(cè)提供理論支撐。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:X592;X171.5
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1575085
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