等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)因其對(duì)儀器依賴(lài)性低、核酸擴(kuò)增高效等優(yōu)勢(shì),非常適合于快速檢測(cè),已在微生物快速檢測(cè)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。本文從核酸提取、等溫?cái)U(kuò)增（以環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP）和重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（Recombinase polymerase amplification,RPA）為例）和產(chǎn)物檢測(cè)角度,就近年來(lái)核酸等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的發(fā)展及其在病原微生物核酸快速檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)行綜述,并概述了核酸等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)與CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）基因編輯技術(shù)相結(jié)合的最新研究成果,為這些新興技術(shù)的研究和未來(lái)的發(fā)展提供新思路。 

【文章來(lái)源】：生物技術(shù)通報(bào). 2020,36(05)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

CRISPR與RPA結(jié)合[76,78-79]

紙質(zhì)材料作為最便宜的基質(zhì),具有輕、薄、靈活、便于儲(chǔ)存、環(huán)保的特點(diǎn),其白色的表面非常適用于比色檢測(cè)。而且紙能夠利用毛細(xì)作用推動(dòng)液體流動(dòng),省去了對(duì)泵的需求。因此,紙質(zhì)材料是目前低廉核酸等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)設(shè)備的最理想材料。側(cè)向流層析試紙條(LFD)是紙基檢測(cè)設(shè)備中深受歡迎、應(yīng)用頻繁的一種核酸擴(kuò)增產(chǎn)物分析工具[83],非常適用于未經(jīng)專(zhuān)業(yè)訓(xùn)練的操作者使用,而且具有至少一年的保存期,這些優(yōu)點(diǎn)推動(dòng)了LFD的商業(yè)化發(fā)展。但是直接使用試紙條檢測(cè)存在靈敏度不足的問(wèn)題。解決這個(gè)難題的一種途徑是將紙基材料與其他工具結(jié)合起來(lái),實(shí)現(xiàn)相得益彰的效果。事實(shí)上,這一方面的研究已取得進(jìn)展,比如聯(lián)合量子點(diǎn)技術(shù)檢測(cè)妊娠測(cè)試中的人絨毛膜促性腺激素[85],聯(lián)合生物傳感器檢測(cè)獸藥殘留[86],以及聯(lián)合等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)致病菌[77,87-89]等。這些LFD主要采用的是膠體金作為標(biāo)記物,借助核酸等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速、便攜等優(yōu)勢(shì),核酸等溫?cái)U(kuò)增-LFD技術(shù)在病原微生物的檢測(cè)方面得到了快速發(fā)展,涉及醫(yī)療診斷、藥物測(cè)試以及食品質(zhì)量監(jiān)督等多個(gè)領(lǐng)域。由此可見(jiàn),核酸等溫?cái)U(kuò)增-LFD技術(shù)的創(chuàng)新開(kāi)發(fā)與研究將仍是未來(lái)快速檢測(cè)研究的熱點(diǎn)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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