發(fā)布時間：2024-04-23 03:55

　　目的通過對核糖體S6激酶2 (Rsk2)進(jìn)行沉默,探討Rsk2對大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)的成骨分化的影響。方法分離出BMSCs,空白對照組不做處理,模型組用Lipofectamine法將siRNA-NC轉(zhuǎn)染到BMSCs細(xì)胞,實驗組用Lipofectamine法將Rsk2 siRNA轉(zhuǎn)染到BMSCs細(xì)胞用于沉默Rsk2,轉(zhuǎn)染48 h后換用成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基,在誘導(dǎo)分化后第7 d檢測堿性磷酸酶(ALP)相對活性,Rsk2、骨鈣蛋白(OCN)、骨形成蛋白2 (BMP2)、Ⅰ型膠原(COLL-Ⅰ)和成骨相關(guān)蛋白Runt相關(guān)因子2(Runx2) mRNA表達(dá)水平。結(jié)果在誘導(dǎo)分化第7 d,空白對照組、模型組和實驗組的Rsk2 mRNA相對表達(dá)量分別為1. 00±0. 03,0. 95±0. 08和0. 50±0. 07; OCN mRNA相對表達(dá)量分別為1. 00±0. 09,1. 07±0. 11和0. 43±0. 06; BMP2 mRNA相對表達(dá)量分別為1. 00±0. 06,1. 06±0. 12和0. 67±0. 07; COLL-ⅠmRNA相對表達(dá)量分別為1. 00±0. 02...

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圖1誘導(dǎo)分化第28d細(xì)胞外礦化基質(zhì)染色(×10)

空白對照組和模型組可觀察到明顯鈣結(jié)節(jié)，而實驗組未觀察到明顯鈣結(jié)節(jié)。見圖1。討論

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