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MicroRNA-26b抑制小鼠胚胎干細胞多能性并促進中內(nèi)胚層分化

發(fā)布時間:2021-05-18 08:41
  目的研究miR-26b對小鼠胚胎干細胞(mouse embryonic stem cells,m ESCs)多能性及其分化的調(diào)控作用。方法1.實時熒光定量PCR檢測miR-26簇前體在m ESCs和小鼠胚胎成纖維細胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)中的表達。2.實時熒光定量PCR檢測胚狀體(embryoid body,EB)形成過程中成熟miR-26b的表達,并且比較miR-26b在m ESCs與MEF中的表達。3.CCK-8方法檢測miR-26b對m ESCs增殖能力的影響。4.流式細胞術測定miR-26b對m ESCs細胞周期與凋亡的影響。5.使用堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色試劑盒檢測miR-26b對m ESCs中堿性磷酸酶活性的影響。6.實時熒光定量PCR檢測miR-26b對m ESCs中多能性轉(zhuǎn)錄因子(Oct4、Sox2和Nanog)m RNA表達的影響。7.使用蛋白質(zhì)印跡法(Western blot,WB)檢測miR-26b對m ESCs中三個關鍵轉(zhuǎn)錄因子的蛋白表達影響。8.用體外模型觀察轉(zhuǎn)染pc DNA... 

【文章來源】:安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】:76 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中英文縮略詞
中文摘要
英文摘要
1 引言
2 材料與方法
    2.1 材料
    2.2 方法
3 結(jié)果
    3.1 小鼠胚胎干細胞中miR-26簇的內(nèi)源性表達
    3.2 miR-26b對小鼠胚胎干細胞增殖能力的調(diào)控作用
    3.3 miR-26b對小鼠胚胎干細胞自我更新的作用
    3.4 miR-26b促進小鼠胚胎干細胞中內(nèi)胚層分化
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
綜述 MicroRNA-26 家族在心血管疾病中的研究
    參考文獻



本文編號:3193499

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