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高產(chǎn)纖維素酶霉菌的篩選及纖維素酶系的分離純化

發(fā)布時(shí)間:2024-04-27 06:45
  自然中的纖維素資源極為豐富,隨著人類需求與社會發(fā)展需要,若能對天然資源開發(fā)利用,不但可以緩解資源短缺的問題,對環(huán)境的保護(hù)也可起到積極作用。因此,對于纖維素酶的開發(fā)利用一直是個(gè)研究熱點(diǎn)。纖維素酶是用于降解纖維素唯一有效的催化酶。在果汁加工、飼料制作(飼料中添加酶制劑)、織布以及牛仔加工染色,造紙業(yè)(例如廢紙的脫墨和回收)中都起到重要作用,還可將生物質(zhì)轉(zhuǎn)化為生物能(例如生物乙醇)。通過微生物的發(fā)酵產(chǎn)生纖維素酶已經(jīng)成為工業(yè)生產(chǎn)纖維素酶的重要方法之一。新纖維素酶生產(chǎn)技術(shù)的開發(fā),例如:篩選具有新特征的纖維素酶或產(chǎn)酶微生物對于纖維素酶的開發(fā)和工業(yè)應(yīng)用非常重要。因此,本研究就此從腐質(zhì)果屑中篩選出一株具有高效降解纖維素能力的霉菌:青霉屬(Penicillium)W-B23;運(yùn)用形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)等方法鑒定該青霉;并通過優(yōu)化培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件進(jìn)而提高所產(chǎn)纖維素酶酶活;最后通過分離純化得到較高純度的酶組分。本研究為纖維素酶的研究提供了一株新菌種,對于工業(yè)上產(chǎn)酶的方法、技術(shù)具有很高的指導(dǎo)意義,同時(shí)也為提高純化纖維素酶的純度有積極的影響。1.本試驗(yàn)通過對松樹根部土壤、枯葉堆、腐質(zhì)果屑中具有纖維素降解能力的霉菌進(jìn)...

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.2纖維素降解示意圖

圖1.2纖維素降解示意圖

通過這三種酶組分的協(xié)同作用(江小妹,2020),最終難以被降解的纖維素分子被一點(diǎn)點(diǎn)瓦解,降解成小分子的葡萄糖。纖維素酶降解纖維素過程如圖1.2。也有研究表明,在纖維素降解過程中發(fā)現(xiàn)了其它酶類的參與,例如木聚糖酶,纖維二糖脫氫酶等(訾慧,2017)。


圖3.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖3.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:按照2.2.2的操作,測定并繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線,如圖3.1所示,標(biāo)注回歸方程為y=1.4134x+0.0242,相關(guān)系數(shù)R2=0.997,相關(guān)性良好,通過此葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線測定纖維素酶酶活。將初篩所得霉菌點(diǎn)種于以CMC-Na為唯一碳源的鑒別培養(yǎng)基中,并通過剛果....


圖3.2單菌落

圖3.2單菌落

將初篩所得霉菌點(diǎn)種于以CMC-Na為唯一碳源的鑒別培養(yǎng)基中,并通過剛果紅染色,測定透明圈直徑與菌落直徑比,篩選出符合條件的霉菌菌株(如圖3.2、3.3),即透明全菌落直徑比較大的菌株,并觀察孢子結(jié)構(gòu)特征(如圖3.4)。圖3.3剛果紅染色


圖3.3剛果紅染色

圖3.3剛果紅染色

圖3.2單菌落圖3.4孢子體結(jié)構(gòu)觀察(10*40)



本文編號:3965503

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