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植物乳桿菌抗噬菌體P2菌株篩選及其特性研究

發(fā)布時間:2023-01-11 21:28
  本實驗以分離自植物乳桿菌異常發(fā)酵液的烈性噬菌體P2及其宿主Lactobacillus plantarum IMAUU10120為研究對象,采用次級感染法篩選獲得自發(fā)突變抗噬菌體菌株(BIM)。通過比較其益生特性、吸附特性及發(fā)酵特性,判斷抗性菌株與敏感株間是否存在差異,得出以下結(jié)論:(1)篩選出一株自發(fā)突變的可抗噬菌體P2的植物乳桿菌。證實該菌株對噬菌體P2具有完全抗性,并可穩(wěn)定遺傳。比較絲裂霉素C、紫外線誘導(dǎo)前后抗性菌株溶原性表現(xiàn),顯示該菌株為非溶源菌。(2)突變株在體外耐胃酸、耐膽鹽實驗中表現(xiàn)出極強(qiáng)的耐受能力,在pH值為3.0和8.0的消化環(huán)境中存活率達(dá)90%以上。(3)噬菌體P2對突變株與敏感株的吸附率均在97%以上,表明噬菌體吸附受體未發(fā)生改變,且細(xì)胞生理狀態(tài)對噬菌體吸附能力無顯著影響(P>0.05)。以玻璃珠機(jī)械法純化細(xì)菌細(xì)胞壁,經(jīng)三氯乙酸和溶菌酶作用宿主細(xì)胞壁后可使噬菌體吸附率顯著下降(P<0.05)。分析噬菌體吸附受體可能與磷壁酸或磷壁酸-肽聚糖聚合物有關(guān)。(4)敏感株與突變株單菌株發(fā)酵豆乳的時間均為19h左右,兩組發(fā)酵豆乳的發(fā)酵特性及感官特性無顯著差異(P>0.05)。證... 

【文章頁數(shù)】:56 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
1 前言
    1.1 乳酸菌
    1.2 植物乳桿菌
    1.3 噬菌體
    1.4 噬菌體的危害及控制措施
        1.4.1 物理控制方法
        1.4.2 化學(xué)控制方法
    1.5 細(xì)菌抗噬菌體機(jī)制
    1.6 噬菌體吸附機(jī)理
    1.7 L.plantarum IMAU10120及噬菌體P2
        1.7.1 L.plantarum IMAU10120
        1.7.2 噬菌體P2
    1.8 課題研究目的及主要內(nèi)容
        1.8.1 課題目的及意義
        1.8.2 課題研究內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 菌株及噬菌體來源
        2.1.2 主要儀器與設(shè)備
        2.1.3 主要培養(yǎng)基及試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 菌種活化
        2.2.2 噬菌體增殖
        2.2.3 噬菌體最佳感染復(fù)數(shù)確定
        2.2.4 自發(fā)突變抗噬菌體菌株的篩選
        2.2.5 抗噬菌體菌株的形態(tài)觀察
        2.2.6 抗性菌株的生長情況
        2.2.7 抗噬菌體菌株抗性檢測
        2.2.8 抗性菌株益生特性研究
        2.2.9 噬菌體對敏感菌株及抗性菌株的吸附特性
        2.2.10 植物乳桿菌噬菌體P2吸附受體測定
        2.2.11 突變菌株的發(fā)酵特性
        2.2.12 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
    3.1 噬菌體P2的最佳感染復(fù)數(shù)
    3.2 抗噬菌體菌株的篩選
    3.3 抗噬菌體菌株形態(tài)觀察
    3.4 抗噬菌體菌株與敏感株的生長曲線
        3.4.1 抗噬菌體菌株與敏感株的生長曲線
        3.4.2 菌株培養(yǎng)代數(shù)計算
    3.5 抗噬菌體菌株的抗性
        3.5.1 抗噬菌體菌株的抗噬菌體能力
        3.5.2 抗噬菌體菌株的遺傳穩(wěn)定性
        3.5.3 抗噬菌體菌株的溶原性檢測
    3.6 抗性菌株益生特性研究
        3.6.1 人工胃腸液耐受能力的測定
        3.6.2 對膽鹽的耐受效果
    3.7 植物乳桿菌敏感株與突變株吸附特性比較分析
    3.8 抗噬菌體菌株的吸附特性
        3.8.1 細(xì)胞生理狀態(tài)對噬菌體P2吸附能力的影響
        3.8.2 噬菌體P2吸附受體的測定
    3.9 抗性菌株發(fā)酵特性研究
        3.9.1 發(fā)酵終點(diǎn)及時間
        3.9.2 44℃貯藏期間發(fā)酵豆乳的pH值變化
        3.9.3 44℃貯藏期間發(fā)酵豆乳的滴定酸度變化
        3.9.4 44℃貯藏期間發(fā)酵豆乳的黏度變化
        3.9.5 44℃貯藏期間發(fā)酵豆乳的脫水收縮性變化
        3.9.6 44℃貯藏期間發(fā)酵豆乳的活菌數(shù)變化
        3.9.7 44℃貯藏期間發(fā)酵豆乳的游離氨基氮變化
        3.9.8 44℃貯藏期間發(fā)酵豆乳的感官鑒評
4 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡介



本文編號:3729681

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