中間錦雞兒CiCPK32基因的克隆與功能分析
發(fā)布時(shí)間:2021-09-27 21:21
鈣依賴型蛋白激酶(Calcium dependent proteinkinase,CDPK/CPK),廣泛存在于植物和原生生物中,作為Ca2+的受體蛋白和效應(yīng)蛋白在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用。并且,CPKs在植物正常生長(zhǎng)和抵抗逆境過(guò)程中具有重要作用。中間錦雞兒(Caragana intermedia),具有耐旱、耐寒、耐高溫、耐鹽堿特點(diǎn),是我國(guó)北方荒漠化地區(qū)的優(yōu)良造林樹種。本研究以中間錦雞兒為材料,通過(guò)RACE技術(shù)克隆到一個(gè)CiCPK32基因,并對(duì)其在不同脅迫響應(yīng)中所發(fā)揮的功能做了初步的研究,結(jié)果如下:1.CiCPK32基因cDNA長(zhǎng)2074bp,開放閱讀框長(zhǎng)1566bp,編碼521個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)的蛋白的分子量為58.91kD。經(jīng)氨基酸序列比對(duì)與系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示,該蛋白與擬南芥CPK32(AT3G53040)一致性達(dá)77%,因此將其命名為CiCPK32。2.通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PC R對(duì)CiCPK32基因在不同逆境脅迫下表達(dá)量進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果顯示該基因受干旱、ABA、高鹽等處理的誘導(dǎo),推測(cè)該基因可能與中間錦雞兒響應(yīng)逆境脅迫機(jī)制有關(guān)。3.構(gòu)建了過(guò)表達(dá)載體p35S::CiCPK32-HA,并...
【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
ePK結(jié)構(gòu)圖腳f夠11七.盆1和以坦
干旱脅迫下,擬南芥中acpk/d/cd/^/通過(guò)與熱休克蛋白hs參與ABA和鈣離子介導(dǎo)的氣孔運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié),從而提高植物的抗旱性[66],表現(xiàn)出較高的抗鹽和抗旱性,并且在兩種脅迫下,轉(zhuǎn)基因植物比野多的脯氨酸[?。通過(guò)對(duì)水稻研宄發(fā)現(xiàn),該基因可以通過(guò)增加脯糖的含量以及改善干旱脅迫下氣孔的開度,從而提高植物的保水性能和.?2?ABA??落酸(Abscisic?acid,ABA)被認(rèn)為是一種關(guān)鍵植物激素,調(diào)節(jié)植物的[68?69]。ABA是在60年代時(shí)被分離和鑒定出來(lái),最初人們對(duì)它的認(rèn)識(shí)是劑,經(jīng)過(guò)后人們大量的研宄發(fā)現(xiàn)ABA參與植物胚胎發(fā)育、種子休眠、逆境脅迫等多個(gè)方面to7°]。??使用ABA處理植物時(shí),從刺激到做出準(zhǔn)確反應(yīng)這一過(guò)程分為5個(gè)階段:、細(xì)胞間信號(hào)傳遞、膜上信號(hào)轉(zhuǎn)換,細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及蛋白質(zhì)可逆磷酸A信號(hào)的細(xì)胞識(shí)別、以第二信使為中心的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)換和以蛋白磷酸化
6?中間錦雞兒C/g/光及基因的克隆與功能分析或者是外源ABA含量增加時(shí),ABA受體蛋白和ABA結(jié)合,形ABA-PYR/PYL/RCAR復(fù)合體,然后與A類PP2C結(jié)合并抑制其激酶活性,從致SnRK2激酶活性被激活,磷酸化下游轉(zhuǎn)錄因子ABF/AREB或離子通道,從節(jié)ABA應(yīng)答基因的表達(dá),調(diào)控機(jī)體做出相應(yīng)的反應(yīng)?。??Osmotic?stress??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中間錦雞兒CiPUB22基因克隆與功能分析[J]. 岳文冉,于秀敏,岳俊燕,楊杞,韓曉東,王瑞剛,李國(guó)婧. 西北植物學(xué)報(bào). 2018(11)
[2]植物中鈣依賴蛋白激酶(CDPK)的研究進(jìn)展[J]. 武志剛,武舒佳,王迎春,鄭琳琳. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2018(01)
[3]馬鈴薯CDPKs家族基因的全基因組鑒定和分析[J]. 龔記熠,何小紅,乙引,李菲. 分子植物育種. 2017(11)
[4]苜蓿鈣依賴蛋白激酶家族的生物信息學(xué)分析[J]. 龔記熠,張宇斌,李菲,何小紅,張習(xí)敏,乙引. 分子植物育種. 2017(09)
[5]植物CDPKs響應(yīng)逆境脅迫信號(hào)傳導(dǎo)作用研究進(jìn)展[J]. 韋淑亞. 化工設(shè)計(jì)通訊. 2017(01)
[6]鈣結(jié)合蛋白對(duì)花粉生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 于曉俊,曹紹玉,董玉梅,畢保良,張應(yīng)華,許俊強(qiáng). 西北植物學(xué)報(bào). 2016(10)
[7]ABA信號(hào)通路的起源與進(jìn)化[J]. 劉維仲,李林艷,胡勇. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2016(08)
[8]花生AhCDPK32基因克隆及表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 張青云,孫全喜,唐月異,王秀貞,吳琪,王云云,曹廣英,祁雪,王傳堂. 分子植物育種. 2016(05)
[9]谷子逆境應(yīng)答相關(guān)的鈣依賴蛋白激酶基因SiCDPK1的克隆與表達(dá)[J]. 余琴鴦,尹恒,安利佳,李文利. 作物學(xué)報(bào). 2014(09)
[10]油菜鈣依賴蛋白激酶BnCDPK1的克隆和表達(dá)分析[J]. 張秋平,文李,王峰,廖志強(qiáng),李慧,劉睿洋,官春云. 植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2014(06)
博士論文
[1]檸條錦雞兒LEA基因家族成員的鑒定與功能分析[D]. 于秀敏.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]葡萄KFC基因家族成員CDPK和PPCK的起源、進(jìn)化和功能分析[D]. 陳飛.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]中間錦雞兒3個(gè)非生物脅迫相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的克隆與功能分析[D]. 韓曉敏.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]玉米ZmCPK11在ABA誘導(dǎo)的抗氧化防護(hù)中的功能分析[D]. 丁艷芬.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]草莓鈣依賴蛋白激酶基因FvCDPK1克隆、表達(dá)及功能分析[D]. 馮嘉玥.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[6]蘋果鈣依賴蛋白激酶MdCPK1:分子克隆、表達(dá)、定位及被脫落酸的激活[D]. 鄒克琴.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
碩士論文
[1]超表達(dá)中間錦雞兒CiHARBI1基因影響轉(zhuǎn)基因擬南芥子葉形態(tài)建成[D]. 劉建政.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]中間錦雞兒3個(gè)DUF基因的生物信息學(xué)分析和CiDUF966-1基因功能分析[D]. 楊天瑞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[3]普通小麥鈣依賴蛋白激酶基因TaCDPK1的抗旱功能研究[D]. 趙婉瑩.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[4]甜瓜CDPK和CRK基因家族的鑒定及表達(dá)分析[D]. 張海斐.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[5]鹽堿脅迫對(duì)轉(zhuǎn)Lc-CDPK基因水稻生理生化特性的影響[D]. 費(fèi)小鈺.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[6]花生種用抗逆性及相關(guān)基因的研究[D]. 張青云.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[7]兩種不同生境植物CDPK1基因的克隆及功能初探[D]. 田曉涵.石河子大學(xué) 2016
[8]玉米CDPK基因家族的克隆、表達(dá)分析及ZmCPK12功能初探[D]. 張毓露.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[9]組成型和可誘導(dǎo)型啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的AtCDPK1過(guò)表達(dá)增強(qiáng)擬南芥對(duì)干旱和鹽脅迫的抗性[D]. 劉貞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[10]檸條錦雞兒咖啡酰輔酶A-O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因cDNA和gDNA全長(zhǎng)克隆及生物信息學(xué)分析[D]. 張燁.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號(hào):3410636
【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
ePK結(jié)構(gòu)圖腳f夠11七.盆1和以坦
干旱脅迫下,擬南芥中acpk/d/cd/^/通過(guò)與熱休克蛋白hs參與ABA和鈣離子介導(dǎo)的氣孔運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié),從而提高植物的抗旱性[66],表現(xiàn)出較高的抗鹽和抗旱性,并且在兩種脅迫下,轉(zhuǎn)基因植物比野多的脯氨酸[?。通過(guò)對(duì)水稻研宄發(fā)現(xiàn),該基因可以通過(guò)增加脯糖的含量以及改善干旱脅迫下氣孔的開度,從而提高植物的保水性能和.?2?ABA??落酸(Abscisic?acid,ABA)被認(rèn)為是一種關(guān)鍵植物激素,調(diào)節(jié)植物的[68?69]。ABA是在60年代時(shí)被分離和鑒定出來(lái),最初人們對(duì)它的認(rèn)識(shí)是劑,經(jīng)過(guò)后人們大量的研宄發(fā)現(xiàn)ABA參與植物胚胎發(fā)育、種子休眠、逆境脅迫等多個(gè)方面to7°]。??使用ABA處理植物時(shí),從刺激到做出準(zhǔn)確反應(yīng)這一過(guò)程分為5個(gè)階段:、細(xì)胞間信號(hào)傳遞、膜上信號(hào)轉(zhuǎn)換,細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及蛋白質(zhì)可逆磷酸A信號(hào)的細(xì)胞識(shí)別、以第二信使為中心的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)換和以蛋白磷酸化
6?中間錦雞兒C/g/光及基因的克隆與功能分析或者是外源ABA含量增加時(shí),ABA受體蛋白和ABA結(jié)合,形ABA-PYR/PYL/RCAR復(fù)合體,然后與A類PP2C結(jié)合并抑制其激酶活性,從致SnRK2激酶活性被激活,磷酸化下游轉(zhuǎn)錄因子ABF/AREB或離子通道,從節(jié)ABA應(yīng)答基因的表達(dá),調(diào)控機(jī)體做出相應(yīng)的反應(yīng)?。??Osmotic?stress??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中間錦雞兒CiPUB22基因克隆與功能分析[J]. 岳文冉,于秀敏,岳俊燕,楊杞,韓曉東,王瑞剛,李國(guó)婧. 西北植物學(xué)報(bào). 2018(11)
[2]植物中鈣依賴蛋白激酶(CDPK)的研究進(jìn)展[J]. 武志剛,武舒佳,王迎春,鄭琳琳. 草業(yè)學(xué)報(bào). 2018(01)
[3]馬鈴薯CDPKs家族基因的全基因組鑒定和分析[J]. 龔記熠,何小紅,乙引,李菲. 分子植物育種. 2017(11)
[4]苜蓿鈣依賴蛋白激酶家族的生物信息學(xué)分析[J]. 龔記熠,張宇斌,李菲,何小紅,張習(xí)敏,乙引. 分子植物育種. 2017(09)
[5]植物CDPKs響應(yīng)逆境脅迫信號(hào)傳導(dǎo)作用研究進(jìn)展[J]. 韋淑亞. 化工設(shè)計(jì)通訊. 2017(01)
[6]鈣結(jié)合蛋白對(duì)花粉生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 于曉俊,曹紹玉,董玉梅,畢保良,張應(yīng)華,許俊強(qiáng). 西北植物學(xué)報(bào). 2016(10)
[7]ABA信號(hào)通路的起源與進(jìn)化[J]. 劉維仲,李林艷,胡勇. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2016(08)
[8]花生AhCDPK32基因克隆及表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 張青云,孫全喜,唐月異,王秀貞,吳琪,王云云,曹廣英,祁雪,王傳堂. 分子植物育種. 2016(05)
[9]谷子逆境應(yīng)答相關(guān)的鈣依賴蛋白激酶基因SiCDPK1的克隆與表達(dá)[J]. 余琴鴦,尹恒,安利佳,李文利. 作物學(xué)報(bào). 2014(09)
[10]油菜鈣依賴蛋白激酶BnCDPK1的克隆和表達(dá)分析[J]. 張秋平,文李,王峰,廖志強(qiáng),李慧,劉睿洋,官春云. 植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2014(06)
博士論文
[1]檸條錦雞兒LEA基因家族成員的鑒定與功能分析[D]. 于秀敏.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]葡萄KFC基因家族成員CDPK和PPCK的起源、進(jìn)化和功能分析[D]. 陳飛.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]中間錦雞兒3個(gè)非生物脅迫相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的克隆與功能分析[D]. 韓曉敏.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]玉米ZmCPK11在ABA誘導(dǎo)的抗氧化防護(hù)中的功能分析[D]. 丁艷芬.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]草莓鈣依賴蛋白激酶基因FvCDPK1克隆、表達(dá)及功能分析[D]. 馮嘉玥.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[6]蘋果鈣依賴蛋白激酶MdCPK1:分子克隆、表達(dá)、定位及被脫落酸的激活[D]. 鄒克琴.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
碩士論文
[1]超表達(dá)中間錦雞兒CiHARBI1基因影響轉(zhuǎn)基因擬南芥子葉形態(tài)建成[D]. 劉建政.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]中間錦雞兒3個(gè)DUF基因的生物信息學(xué)分析和CiDUF966-1基因功能分析[D]. 楊天瑞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[3]普通小麥鈣依賴蛋白激酶基因TaCDPK1的抗旱功能研究[D]. 趙婉瑩.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[4]甜瓜CDPK和CRK基因家族的鑒定及表達(dá)分析[D]. 張海斐.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[5]鹽堿脅迫對(duì)轉(zhuǎn)Lc-CDPK基因水稻生理生化特性的影響[D]. 費(fèi)小鈺.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[6]花生種用抗逆性及相關(guān)基因的研究[D]. 張青云.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[7]兩種不同生境植物CDPK1基因的克隆及功能初探[D]. 田曉涵.石河子大學(xué) 2016
[8]玉米CDPK基因家族的克隆、表達(dá)分析及ZmCPK12功能初探[D]. 張毓露.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[9]組成型和可誘導(dǎo)型啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的AtCDPK1過(guò)表達(dá)增強(qiáng)擬南芥對(duì)干旱和鹽脅迫的抗性[D]. 劉貞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[10]檸條錦雞兒咖啡酰輔酶A-O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因cDNA和gDNA全長(zhǎng)克隆及生物信息學(xué)分析[D]. 張燁.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號(hào):3410636
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