冠突散囊菌（Aspergillus cristatus）是散囊菌目發(fā)菌科散囊菌屬的一種真菌,是茯磚茶發(fā)酵過(guò)程中的優(yōu)勢(shì)菌種,也是形成茯磚茶獨(dú)特品質(zhì)的關(guān)鍵原因。研究表明,冠突散囊菌具有降脂減肥、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抑菌等多種功效。由于微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物復(fù)雜,且代謝產(chǎn)物的生成受生長(zhǎng)環(huán)境等諸多因素的影響,冠突散囊菌代謝產(chǎn)物中發(fā)揮作用的有效成分目前并不完全清楚。為了更好地研究冠突散囊菌的功效成分,本課題組對(duì)冠突散囊菌進(jìn)行了全基因組測(cè)序,系統(tǒng)進(jìn)行了冠突散囊菌基因組功能的研究。阿魏酸（Ferulic acid）是一種普遍存在的酚酸類物質(zhì),具有清除自由基、預(yù)防血栓形成、降血脂、抗菌消炎及預(yù)防癌癥的功效。在植物細(xì)胞壁中,阿魏酸與木聚糖、阿拉伯糖等半纖維素成分結(jié)合形成阿魏酸糖酯,無(wú)法發(fā)揮生物學(xué)活性。阿魏酸酯酶（Feruloyl esterase）是一種羧酸酯酶,可以水解植物細(xì)胞壁中阿魏酸酯鍵,釋放出游離的阿魏酸。在對(duì)冠突散囊菌基因組分析過(guò)程中,我們發(fā)現(xiàn)基因組中存在一段基因序列,與已經(jīng)報(bào)道的來(lái)源于黑曲霉的阿魏酸酯酶有73%的相似性,且含有A型阿魏酸酯酶共有的GHSLG氨基酸序列,推測(cè)這很可能是一種新的... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：92 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１基因組測(cè)序流程??Ｆｉｇ．２－１?Ｇｅｎｏｍｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ?ｐｒｏｃｅｓｓ??

２．３實(shí)驗(yàn)結(jié)果??２．３．１冠突散囊菌基因組的提取??采用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)基因組ＤＮＡ的純度，凝膠電泳結(jié)果見(jiàn)圖２－２，?ＤＮＡ??電泳條帶單一，純度符合測(cè)序要求。??Ｍ?１?２?３??＝??７５００??５°°°??Ｊ??圖２－２冠突散囊菌ＹＫＹ８０７基因組ＤＮＡ的凝膠電泳圖??Ｆｉｇ．２－２?Ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ?ｏｉＡ．Ｃｒｉｓｔａｔｕｓ?ＹＫＹ８０７??（見(jiàn)實(shí)驗(yàn)記錄０００５５８４－ｐｌｌ）??泳道Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；泳道１－３：基因組ＤＮＡ??Ｌａｎｅ?Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?Ｌａｎｅ?１－３：?Ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ??２．３．２冠突散囊菌基因組測(cè)序??將冠突散囊菌的基因組測(cè)序數(shù)據(jù)利用軟件進(jìn)行拼接，得到的結(jié)果如表２－１所??示。基因組拼裝的完整性和連續(xù)性評(píng)估結(jié)果見(jiàn)表２－２，?ＣＥＧＭＡ的檢測(cè)結(jié)果顯示??基因組拼接結(jié)果具有較好的連續(xù)性和完整性。采用ＥＶｉｄｅｎｃｅＭｏｄｅｌｅｒ?（ｖｅｒｓｉｏｎ??ｒ２０１２．０６．２５）軟件整合預(yù)測(cè)結(jié)果，基因預(yù)測(cè)結(jié)果見(jiàn)表２－３。??２１??

?７０??Ｐｏｓｉｔｉｏｎ??圖２－４信號(hào)肽序列預(yù)測(cè)??Ｆｉｇ．２－４?Ｓｉｇｎａｌ?ｐｅｐｔｉｄｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?（見(jiàn)實(shí)驗(yàn)記錄?０００５５８４－ｐ３７）??添加了阿魏酸乙酯的瓊脂平板上，含有發(fā)酵液上清的圓孔周圍產(chǎn)生了透明??圈，見(jiàn)圖２－５，表明冠突散囊菌發(fā)酵液具有阿魏酸酯酶活性。??圖２－５冠突散囊菌發(fā)酵液阿魏酸酯酶活性平板檢測(cè)結(jié)果??Ｆｉｇ．２－５?Ｐｌａｔｅ?ａｓｓａｙ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｆｅｒｕｌｏｙｌ?ｅｓｔｅｒａｓｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｂｒｏｔｈ?ｏｆ??Ａｃｒ／５加／奶（見(jiàn)實(shí)驗(yàn)記錄０００５５８４－ｐ３８）??１－４：冠突散囊菌發(fā)酵液上清；０：培養(yǎng)基??１－４：?Ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｆｅｍｉｅｎｔａｔｉｏｎ?ｂｒｏｔｈ?ｏｆ?Ａ?Ｃｒｉｓｔａｔｕｓ＼?０：?Ｃｕｌｔｕｒｅ?ｍｅｄｉｕｍ??２５??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]冠突散囊菌對(duì)茯磚茶品質(zhì)形成的影響[J]. 王亞麗,秦俊哲,黃亞亞,劉凱利.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2018(04)
[2]冠突散囊菌的研究與應(yīng)用進(jìn)展[J]. 黃彥,石瑞,蘇二正.  生物加工過(guò)程. 2017(01)
[3]阿魏酸酯酶的研究與應(yīng)用進(jìn)展[J]. 王麗,孫欽棟,王賀祥.  山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(04)
[4]冠突散囊菌產(chǎn)阿魏酸酯酶及其發(fā)酵麩皮和黑毛茶形成阿魏酸的研究[J]. 劉閆,胡茂豐,劉素純.  農(nóng)產(chǎn)品加工. 2015(08)
[5]HPLC測(cè)定不同廠家發(fā)酵型茶葉中阿魏酸含量[J]. 陳錦,胡茂豐,文欣,吳章華,劉素純.  中國(guó)釀造. 2015(04)
[6]冠突散囊菌液體發(fā)酵產(chǎn)降脂類物質(zhì)的初步研究[J]. 呂嘉櫪,鄭欣欣,馬亞寧.  陜西科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(06)
[7]黑茶發(fā)酵優(yōu)勢(shì)菌對(duì)茶多酚的生物轉(zhuǎn)化研究[J]. 黃秋桂,張靈枝,譚新東.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(19)
[8]阿魏酸酯酶A的基因克隆與表達(dá)及其水解產(chǎn)物的純化[J]. 曾妍,龔燕燕,鄔敏辰,殷欣,唐存多.  生物工程學(xué)報(bào). 2014(03)
[9]冠突散囊菌對(duì)茶葉品質(zhì)成分及其抗氧化活性影響[J]. 歐陽(yáng)梅,熊昌云,屠幼英,程龍,舒華,湯雯.  菌物學(xué)報(bào). 2011(02)
[10]阿魏酸抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 殷華芳,錢曉萍,劉寶瑞.  現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2010(32)

碩士論文
[1]斜臥青霉114-2中阿魏酸酯酶基因的表達(dá)與鑒定研究[D]. 申苗.山東大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3567512