氨基葡萄糖（Glucosamine,GlcN）具有豐富的生物活性,在醫(yī)藥和食品等多個領域得到廣泛應用。目前GlcN的生產(chǎn)方法有酸水解法、微生物發(fā)酵法和生物催化法。傳統(tǒng)的甲殼素酸水解法是GlcN工業(yè)化生產(chǎn)的主要途徑,但該方法在原料來源、環(huán)境保護以及產(chǎn)品安全等方面存在不足。通過微生物發(fā)酵法制備N-乙酰氨基葡萄糖（N-Acetyl-D-Glucosamine,GlcNAc）,進一步脫乙�；@得GlcN近年來已逐漸成為GlcN規(guī)模化生物制造的主要途徑,然而該方法仍需要再將GlcNAc水解脫乙�；蒅lcN,過程消耗大量濃酸,極易造成設備腐蝕,且嚴重污染環(huán)境。針對上述問題,本研究旨在發(fā)掘高效的N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶,探索GlcNAc的酶法脫乙酰途徑,從而取代目前的酸水解脫乙酰法,為實現(xiàn)GlcN的全鏈條綠色生物制造提供基礎。首先,利用生物信息學手段從數(shù)據(jù)庫中篩選得到了 6個不同來源（Thermococcus kodakarensis、Thermococcusprofundus、Thermococcus siculi、Thermococcus sp.2319x1、Thermococcus ce... 

【文章來源】：華東理工大學上海市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 研究背景與意義
    1.2 國內(nèi)外研究進展
        1.2.1 氨基葡萄糖及其生理活性
        1.2.2 氨基葡萄糖的應用
        1.2.3 氨基葡萄糖的制備方法
        1.2.4 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶概述
    1.3 研究內(nèi)容及技術路線
        1.3.1 研究目的
        1.3.2 研究內(nèi)容
        1.3.3 技術路線
第2章 不同來源N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶的克隆表達及純化
    2.1 引言
    2.2 材料和儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因的篩選、合成
        2.3.2 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因重組質(zhì)粒的構建
        2.3.3 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶在大腸桿菌中的表達、純化
    2.4 結果與討論
        2.4.1 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因的篩選、合成
        2.4.2 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶基因重組質(zhì)粒的構建
        2.4.3 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶在大腸桿菌中的表達、純化
    2.5 本章小結
第3章 不同來源N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶的酶學性質(zhì)表征
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶酶活力的測定
        3.3.2 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶最適溫度的測定
        3.3.3 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶溫度穩(wěn)定性的測定
        3.3.4 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶最適pH的測定
        3.3.5 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶pH穩(wěn)定性的測定
        3.3.6 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶動力學參數(shù)的測定
    3.4 結果與討論
        3.4.1 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶活性的測定
        3.4.2 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶最適溫度的測定
        3.4.3 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶溫度穩(wěn)定性的測定
        3.4.4 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶最適pH的測定
        3.4.5 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶pH穩(wěn)定性的測定
        3.4.6 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶比酶活的測定
        3.4.7 N-乙酰氨基葡萄糖脫乙酰酶動力學參數(shù)的測定
    3.5 本章小結
第4章 酶解工藝條件優(yōu)化
    4.1 引言
    4.2 儀器與方法
    4.3 實驗方法
        4.3.1 反應時間對產(chǎn)率的影響
        4.3.2 底物濃度對產(chǎn)率的影響
        4.3.3 反應溫度對產(chǎn)率的影響
    4.4 結果與討論
        4.4.1 反應時間對產(chǎn)率的影響
        4.4.2 底物濃度對產(chǎn)率的影響
        4.4.3 反應溫度對產(chǎn)率的影響
    4.5 本章小結
第5章 結論與展望
    5.1 主要結論
    5.2 創(chuàng)新點
    5.3 展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士論文及專利發(fā)表情況


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]氨基葡萄糖及其美拉德反應衍生物生理功能研究[D]. 唐杰.寧波大學 2012
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本文編號：3163470