發(fā)布時間：2024-04-27 04:00

　　目的:采用3種體外培養(yǎng)方法對骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)進行誘導(dǎo)分化,探討體外誘導(dǎo)BMSCs向心肌細胞分化的最佳方法。方法:采用密度梯度離心法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法體外分離培養(yǎng)大鼠BMSCs,分為5-氮胞苷(5-aza)組、擴張型心肌病(DCM)模型大鼠心肌細胞裂解液組和DCM模型大鼠血清+5-aza組,同時設(shè)對照組(同等條件下在含10%胎牛血清的L-DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)),觀察細胞形態(tài)表現(xiàn),采用RT-PCR法、Western blotting法和免疫組織化學(xué)染色法檢測細胞中肌鈣蛋白T (cTnT)的表達。結(jié)果:密度梯度離心法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法獲得大鼠BMSCs,BMSCs高表達間充質(zhì)干細胞(MSCs)的特征性表面標記CD44、CD29和CD105,不表達造血干細胞的特征性表面標志CD34;特定誘導(dǎo)條件下,BMSCs可以向成骨細胞及脂肪樣細胞分化。體外3種培養(yǎng)方法均可誘導(dǎo)BMSCs表達cTnT,分化為心肌樣細胞;5-aza組細胞生長狀態(tài)差,其余2組細胞生長狀態(tài)較好,DCM模型大鼠血清+5-aza組細胞中cTnT陽性表達率最高。結(jié)論:采用DCM模型大鼠血清聯(lián)合5-aza誘導(dǎo)BMSCs向心肌細胞分化...

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗動物、主要試劑和儀器
    1.2 BMSCs的分離培養(yǎng)及鑒定
    1.3 3種體外誘導(dǎo)方法培養(yǎng)大鼠BMSCs
    1.4 RT-PCR法檢測BMSCs中cTnT
    1.5 Western blotting法檢測BMSCs中cTnT蛋白表達
    1.6 免疫組織化學(xué)法檢測BMSCs中cTnT陽性表達率
    1.7 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 大鼠BMSCs的分離培養(yǎng)及鑒定
    2.2 3種體外培養(yǎng)方法誘導(dǎo)培養(yǎng)的大鼠BMSCs形態(tài)表現(xiàn)
    2.3 各組大鼠BMSCs中cTnT mRNA和蛋白表達
3 討論



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