植物的線粒體對(duì)新陳代謝和多種生物合成途徑都發(fā)揮重要作用,其中氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)途徑能夠滿足植物細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的需求。在這過(guò)程中,電子依托分布于線粒體內(nèi)膜中的一系列呼吸復(fù)合物(Ⅰ-Ⅳ)參與氧化還原反應(yīng)完成電子傳遞,并釋放能量驅(qū)動(dòng)ATP合成。但是由于呼吸復(fù)合物Ⅰ-Ⅲ存在的電子泄漏現(xiàn)象,電子傳遞所消耗的氧的0.2%-2%并沒(méi)有形成H20而是形成了活性氧(reactive oxygen species,ROS),例如超氧化物陰離子和過(guò)氧化氫(H2O2)等。抗壞血酸過(guò)氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)就是植物細(xì)胞中清除H2O2的主要酶之一。擬南芥的研究表明線粒體和葉綠體的ROS水平是通過(guò)雙定位于這兩個(gè)細(xì)胞器的葉綠體基質(zhì)型抗壞血酸過(guò)氧化物酶(sAPX)共同調(diào)控的,此外還有細(xì)胞質(zhì)抗壞血酸過(guò)氧化物酶(cAPX)通過(guò)交叉保護(hù)機(jī)制予以輔助。然而,木本植物中線粒體的ROS水平調(diào)控機(jī)制還不夠清晰。本研究通過(guò)討論毛白楊PtomitAPX亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)定位的特異性;qRT-PCR分析了PtomitAPX的表達(dá)模式;觀察轉(zhuǎn)基因植株和細(xì)胞...

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圖２．１多物種ＡＰＸ信號(hào)肽蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)分析的比對(duì)分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｍｕｌｔｉ－ｓｐｅ?

體信號(hào)肽則含有二者特征但并不顯著（Ｂｈｕｓｈａｎ?ｅ／ｏ／．，２００６；?Ｇｅ?ｅ／ｆｌ／．，２０１４）。??在本研究的結(jié)果中，ｃｈｌＡＰＸ（ｓＡＰＸ和ｔＡＰＸ）信號(hào)肽Ｎ端前１９個(gè)氨基酸富含絲??氨酸和脯氨酸，而Ｐ／〇／ｗ以則富含正電荷氨基酸（圖２．１）。此外，Ｐｔｏ／ｎ／Ｗ／ｌ....

圖２．２多物種ＡＰＸ進(jìn)化樹(shù)分析??進(jìn)化樹(shù)分析使用到的植物包括擬南芥、水稻、玉米、卷柏、衣藻、團(tuán)藻、膠球藻、綠色鞭毛藻、??微胞藻、蕪青、大豆、毛果楊、毛白楊

Ｐ／ｏｗ／Ｍ／Ｗ和Ｐ／ｏＭＰＸ在植物受到Ｈ２０２、ＮａＣｌ、高溫、干旱、低溫以及強(qiáng)光脅??迫時(shí)的表達(dá)模式通過(guò)ｑＲＴ－ＰＣＲ進(jìn)行了分析。Ｈ２０２、ＮａＣｌ以及高溫脅迫使??的表達(dá)量顯著上升（圖２．３Ａ），而Ｐ／ｆｗｄＰＸ和Ｐ／ｏＭＰＸ則顯著下降（圖２．３Ｂ，Ｃ）。此??夕卜，高強(qiáng)度....

圖２．３?和／表達(dá)模式的分析??Ａ，非生物脅迫下的表達(dá)模式；Ｂ，非生物脅迫下／ＶｏＭＰＪＴ的表達(dá)模式；Ｃ，非生物脅??迫下Ｐ／ｏ以ＰＺ的表達(dá)模式

ｇｈｔ?Ｃｏｌｄ?Ｈｉｇｈ?ｌｉｇｈｔ??、翁??圖２．３?和／表達(dá)模式的分析??Ａ，非生物脅迫下的表達(dá)模式；Ｂ，非生物脅迫下／ＶｏＭＰＪＴ的表達(dá)模式；Ｃ，非生物脅??迫下Ｐ／ｏ以ＰＺ的表達(dá)模式。＊＊表示Ｐ＜０．０１的極顯著差異；＊表示Ｐ＜０．０５的顯著差異。??Ｆｉｇｕｒｅ?２....

圖２．４密度梯度離心法分離高純度線粒體??Ａ，第一步密度梯度離心：順序滴加４０％?ＭＴＥ溶液（２７－３０層）、２３％?ＭＴＥ溶液（１０－２６層）和??

結(jié)構(gòu)的污染問(wèn)題。第一步密度梯度離心后，線粒體樣品出現(xiàn)在２３％和４０％蔗糖溶液??的交界處，隨后本研究將整個(gè)離心柱以ｌｍＬ為單位進(jìn)行分層的標(biāo)志酶活性檢測(cè)，結(jié)??果如圖２．４?Ａ所示，線粒體聚集在１８－３０層，但在這之中存在過(guò)氧化物酶體的污染（檢??測(cè)到過(guò)氧化氫酶活性），此外，堿性焦....

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