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宿主ARFGAP1對CSFV復(fù)制的影響及與NS5A的互作研究

發(fā)布時間:2024-05-14 06:04
  豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的豬瘟(Classical swine fever,CSF)是一種多系統(tǒng)、高傳染性和具有重要經(jīng)濟意義的疾病,在全球范圍內(nèi)造成巨大的經(jīng)濟損失。探索出經(jīng)濟高效的防控方法在很大程度上取決于對CSFV致病機理的清楚認(rèn)識。研究發(fā)現(xiàn)宿主細(xì)胞外被體蛋白Ⅰ(Coatproteincomplex Ⅰ,COP Ⅰ)可參與調(diào)控病毒的復(fù)制,而且發(fā)現(xiàn)COP Ⅰ與CSFV復(fù)制有著密切的關(guān)系。ADP核糖基化因子GTP酶活化蛋白 1(ADP ribosylation factor GTPase-activating protein 1,ARFGAP1)是 COPⅠ的一個關(guān)鍵調(diào)控蛋白,參與COP Ⅰ及網(wǎng)格蛋白包被的囊泡的形成,并且ARFGAP1還在病毒復(fù)制過程中發(fā)揮作用。CSFVNS5A蛋白是一個與病毒復(fù)制密切相關(guān)的非結(jié)構(gòu)蛋白,但尚不清楚ARFGAP1是否與NS5A有互作關(guān)系。因此,本研究旨在探討ARFGAP1對CSFV復(fù)制的影響及與NS5A的相互作用,獲得了以下結(jié)果。(1)ARFGAP1正向調(diào)控CSFV的復(fù)制。用不同濃度ARFGAP1抑制...

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-3?ARFGAP1基因的PCR擴增??

圖2-3?ARFGAP1基因的PCR擴增??

?第二章ARFGAP1對豬瘟病毒復(fù)制的影響???1?M??|2000bp??lOOObp??750bp??500bp??250bp??lOObp??M.?DNA標(biāo)準(zhǔn)DL2000;?1.?ARFGAP1基因的擴増產(chǎn)物;??M.?DNA?Marker?DL2000;?1.?PCR?a....


圖2-5?ARFGAPl-CMV載體轉(zhuǎn)染效率的檢測??Fig.?2-5?Detection?of?transfection?efficiency?of?ARFGAP1-CMV?vector??

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西北農(nóng)林科技大學(xué)碩:士學(xué)位論變??ARFGAP1-CMV質(zhì)粒的細(xì)胞M現(xiàn)綠色熒光,說明帶綠色熒光標(biāo)簽的ARFGAP1-CMV質(zhì)??粒在PK-15細(xì)胞中成功表達(dá),證明ARFGAP1-CMV載體構(gòu)建成功。??圖2-5?ARFGAPl-CMV載體轉(zhuǎn)染效率的檢測??Fig.?2-5?Det....


圖2-9ARFGAP1慢病毒干擾細(xì)胞系的構(gòu)建??Fig.?2-9?Construction?of?ARFGAP1?lentivirus?interference?cell?line??

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?西北農(nóng)林科技大學(xué)騎士季位諗文:???3個輔助質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染至293T細(xì)胞中進(jìn)行慢病毒包裝,南包裝好的ARFGAP1童組慢??病毒感染細(xì)胞,觀察到細(xì)胞開始發(fā)熒光時,添加曝呤霉素接連篩選高表達(dá)的陽性細(xì)胞,??直到細(xì)胞有95%左右發(fā)綠色熒光(圖2-9),說明ARFGAP1慢病毒干擾細(xì)胞....



本文編號:3973291

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