泛素化是一種重要的翻譯后修飾,幾乎調(diào)控著生命活動(dòng)的所有方面.泛素連接酶是泛素化過(guò)程中唯一對(duì)底物蛋白質(zhì)有特異性識(shí)別能力的一類(lèi)酶,它們?cè)诜核鼗^(guò)程中是不可或缺的,起到非常關(guān)鍵的作用.人抗凋亡E3泛素連接酶(AREL1)是HECT泛素連接酶家族成員之一,它能夠泛素化促凋亡蛋白SMAC、HtrA2和ARTS,并通過(guò)蛋白酶體將它們降解,從而發(fā)揮抵抗細(xì)胞凋亡的作用.本文解析了3.2?分辨率的人AREL1蛋白催化結(jié)構(gòu)域(AREL1^HECT)的晶體結(jié)構(gòu),并將其與HECT家族中其他成員的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了比對(duì).尺寸排阻色譜和X射線小角散射的結(jié)果表明,AREL1^HECT在溶液中是以多種聚集狀態(tài)形式存在的,小角散射的3D模型進(jìn)一步表明AREL1^HECT在溶液中會(huì)發(fā)生二聚化.這些結(jié)果將為AREL1^HECT與泛素復(fù)合物結(jié)構(gòu)的解析及功能的分析提供堅(jiān)實(shí)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),為揭示AREL1泛素化底物蛋白質(zhì)的分子機(jī)制提供重要的依據(jù).

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 菌株、表達(dá)載體和純化介質(zhì)
        1.1.2 試劑和儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 AREL1HECT蛋白表達(dá)與純化
        1.2.2 AREL1HECT蛋白結(jié)晶與衍射數(shù)據(jù)收集
        1.2.3 數(shù)據(jù)處理與結(jié)構(gòu)解析
        1.2.4 尺寸排阻色譜（SEC)
        1.2.5 X射線小角散射（SAXS)
        1.2.6 SAXS 3D建模
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 AREL1HECT的整體結(jié)構(gòu)
    2.2 AREL1HECT與HECT家族其他成員的結(jié)構(gòu)比對(duì)及分析
    2.3 AREL1HECT在溶液中的聚集狀態(tài)分析
3 討論



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