從雌性草地夜蛾蛹中分離得到的昆蟲細(xì)胞系(Sf)在桿狀病毒昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)(Baculovirus-insect cell system,BICS)中被廣泛用作重組蛋白生產(chǎn)的宿主。然而,2014年Ma H等發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞系受到一種病毒的污染,該病毒現(xiàn)在被稱為新彈狀病毒(Sf-rhabdoviru,Sf-RV)。這提出了一個潛在的安全問題,可能對作為商業(yè)重組蛋白生產(chǎn)平臺的BICS產(chǎn)生不利影響。因此,我們篩選一種Sf-RV陰性的Sf9細(xì)胞株,命名為Sf9-ZY,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測表明,在連續(xù)培養(yǎng)的25代過程中,Sf9-ZY細(xì)胞沒有檢測到Sf-RV。Sf9-ZY細(xì)胞的一般特性,包括平均生長率、直徑,與Sf9細(xì)胞基本相同;Sf9-ZY細(xì)胞和Sf9細(xì)胞產(chǎn)生感染性桿狀病毒水平相當(dāng);Sf9-ZY和Sf9細(xì)胞培養(yǎng)重組桿狀病毒表達(dá)重組蛋白水平相當(dāng)。上述結(jié)果表明,Sf9-ZY細(xì)胞可作為改良的替代宿主,以規(guī)避與使用Sf-RV污染的Sf9細(xì)胞制造重組蛋白有關(guān)的潛在安全危險。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1細(xì)胞、重組桿狀病毒及試劑
    2 Sf-RV檢測
    3細(xì)胞增殖特性
    4桿狀病毒增殖水平
    5 HPV16型和HPV58型L1蛋白表達(dá)水平對比
結(jié)果
    1 Sf-RV檢測
    2細(xì)胞增殖特性
    3桿狀病毒增殖水平
    4 HPV16型和HPV58型L1蛋白表達(dá)量對比
討論



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