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MicroRNA-26b抑制小鼠胚胎干細(xì)胞多能性并促進(jìn)中內(nèi)胚層分化

發(fā)布時(shí)間:2021-05-18 08:41
  目的研究miR-26b對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞(mouse embryonic stem cells,m ESCs)多能性及其分化的調(diào)控作用。方法1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)miR-26簇前體在m ESCs和小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)中的表達(dá)。2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)胚狀體(embryoid body,EB)形成過(guò)程中成熟miR-26b的表達(dá),并且比較miR-26b在m ESCs與MEF中的表達(dá)。3.CCK-8方法檢測(cè)miR-26b對(duì)m ESCs增殖能力的影響。4.流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定miR-26b對(duì)m ESCs細(xì)胞周期與凋亡的影響。5.使用堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色試劑盒檢測(cè)miR-26b對(duì)m ESCs中堿性磷酸酶活性的影響。6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)miR-26b對(duì)m ESCs中多能性轉(zhuǎn)錄因子(Oct4、Sox2和Nanog)m RNA表達(dá)的影響。7.使用蛋白質(zhì)印跡法(Western blot,WB)檢測(cè)miR-26b對(duì)m ESCs中三個(gè)關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的蛋白表達(dá)影響。8.用體外模型觀察轉(zhuǎn)染pc DNA... 

【文章來(lái)源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中英文縮略詞
中文摘要
英文摘要
1 引言
2 材料與方法
    2.1 材料
    2.2 方法
3 結(jié)果
    3.1 小鼠胚胎干細(xì)胞中miR-26簇的內(nèi)源性表達(dá)
    3.2 miR-26b對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞增殖能力的調(diào)控作用
    3.3 miR-26b對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞自我更新的作用
    3.4 miR-26b促進(jìn)小鼠胚胎干細(xì)胞中內(nèi)胚層分化
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 MicroRNA-26 家族在心血管疾病中的研究
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào):3193499

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