生物活性小分子檢測(cè)的近紅外熒光探針的設(shè)計(jì)、合成及研究
發(fā)布時(shí)間:2024-01-24 15:04
生物體內(nèi)分布有很多種有活性的小分子,例如,活性氧族、活性氮族、氨基酸、核苷酸以及各種酶類等。由于這些小分子參與了生物體內(nèi)很多生理和病理過(guò)程,這對(duì)于維持生命的正常生理活動(dòng)起著至關(guān)重要的作用。因此,監(jiān)測(cè)它們的水平及變化可以作為衡量細(xì)胞的增殖、代謝過(guò)程的一項(xiàng)重要指標(biāo)。基于苯并吡喃腈結(jié)構(gòu)的熒光團(tuán),本文合成了三個(gè)結(jié)構(gòu)類似的用于檢測(cè)過(guò)氧化氫的近紅外探針Dicp1、Dicp2、Dicp3。與Dicp1、Dicp2相比,Dicp3顯示出更為優(yōu)異的光性質(zhì)。Dicp3與過(guò)氧化氫反應(yīng)后,熒光強(qiáng)度顯著提高了 22倍,溶液顏色由黃色變?yōu)榧t色。探針Dicp3還成功地用于Hi-5細(xì)胞中外、內(nèi)源性的過(guò)氧化氫成像和線蟲成像。更值一提的是,通過(guò)活體斑馬魚成像實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)探針Dicp3能夠示蹤銅誘導(dǎo)的神經(jīng)瘤損傷引起的斑馬魚體內(nèi)過(guò)氧化氫的過(guò)量積累。從光譜測(cè)試及生物實(shí)驗(yàn)可知,Dicp3是能夠直接檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫水平波動(dòng),間接示蹤炎癥變化的近紅外熒光探針;跓晒鈭F(tuán)1-芘甲醛,本文合成了用于檢測(cè)次氯酸的近紅外探針Miyp,該探針以乙烯橋結(jié)構(gòu)為識(shí)別基團(tuán),吲哚部分所帶的正電荷為線粒體靶向基團(tuán)。該探針本身為紅色熒光,而當(dāng)次氯酸根進(jìn)...
【文章頁(yè)數(shù)】:138 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 緒論
1.2 熒光探針的結(jié)構(gòu)和識(shí)別機(jī)理
1.2.1 熒光探針的結(jié)構(gòu)
1.2.2 熒光探針的識(shí)別機(jī)理
1.3 過(guò)氧化氫探針的發(fā)展
1.3.1 基于二苯基膦的熒光探針
1.3.2 基于磺酸基的熒光探針
1.3.3 基于硼酸酯的熒光探針
1.3.4 基于偶;臒晒馓结
1.4 次氯酸探針的發(fā)展
1.4.1 基于對(duì)甲氧基苯酚的熒光探針
1.4.2 基于肟的熒光探針
1.4.3 基于硫酯的熒光探針
1.4.4 基于硫醚的熒光探針
1.4.5 基于硫酮的熒光探針
1.4.6 基于酰肼的熒光探針
1.4.7 基于硒化物的熒光探針
1.4.8 基于碳氮雙鍵的熒光探針
1.5 pH探針的發(fā)展
1.5.1 基于N,N-二甲氨基質(zhì)子化的熒光探針
1.5.2 基于苯并咪唑質(zhì)子化的比率型熒光探針
1.5.3 基于螺酰胺開環(huán)的熒光探針
1.6 ALP探針的發(fā)展
第二章 基于苯并吡喃腈結(jié)構(gòu)的近紅外過(guò)氧化氫熒光探針的合成、熒光成像研究
2.1 概論
2.2 探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)
2.3 實(shí)驗(yàn)部分
2.3.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
2.3.2 合成部分
2.3.3 探針Dicp3與過(guò)氧化氫反應(yīng)的機(jī)理
2.3.4 Dicp1、Dicp2、Dicp3的光譜測(cè)試方法
2.3.5 Dicp3的生物測(cè)試方法
2.4 結(jié)果與討論
2.4.1 Dicpl、Dicp2、Dicp3的熒光光譜對(duì)比
2.4.2 Dicp3的熒光滴定測(cè)試
2.4.3 Dicp3的紫外滴定測(cè)試
2.4.4 Dicp3對(duì)活性氧氮族的熒光選擇性測(cè)試
2.4.5 Dicp3對(duì)活性氧氮族的紫外選擇性測(cè)試
2.4.6 Dicp3的時(shí)間響應(yīng)測(cè)試
2.4.7 Dicp3的檢測(cè)極限測(cè)試
2.4.8 Dicp3的pH響應(yīng)測(cè)試
2.4.9 Dicp3的細(xì)胞毒性測(cè)試
2.4.10 Dicp3的細(xì)胞共聚焦成像
2.4.11 Dicp3的線蟲活體成像
2.4.12 Dicp3的斑馬魚活體成像
2.5 本章小結(jié)
第三章 基于熒光團(tuán)芘的靶向線粒體的近紅外次氯酸熒光探針的合成、熒光成像研究
3.1 概述
3.2 探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)
3.3 實(shí)驗(yàn)部分
3.3.1 探針?lè)肿拥暮铣?br> 3.3.2 探針Miyp與次氯酸根反應(yīng)的機(jī)理
3.3.3 Miyp的光譜測(cè)試方法
3.3.4 Miyp的生物測(cè)試方法
3.4 結(jié)果與討論
3.4.1 Miyp的熒光滴定測(cè)試
3.4.2 Miyp的紫外滴定測(cè)試
3.4.3 Miyp的熒光選擇性測(cè)試
3.4.4 Miyp的紫外選擇性測(cè)試
3.4.5 Miyp的時(shí)間響應(yīng)測(cè)試
3.4.6 Miyp的檢測(cè)極限測(cè)試
3.4.7 Miyp的pH響應(yīng)測(cè)試
3.4.8 Miyp的細(xì)胞毒性測(cè)試
3.4.9 Miyp的Hela細(xì)胞共聚焦成像
3.4.10 Miyp的線粒體共定位實(shí)驗(yàn)
3.5 本章小結(jié)
第四章 基于pH檢測(cè)的靶向溶酶體近紅外熒光探針的合成、熒光成像研究
4.1 概論
4.2 探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)
4.3 實(shí)驗(yàn)部分
4.3.1 合成部分
4.3.2 pH探針與質(zhì)子反應(yīng)的機(jī)理
4.3.3 pH探針的光譜測(cè)試方法
4.3.4 pH探針的生物測(cè)試方法
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 pH探針的熒光滴定測(cè)試
4.4.2 pH探針的紫外滴定測(cè)試
4.4.3 pH探針的熒光選擇性測(cè)試
4.4.4 pH探針的時(shí)間響應(yīng)測(cè)試
4.4.5 pH探針的細(xì)胞毒性測(cè)試
4.4.6 Np-2、Np-4的細(xì)胞共聚焦成像
4.4.7 Np-2、Np-4的溶酶體共定位實(shí)驗(yàn)
4.5 本章小結(jié)
第五章 基于堿性磷酸酯酶檢測(cè)的近紅外熒光探針的合成、熒光成像研究
5.1 概論
5.2 探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)
5.3 實(shí)驗(yàn)部分
5.3.1 合成部分
5.3.2 探針Niap與ALP反應(yīng)的機(jī)理
5.3.3 Niap的光譜測(cè)試方法
5.3.4 Niap的生物測(cè)試方法
5.4 結(jié)果與討論
5.4.1 Niap的熒光滴定測(cè)試
5.4.2 Niap的紫外滴定測(cè)試
5.4.3 Niap的熒光選擇性及競(jìng)爭(zhēng)性測(cè)試
5.4.4 Niap的紫外選擇性測(cè)試
5.4.5 Niap的時(shí)間響應(yīng)測(cè)試
5.4.6 Niap白勺細(xì)月包毒性測(cè)Ji式
5.4.7 Niap的Hela細(xì)胞共聚焦成像
5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
6.1 總結(jié)
6.2 展望
附錄一: 過(guò)氧化氫探針的相關(guān)譜圖
附錄二: 次氯酸探針的相關(guān)譜圖
附錄三: pH探針的相關(guān)譜圖
附錄四: 堿性磷酸酯酶探針的相關(guān)譜圖
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間完成的科研成果
致謝
本文編號(hào):3884019
【文章頁(yè)數(shù)】:138 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 緒論
1.2 熒光探針的結(jié)構(gòu)和識(shí)別機(jī)理
1.2.1 熒光探針的結(jié)構(gòu)
1.2.2 熒光探針的識(shí)別機(jī)理
1.3 過(guò)氧化氫探針的發(fā)展
1.3.1 基于二苯基膦的熒光探針
1.3.2 基于磺酸基的熒光探針
1.3.3 基于硼酸酯的熒光探針
1.3.4 基于偶;臒晒馓结
1.4 次氯酸探針的發(fā)展
1.4.1 基于對(duì)甲氧基苯酚的熒光探針
1.4.2 基于肟的熒光探針
1.4.3 基于硫酯的熒光探針
1.4.4 基于硫醚的熒光探針
1.4.5 基于硫酮的熒光探針
1.4.6 基于酰肼的熒光探針
1.4.7 基于硒化物的熒光探針
1.4.8 基于碳氮雙鍵的熒光探針
1.5 pH探針的發(fā)展
1.5.1 基于N,N-二甲氨基質(zhì)子化的熒光探針
1.5.2 基于苯并咪唑質(zhì)子化的比率型熒光探針
1.5.3 基于螺酰胺開環(huán)的熒光探針
1.6 ALP探針的發(fā)展
第二章 基于苯并吡喃腈結(jié)構(gòu)的近紅外過(guò)氧化氫熒光探針的合成、熒光成像研究
2.1 概論
2.2 探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)
2.3 實(shí)驗(yàn)部分
2.3.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
2.3.2 合成部分
2.3.3 探針Dicp3與過(guò)氧化氫反應(yīng)的機(jī)理
2.3.4 Dicp1、Dicp2、Dicp3的光譜測(cè)試方法
2.3.5 Dicp3的生物測(cè)試方法
2.4 結(jié)果與討論
2.4.1 Dicpl、Dicp2、Dicp3的熒光光譜對(duì)比
2.4.2 Dicp3的熒光滴定測(cè)試
2.4.3 Dicp3的紫外滴定測(cè)試
2.4.4 Dicp3對(duì)活性氧氮族的熒光選擇性測(cè)試
2.4.5 Dicp3對(duì)活性氧氮族的紫外選擇性測(cè)試
2.4.6 Dicp3的時(shí)間響應(yīng)測(cè)試
2.4.7 Dicp3的檢測(cè)極限測(cè)試
2.4.8 Dicp3的pH響應(yīng)測(cè)試
2.4.9 Dicp3的細(xì)胞毒性測(cè)試
2.4.10 Dicp3的細(xì)胞共聚焦成像
2.4.11 Dicp3的線蟲活體成像
2.4.12 Dicp3的斑馬魚活體成像
2.5 本章小結(jié)
第三章 基于熒光團(tuán)芘的靶向線粒體的近紅外次氯酸熒光探針的合成、熒光成像研究
3.1 概述
3.2 探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)
3.3 實(shí)驗(yàn)部分
3.3.1 探針?lè)肿拥暮铣?br> 3.3.2 探針Miyp與次氯酸根反應(yīng)的機(jī)理
3.3.3 Miyp的光譜測(cè)試方法
3.3.4 Miyp的生物測(cè)試方法
3.4 結(jié)果與討論
3.4.1 Miyp的熒光滴定測(cè)試
3.4.2 Miyp的紫外滴定測(cè)試
3.4.3 Miyp的熒光選擇性測(cè)試
3.4.4 Miyp的紫外選擇性測(cè)試
3.4.5 Miyp的時(shí)間響應(yīng)測(cè)試
3.4.6 Miyp的檢測(cè)極限測(cè)試
3.4.7 Miyp的pH響應(yīng)測(cè)試
3.4.8 Miyp的細(xì)胞毒性測(cè)試
3.4.9 Miyp的Hela細(xì)胞共聚焦成像
3.4.10 Miyp的線粒體共定位實(shí)驗(yàn)
3.5 本章小結(jié)
第四章 基于pH檢測(cè)的靶向溶酶體近紅外熒光探針的合成、熒光成像研究
4.1 概論
4.2 探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)
4.3 實(shí)驗(yàn)部分
4.3.1 合成部分
4.3.2 pH探針與質(zhì)子反應(yīng)的機(jī)理
4.3.3 pH探針的光譜測(cè)試方法
4.3.4 pH探針的生物測(cè)試方法
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 pH探針的熒光滴定測(cè)試
4.4.2 pH探針的紫外滴定測(cè)試
4.4.3 pH探針的熒光選擇性測(cè)試
4.4.4 pH探針的時(shí)間響應(yīng)測(cè)試
4.4.5 pH探針的細(xì)胞毒性測(cè)試
4.4.6 Np-2、Np-4的細(xì)胞共聚焦成像
4.4.7 Np-2、Np-4的溶酶體共定位實(shí)驗(yàn)
4.5 本章小結(jié)
第五章 基于堿性磷酸酯酶檢測(cè)的近紅外熒光探針的合成、熒光成像研究
5.1 概論
5.2 探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)
5.3 實(shí)驗(yàn)部分
5.3.1 合成部分
5.3.2 探針Niap與ALP反應(yīng)的機(jī)理
5.3.3 Niap的光譜測(cè)試方法
5.3.4 Niap的生物測(cè)試方法
5.4 結(jié)果與討論
5.4.1 Niap的熒光滴定測(cè)試
5.4.2 Niap的紫外滴定測(cè)試
5.4.3 Niap的熒光選擇性及競(jìng)爭(zhēng)性測(cè)試
5.4.4 Niap的紫外選擇性測(cè)試
5.4.5 Niap的時(shí)間響應(yīng)測(cè)試
5.4.6 Niap白勺細(xì)月包毒性測(cè)Ji式
5.4.7 Niap的Hela細(xì)胞共聚焦成像
5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
6.1 總結(jié)
6.2 展望
附錄一: 過(guò)氧化氫探針的相關(guān)譜圖
附錄二: 次氯酸探針的相關(guān)譜圖
附錄三: pH探針的相關(guān)譜圖
附錄四: 堿性磷酸酯酶探針的相關(guān)譜圖
參考文獻(xiàn)
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