c-Myc屬于bHLH家族轉錄因子,在人多能干細胞維持細胞自我更新中發(fā)揮著重要作用,但在人胎盤滋養(yǎng)細胞分化中的功能尚不明確。該研究采用免疫組化、免疫熒光、Western blot及qRT-PCR技術,初步證實人早孕絨毛、原代滋養(yǎng)細胞及福斯科林誘導BeWo細胞合體化前后c-Myc均高表達于細胞滋養(yǎng)細胞,并在滋養(yǎng)細胞合體化過程中表達下調。qRT-PCR檢測c-Myc網(wǎng)絡相關因子在滋養(yǎng)細胞合體化過程中的作用,發(fā)現(xiàn)細胞周期相關因子CCNA2及CDK2表達下調,CDKN2A表達上調;c-Myc調控網(wǎng)絡中滋養(yǎng)細胞干性相關因子OCT4、SOX2及hTERT在滋養(yǎng)細胞合體化過程中表達下調。研究初步發(fā)現(xiàn),c-Myc可能通過其調控網(wǎng)絡及細胞周期,影響滋養(yǎng)細胞增殖及分化平衡,從而參與滋養(yǎng)細胞合體化。 

【文章來源】：中國細胞生物學學報. 2020,42(03)CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

c-Myc在人正常早孕絨毛中的表達及在人正常原代滋養(yǎng)細胞自發(fā)合體化過程中的改變

圖1 c-Myc在人正常早孕絨毛中的表達及在人正常原代滋養(yǎng)細胞自發(fā)合體化過程中的改變本研究在人早孕絨毛、原代滋養(yǎng)細胞自發(fā)合體化及BeWo細胞誘導合體化模型中證實了c-Myc主要表達于CTB細胞, 在STB細胞中呈現(xiàn)低表達; STB屬于終末分化細胞, 退出了正常細胞周期而無法增殖, 這提示了, c-Myc可能參與調控滋養(yǎng)細胞的細胞周期進而參與滋養(yǎng)細胞合體化過程。我們通過構建PPI網(wǎng)絡發(fā)現(xiàn), c-Myc互作蛋白主要涉及周期相關因子, 并在BeWo誘導合體化過程中發(fā)現(xiàn), CDKN2A表達上調、CDK2和CCNA2表達下調。現(xiàn)已知CCNA2作為調控細胞周期G1/S和G2/M過渡階段的蛋白, 需與CDK2形成特定的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶復合物而發(fā)揮作用[26]; 抑制CCNA2/CDK2復合物活性, 可誘導細胞周期發(fā)生阻滯[27]; CDKN2A能夠在抑制CDK4和CDK6的磷酸化水平誘導細胞周期G1期阻滯[28]。我們的結果提示, c-Myc作為轉錄因子在STB中表達下調可能介導細胞周期相關因子表達改變, 促進CTB退出細胞周期參與調控滋養(yǎng)細胞的合體化。

本研究在人早孕絨毛、原代滋養(yǎng)細胞自發(fā)合體化及BeWo細胞誘導合體化模型中證實了c-Myc主要表達于CTB細胞, 在STB細胞中呈現(xiàn)低表達; STB屬于終末分化細胞, 退出了正常細胞周期而無法增殖, 這提示了, c-Myc可能參與調控滋養(yǎng)細胞的細胞周期進而參與滋養(yǎng)細胞合體化過程。我們通過構建PPI網(wǎng)絡發(fā)現(xiàn), c-Myc互作蛋白主要涉及周期相關因子, 并在BeWo誘導合體化過程中發(fā)現(xiàn), CDKN2A表達上調、CDK2和CCNA2表達下調。現(xiàn)已知CCNA2作為調控細胞周期G1/S和G2/M過渡階段的蛋白, 需與CDK2形成特定的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶復合物而發(fā)揮作用[26]; 抑制CCNA2/CDK2復合物活性, 可誘導細胞周期發(fā)生阻滯[27]; CDKN2A能夠在抑制CDK4和CDK6的磷酸化水平誘導細胞周期G1期阻滯[28]。我們的結果提示, c-Myc作為轉錄因子在STB中表達下調可能介導細胞周期相關因子表達改變, 促進CTB退出細胞周期參與調控滋養(yǎng)細胞的合體化。圖4 qRT-PCR驗證滋養(yǎng)細胞干性基因及相關融合基因在BeWo細胞合體化中的水平


本文編號：3447299