植物乳桿菌NCU116胞外多糖抗腫瘤及調(diào)節(jié)腸道屏障功能機制的初探
發(fā)布時間:2021-05-18 07:34
乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一類可以發(fā)酵葡萄糖以產(chǎn)生大量乳酸的細(xì)菌的總稱。它廣泛分布于整個自然界,也是人體腸道中常見的菌群,與人類健康密切相關(guān)。大量研究表明,乳酸菌及其次生代謝產(chǎn)物胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)在抗腫瘤、調(diào)節(jié)機體免疫和優(yōu)化腸道微生態(tài)環(huán)境中發(fā)揮重要作用。然而抗腫瘤以及調(diào)節(jié)腸道上皮屏障功能的具體分子機制、詳細(xì)的信號通路方面卻研究甚少,因此,本論文以本實驗室發(fā)現(xiàn)的植物乳桿菌NCU116的胞外多糖(EPS116)為材料,探討其抗腫瘤與調(diào)節(jié)腸道屏障功能的作用及其分子機制,從而為其開發(fā)為一種新型健康食品提供一定的理論基礎(chǔ)。本論文主要研究內(nèi)容與結(jié)果總結(jié)如下:1、我們分離得到了植物乳桿菌NCU116的胞外多糖(EPS116)并研究了其組成與屬性。采用溶劑分級沉淀的方法分離獲得EPS116,采用紫外光譜分析發(fā)現(xiàn)EPS116是由多糖和蛋白組成的蛋白多糖,離子色譜分析顯示多糖部分主要由5種單糖組成,包括甘露糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖胺和半乳糖胺。2、使用不同種類的癌細(xì)胞株評估了EPS116抗癌能力并探討其潛在的分子機制。細(xì)胞增殖與細(xì)...
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:105 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
第1章 引言
1.1 概述
1.2 本論文的研究目的、意義及研究內(nèi)容
1.2.1 研究目的和意義
1.2.2 研究內(nèi)容
1.2.3 本項目的特色與創(chuàng)新之處
第2章 植物乳桿菌NCU116胞外多糖的化學(xué)組成
2.1 引言
2.2 實驗部分
2.2.1 實驗材料
2.2.2 儀器設(shè)備
2.2.3 實驗方法
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 多糖得率及表觀性狀
2.3.2 理化性質(zhì)測定
2.3.3 植物乳桿菌NCU116胞外多糖的紫外光譜
2.3.4 植物乳桿菌NCU116胞外多糖的紅外光譜
2.3.5 EPS116分子量分布及均一性分析
2.3.6 單糖組成和糖醛酸組成分析
2.3.7 氨基酸組成
2.4 本章小結(jié)
第3章 EPS116誘導(dǎo)小鼠結(jié)直腸癌細(xì)胞CT26凋亡的機制
3.1 前言
3.2 實驗部分
3.2.1 實驗材料
3.2.2 儀器設(shè)備
3.2.3 實驗方法
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 EPS116對結(jié)腸癌細(xì)胞CT26生長的影響
3.3.2 EPS116誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞CT26的凋亡
3.3.3 EPS116通過死亡受體Fas及其配體FasL誘導(dǎo)CT26細(xì)胞凋亡
3.3.4 EPS116誘導(dǎo)Caspase-3或Caspase-8的水解和活化
3.3.5 EPS116上調(diào)ROCK1和PARP2的表達(dá),并誘導(dǎo)PARP1的裂解·
3.3.6 EPS116誘導(dǎo)CT26細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子c-Jun的表達(dá)及活化
3.3.7 EPS116上調(diào)了CT26細(xì)胞表面受體TLR2基因的表達(dá)
3.3.8 EPS116通過TLR2誘導(dǎo)CT26細(xì)胞凋亡
3.3.9 TLR1促進(jìn)TLR2調(diào)節(jié)EPS116誘導(dǎo)的CT26細(xì)胞凋亡
3.3.10 TLR2的表達(dá)僅在CT26細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)
3.3.11 分析與TLR2相互作用的蛋白
3.4 本章小結(jié)
第4章 EPS116調(diào)節(jié)結(jié)腸腸道屏障功能分子機制的研究
4.1 前言
4.2 實驗部分
4.2.1 實驗材料
4.2.2 儀器設(shè)備
4.2.3 實驗方法
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 EPS116緩解DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎
4.3.2 EPS116改善了DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎小鼠的腸道通透性
4.3.3 EPS116上調(diào)了結(jié)腸中緊密連接蛋白的表達(dá)
4.3.4 EPS116下調(diào)了結(jié)腸炎模型小鼠血清中促炎細(xì)胞因子的水平
4.3.5 EPS116促進(jìn)腸道上皮屏障功能及緊密連接蛋白的表達(dá)
4.3.6 EPS116促進(jìn)Caco-2細(xì)胞中STAT3的表達(dá)和活化
4.3.7 EPS116誘導(dǎo)STAT3與Caco-2細(xì)胞TJ基因啟動子的結(jié)合
4.3.8 EPS116通過STAT3調(diào)節(jié)腸道功能
4.4 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 進(jìn)一步工作的方向
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 A
攻讀學(xué)位期間的研究成果
本文編號:3193408
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:105 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
第1章 引言
1.1 概述
1.2 本論文的研究目的、意義及研究內(nèi)容
1.2.1 研究目的和意義
1.2.2 研究內(nèi)容
1.2.3 本項目的特色與創(chuàng)新之處
第2章 植物乳桿菌NCU116胞外多糖的化學(xué)組成
2.1 引言
2.2 實驗部分
2.2.1 實驗材料
2.2.2 儀器設(shè)備
2.2.3 實驗方法
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 多糖得率及表觀性狀
2.3.2 理化性質(zhì)測定
2.3.3 植物乳桿菌NCU116胞外多糖的紫外光譜
2.3.4 植物乳桿菌NCU116胞外多糖的紅外光譜
2.3.5 EPS116分子量分布及均一性分析
2.3.6 單糖組成和糖醛酸組成分析
2.3.7 氨基酸組成
2.4 本章小結(jié)
第3章 EPS116誘導(dǎo)小鼠結(jié)直腸癌細(xì)胞CT26凋亡的機制
3.1 前言
3.2 實驗部分
3.2.1 實驗材料
3.2.2 儀器設(shè)備
3.2.3 實驗方法
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 EPS116對結(jié)腸癌細(xì)胞CT26生長的影響
3.3.2 EPS116誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞CT26的凋亡
3.3.3 EPS116通過死亡受體Fas及其配體FasL誘導(dǎo)CT26細(xì)胞凋亡
3.3.4 EPS116誘導(dǎo)Caspase-3或Caspase-8的水解和活化
3.3.5 EPS116上調(diào)ROCK1和PARP2的表達(dá),并誘導(dǎo)PARP1的裂解·
3.3.6 EPS116誘導(dǎo)CT26細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子c-Jun的表達(dá)及活化
3.3.7 EPS116上調(diào)了CT26細(xì)胞表面受體TLR2基因的表達(dá)
3.3.8 EPS116通過TLR2誘導(dǎo)CT26細(xì)胞凋亡
3.3.9 TLR1促進(jìn)TLR2調(diào)節(jié)EPS116誘導(dǎo)的CT26細(xì)胞凋亡
3.3.10 TLR2的表達(dá)僅在CT26細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)
3.3.11 分析與TLR2相互作用的蛋白
3.4 本章小結(jié)
第4章 EPS116調(diào)節(jié)結(jié)腸腸道屏障功能分子機制的研究
4.1 前言
4.2 實驗部分
4.2.1 實驗材料
4.2.2 儀器設(shè)備
4.2.3 實驗方法
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 EPS116緩解DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎
4.3.2 EPS116改善了DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎小鼠的腸道通透性
4.3.3 EPS116上調(diào)了結(jié)腸中緊密連接蛋白的表達(dá)
4.3.4 EPS116下調(diào)了結(jié)腸炎模型小鼠血清中促炎細(xì)胞因子的水平
4.3.5 EPS116促進(jìn)腸道上皮屏障功能及緊密連接蛋白的表達(dá)
4.3.6 EPS116促進(jìn)Caco-2細(xì)胞中STAT3的表達(dá)和活化
4.3.7 EPS116誘導(dǎo)STAT3與Caco-2細(xì)胞TJ基因啟動子的結(jié)合
4.3.8 EPS116通過STAT3調(diào)節(jié)腸道功能
4.4 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 進(jìn)一步工作的方向
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 A
攻讀學(xué)位期間的研究成果
本文編號:3193408
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