漆酶(EC 1.10.3.2)是一種含銅的多酚氧化酶。它對芳香族化合物、甾體激素和生物色素等具有廣泛的催化特異性。統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),它可以催化氧化大約三百余種不同類型的底物,在家具裝飾、低污染紡織、紙張脫色、生活洗滌和食品飲料等一系列行業(yè)中都具有巨大的應用潛力。近年來,對漆酶的研究日益受到重視。漆酶的來源非常廣泛,大致可分為植物漆酶、昆蟲漆酶、真菌漆酶和細菌漆酶。其中,細菌漆酶相對于其他漆酶,具有來源廣、生長周期短、熱穩(wěn)定性好、pH范圍寬等優(yōu)勢。而大腸桿菌(Escherichia coli)漆酶作為一種重要的細菌漆酶,針對其研究的文獻報道也越來越多。雖然已有部分文獻對E.coli漆酶進行過相關研究,但針對其自身信號肽、前導肽以及第三結構域對其功能的影響卻未見報道;雖然針對E.coli漆酶和真菌漆酶結構差異部分的研究已有相關報道,但差異部分對其功能的影響卻始終不明確。本研究以E.coli來源的漆酶CueO作為研究對象,首先實現(xiàn)了其在畢赤酵母(Pichia pastoris)中的異源表達,并研究了表達產(chǎn)物的酶學特性。為闡明CueO自身信號肽、前導肽、第三結構域以及不同結構域間連接區(qū)段特有的“蓋子”...

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【學位級別】：碩士

圖１．１漆酶系統(tǒng)發(fā)育樹??Ｆｉｇ?１．１?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?Ｌａｃｃａｓｅ??注：圖中所列序列來源ＧｅｎＢａｎｋ

圖１．２灰蓋鬼傘菌漆酶（ＣｃＬ）的結構圖??

圖１．３銅原子示意圖??Ｆｉｇ?１．３?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｃｕ??注：Ａ．?ＴＩＣｕ示意圖；Ｂ．?Ｔ２／Ｔ３示意圖

圖１．５?ＣｏｔＡ的“蓋子”結構示意圖??Ｆｉｇ?１．５?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＣｏｔＡ?ｃｏｖｅｒ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ??

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