為了分析ERBS與其目標(biāo)寡核苷酸的相互作用,研究設(shè)計(jì)合成了對(duì)應(yīng)目標(biāo)寡核苷酸的ERBS基因,并進(jìn)行了蛋白的原核表達(dá)、純化以及其與目標(biāo)寡核苷酸的相互作用分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),ERBS在Escherichia coli BL21（DE3）中表達(dá)時(shí)呈現(xiàn)包涵體狀態(tài),而改變宿主細(xì)胞為Escherichia coli Rosetta（DE3）,可極大提高其可溶性表達(dá)水平;純化的ERBS與FAM標(biāo)記的寡核苷酸互作分析發(fā)現(xiàn),其解離常數(shù)為（9.76±0.62）nmol/L。試驗(yàn)結(jié)果可為深入研究不同ERBS與其目標(biāo)寡核苷酸的相互作用奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(02)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 構(gòu)建載體所需引物
    1.3 合成寡核苷酸鏈
    1.4 方法
        1.4.1 pET-24a-ERBS表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.4.2 BL21(DE3）中ERBS蛋白的表達(dá)
        1.4.3 Rosetta(DE3）中ERBS蛋白的表達(dá)
        1.4.4 光譜分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 ERBS的基因序列（5'-3'）及其對(duì)應(yīng)的氨基酸序列
    2.2 ERBS片段的獲得
    2.3 蛋白純化結(jié)果
        2.3.1 BL21(DE3）中ERBS蛋白的表達(dá)結(jié)果
        2.3.2 Rosetta(DE3）中ERBS蛋白的表達(dá)結(jié)果
    2.4 ERBS蛋白與寡核苷酸鏈的相互作用
3 結(jié)論與討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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