乙型腦炎病毒的分離及減毒乙腦疫苗株的全長克隆構(gòu)建
發(fā)布時間:2022-02-26 21:45
[目 的]乙型腦炎為常見的蚊媒傳播人獸共患病疾病,由乙腦病毒引起;病死率高,后遺癥嚴(yán)重,近年來乙腦流行區(qū)域呈擴(kuò)散趨勢,對人類健康有著嚴(yán)重威脅。目前尚不完全了解乙腦病毒的毒力決定因素,因此對乙腦病毒基因組及蛋白分析是十分有必要的。本研究從一位重癥乙型腦炎病毒感染患者的血清及腦脊液樣本中分離得到一株乙型腦炎病毒,對其全基因組序列進(jìn)行分析,并對其蛋白結(jié)構(gòu)和功能以及蛋白的理化性質(zhì)和分子功能等方面進(jìn)行預(yù)測。為方便進(jìn)一步鑒定預(yù)測的毒力相關(guān)位點是否真的會對乙腦病毒的毒力產(chǎn)生影響,我們以減毒乙腦病毒疫苗株SA14-14-2為模板構(gòu)建了乙腦病毒疫苗株的全長感染性克隆,以助于后續(xù)對乙腦全長克隆質(zhì)粒進(jìn)行定點突變,觀察突變株與疫苗株的復(fù)制能力及毒力差異,以研究及鑒定毒力位點。[方 法]在云南省西雙版納收集得到一位乙腦感染患者血清及腦脊液,將樣品接種Vero細(xì)胞分離野毒株,對其進(jìn)行了病毒RNA的提取、RT-PCR、測序,拼接獲得其完整序列,并通過DNAMAN和MEGA6.0軟件對其全基因組核苷酸及氨基酸序列進(jìn)行分析,后通過ProtParam、PSIPRED、Phyre2和SWISS-MODEL軟件對NS3和NS...
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
材料與方法
結(jié)果
討論
參考文獻(xiàn)
綜述 乙型腦炎的診斷及治療
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]PD1+CCR2+CD8+T Cells Infiltrate the Central Nervous System during Acute Japanese Encephalitis Virus Infection[J]. Fang Zhang,Linlin Qi,Tong Li,Xiaojing Li,Dan Yang,Shengbo Cao,Jing Ye,Bin Wei. Virologica Sinica. 2019(05)
[2]我國流行性乙型腦炎臨床流行病學(xué)研究現(xiàn)狀[J]. 劉楠,高永利,謝紫陽,何蓓. 西北國防醫(yī)學(xué)雜志. 2019(06)
[3]Japanese Encephalitis Virus NS1’ Protein Antagonizes Interferon Beta Production[J]. Dengyuan Zhou,Fan Jia,Qiuyan Li,Luping Zhang,Zheng Chen,Zikai Zhao,Min Cui,Yunfeng Song,Huanchun Chen,Shengbo Cao,Jing Ye. Virologica Sinica. 2018(06)
[4]CT在流行性乙型腦炎診斷及預(yù)后評估中的作用[J]. 羅瀟,劉斌,胡俊,何永勝. 中國地方病防治雜志. 2018(04)
[5]畢赤酵母分泌表達(dá)JEV prME蛋白及其形成病毒樣顆粒的免疫原性鑒定[J]. 趙鵬,江雅,王經(jīng)滿,范浩杰,曹瑞兵. 生物工程學(xué)報. 2017(05)
[6]流行性乙型腦炎快速血清學(xué)診斷方法研究進(jìn)展[J]. 宋子域,吳科榜,吳麗麗,趙建國. 中國畜牧獸醫(yī). 2015(12)
[7]我國乙型腦炎病毒血清學(xué)ELISA診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 陶婭琳,周紅寧. 中國病原生物學(xué)雜志. 2012(09)
[8]清熱解毒法輔助治療重型流行性乙型腦炎169例臨床觀察[J]. 董夢久,凃晉文,劉志勇. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(中醫(yī)臨床版). 2012(04)
[9]224例流行性乙型腦炎流行特征分析[J]. 時瑩,王媛,劉梓諭,丁天兵. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2012(07)
[10]門診癡呆患者診斷率低的原因分析[J]. 山媛,屈秋民,郭峰,喬晉. 中華老年醫(yī)學(xué)雜志. 2011 (10)
本文編號:3645034
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
材料與方法
結(jié)果
討論
參考文獻(xiàn)
綜述 乙型腦炎的診斷及治療
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]PD1+CCR2+CD8+T Cells Infiltrate the Central Nervous System during Acute Japanese Encephalitis Virus Infection[J]. Fang Zhang,Linlin Qi,Tong Li,Xiaojing Li,Dan Yang,Shengbo Cao,Jing Ye,Bin Wei. Virologica Sinica. 2019(05)
[2]我國流行性乙型腦炎臨床流行病學(xué)研究現(xiàn)狀[J]. 劉楠,高永利,謝紫陽,何蓓. 西北國防醫(yī)學(xué)雜志. 2019(06)
[3]Japanese Encephalitis Virus NS1’ Protein Antagonizes Interferon Beta Production[J]. Dengyuan Zhou,Fan Jia,Qiuyan Li,Luping Zhang,Zheng Chen,Zikai Zhao,Min Cui,Yunfeng Song,Huanchun Chen,Shengbo Cao,Jing Ye. Virologica Sinica. 2018(06)
[4]CT在流行性乙型腦炎診斷及預(yù)后評估中的作用[J]. 羅瀟,劉斌,胡俊,何永勝. 中國地方病防治雜志. 2018(04)
[5]畢赤酵母分泌表達(dá)JEV prME蛋白及其形成病毒樣顆粒的免疫原性鑒定[J]. 趙鵬,江雅,王經(jīng)滿,范浩杰,曹瑞兵. 生物工程學(xué)報. 2017(05)
[6]流行性乙型腦炎快速血清學(xué)診斷方法研究進(jìn)展[J]. 宋子域,吳科榜,吳麗麗,趙建國. 中國畜牧獸醫(yī). 2015(12)
[7]我國乙型腦炎病毒血清學(xué)ELISA診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 陶婭琳,周紅寧. 中國病原生物學(xué)雜志. 2012(09)
[8]清熱解毒法輔助治療重型流行性乙型腦炎169例臨床觀察[J]. 董夢久,凃晉文,劉志勇. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(中醫(yī)臨床版). 2012(04)
[9]224例流行性乙型腦炎流行特征分析[J]. 時瑩,王媛,劉梓諭,丁天兵. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2012(07)
[10]門診癡呆患者診斷率低的原因分析[J]. 山媛,屈秋民,郭峰,喬晉. 中華老年醫(yī)學(xué)雜志. 2011 (10)
本文編號:3645034
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