發(fā)布時(shí)間：2021-04-27 12:29

　　氨基葡萄糖（Glucosamine,GlcN）具有豐富的生物活性,在醫(yī)藥和食品等多個(gè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。目前GlcN的生產(chǎn)方法有酸水解法、微生物發(fā)酵法和生物催化法。傳統(tǒng)的甲殼素酸水解法是GlcN工業(yè)化生產(chǎn)的主要途徑,但該方法在原料來(lái)源、環(huán)境保護(hù)以及產(chǎn)品安全等方面存在不足。通過微生物發(fā)酵法制備N-乙酰氨基葡萄糖（N-Acetyl-D-Glucosamine,GlcNAc）,進(jìn)一步脫乙�；@得GlcN近年來(lái)已逐漸成為GlcN規(guī)模化生物制造的主要途徑,然而該方法仍需要再將GlcNAc水解脫乙�；蒅lcN,過程消耗大量濃酸,極易造成設(shè)備腐蝕,且嚴(yán)重污染環(huán)境。針對(duì)上述問題,本研究旨在發(fā)掘高效的N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶,探索GlcNAc的酶法脫乙酰途徑,從而取代目前的酸水解脫乙酰法,為實(shí)現(xiàn)GlcN的全鏈條綠色生物制造提供基礎(chǔ)。首先,利用生物信息學(xué)手段從數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選得到了 6個(gè)不同來(lái)源（Thermococcus kodakarensis、Thermococcusprofundus、Thermococcus siculi、Thermococcus sp.2319x1、Thermococcus ce... 

【文章來(lái)源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 研究背景與意義
    1.2 國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展
        1.2.1 氨基葡萄糖及其生理活性
        1.2.2 氨基葡萄糖的應(yīng)用
        1.2.3 氨基葡萄糖的制備方法
        1.2.4 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶概述
    1.3 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
        1.3.1 研究目的
        1.3.2 研究?jī)?nèi)容
        1.3.3 技術(shù)路線
第2章 不同來(lái)源N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶的克隆表達(dá)及純化
    2.1 引言
    2.2 材料和儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因的篩選、合成
        2.3.2 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.3.3 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶在大腸桿菌中的表達(dá)、純化
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因的篩選、合成
        2.4.2 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.4.3 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶在大腸桿菌中的表達(dá)、純化
    2.5 本章小結(jié)
第3章 不同來(lái)源N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶的酶學(xué)性質(zhì)表征
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶酶活力的測(cè)定
        3.3.2 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶最適溫度的測(cè)定
        3.3.3 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶溫度穩(wěn)定性的測(cè)定
        3.3.4 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶最適pH的測(cè)定
        3.3.5 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶pH穩(wěn)定性的測(cè)定
        3.3.6 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)的測(cè)定
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶活性的測(cè)定
        3.4.2 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶最適溫度的測(cè)定
        3.4.3 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶溫度穩(wěn)定性的測(cè)定
        3.4.4 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶最適pH的測(cè)定
        3.4.5 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶pH穩(wěn)定性的測(cè)定
        3.4.6 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶比酶活的測(cè)定
        3.4.7 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)的測(cè)定
    3.5 本章小結(jié)
第4章 酶解工藝條件優(yōu)化
    4.1 引言
    4.2 儀器與方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 反應(yīng)時(shí)間對(duì)產(chǎn)率的影響
        4.3.2 底物濃度對(duì)產(chǎn)率的影響
        4.3.3 反應(yīng)溫度對(duì)產(chǎn)率的影響
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 反應(yīng)時(shí)間對(duì)產(chǎn)率的影響
        4.4.2 底物濃度對(duì)產(chǎn)率的影響
        4.4.3 反應(yīng)溫度對(duì)產(chǎn)率的影響
    4.5 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士論文及專利發(fā)表情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]口服氨基葡萄糖硫酸軟骨素結(jié)合個(gè)性化康復(fù)訓(xùn)練指導(dǎo)對(duì)絕經(jīng)后女性骨關(guān)節(jié)損傷的作用分析[J]. 張嵐,沈巍,柴澄,華飛.  中國(guó)婦幼保健. 2020(08)
[2]鹽酸氨基葡萄糖聯(lián)合透明質(zhì)酸鈉治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的效果探究[J]. 高文杰.  甘肅科技. 2020(06)
[3]玻璃酸鈉聯(lián)合硫酸氨基葡萄糖治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的效果觀察[J]. 楊龍震.  臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志. 2020(20)
[4]鹽酸氨基葡萄糖聯(lián)合塞來(lái)昔布對(duì)踝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)鏡術(shù)后患者的臨床療效[J]. 宛佳勇.  黑龍江醫(yī)藥. 2019(06)
[5]髕骨內(nèi)推聯(lián)合玻璃酸鈉、鹽酸氨基葡萄糖治療髕股關(guān)節(jié)炎的臨床觀察[J]. 白志林,周熙,撒忠秋.  中國(guó)社區(qū)醫(yī)師. 2019(34)
[6]玻璃酸鈉聯(lián)合氨基葡萄糖治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的臨床效果研究[J]. 伍俊星.  海峽藥學(xué). 2019(11)
[7]微生物法合成N-乙酰氨基葡萄糖及其衍生物的研究進(jìn)展[J]. 牛騰飛,李江華,堵國(guó)成,劉龍,陳堅(jiān).  食品與發(fā)酵工業(yè). 2020(01)
[8]鹽酸氨基葡萄糖聯(lián)合非甾體抗炎藥治療中度膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎的臨床效果觀察[J]. 張鷹,龔青.  當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2019(23)
[9]氨基葡萄糖片對(duì)老年膝關(guān)節(jié)炎患者臨床療效及炎性因子的影響[J]. 喻剛,吳威甫,周燕.  解放軍醫(yī)藥雜志. 2019(06)
[10]鹽酸氨基葡萄糖聯(lián)合青藤堿治療膝骨關(guān)節(jié)炎的有效性與安全性[J]. 羅慧臣,胡丹慧.  中成藥. 2019(03)

博士論文
[1]釀酒酵母Mek1與Hop1復(fù)合物及海環(huán)桿菌去乙�；窩mCBDA的結(jié)構(gòu)與功能研究[D]. 謝長(zhǎng)林.中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2019
[2]代謝工程改造大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)氨基葡萄糖及過程優(yōu)化與控制[D]. 陳欣.江南大學(xué) 2012

碩士論文
[1]阪崎腸桿菌脫乙酰酶的酶學(xué)性質(zhì)分析和定向改良研究[D]. 王倩.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]生物法合成N-乙酰氨基葡萄糖[D]. 王雅婷.北京化工大學(xué) 2016
[3]氨基葡萄糖及其美拉德反應(yīng)衍生物生理功能研究[D]. 唐杰.寧波大學(xué) 2012
[4]氨基葡萄糖硫酸鹽的制備及其理化性質(zhì)研究[D]. 曲穎超.大連工業(yè)大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3163470