嗅覺在動物的生命活動中發(fā)揮重要功能。作為哺乳動物嗅覺系統(tǒng)重要組成部分,主要嗅覺表皮（MOE）的主要作用是感知外界氣味分子。MOE是一個活躍的組織,其嗅覺神經(jīng)細(xì)胞具有終身再生能力。由于MOE暴露于鼻腔,與外界環(huán)境直接接觸,因而包括Micro RNAs（miRNAs）在內(nèi)的表觀遺傳因子對于多變環(huán)境下的MOE內(nèi)嗅覺神經(jīng)細(xì)胞增殖和分化具有重要的調(diào)控作用,因此MOE是研究表觀遺傳調(diào)控與組織神經(jīng)分化發(fā)生關(guān)系的良好外周器官,但目前其機制仍不清楚。為了探究在嗅覺缺失小鼠模型[腺苷酸環(huán)化酶3（AC3）全身敲除小鼠]MOE組織內(nèi),哪些miRNAs表達(dá)發(fā)生改變。對成年雄性野生小鼠和同窩出生的AC3敲除小鼠MOE組織進行小RNA測序和熒光定量PCR（q PCR）,結(jié)果顯示在AC3敲除小鼠MOE組織中miR-200b和miR-200a（miR-200b/a）的表達(dá)顯著下調(diào);為了探究AC3對miR-200b/a的調(diào)控關(guān)系,利用q PCR檢測AC3基因敲入小鼠MOE組織中miR-200b/a的表達(dá),結(jié)果顯示在AC3基因敲入小鼠MOE組織中,miR-200b/a的表達(dá)顯著升高;以上結(jié)果說明在小鼠MOE組織中AC3調(diào)控... 

【文章來源】：河北大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：163 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略詞表
第一章 序言
    1.1 MOE組織神經(jīng)分化及其中的表觀遺傳調(diào)控因子
        1.1.1 MOE組織神經(jīng)細(xì)胞組成
        1.1.2 MOE組織神經(jīng)分化
        1.1.3 MOE組織與表觀遺傳調(diào)控
        1.1.4 MiRNA簡介
        1.1.5 DNA去甲基化酶
        1.1.6 抑制因素1(RE-1)沉默轉(zhuǎn)錄因子(REST/NRSF)
    1.2 基因編輯技術(shù)和腺相關(guān)病毒
        1.2.1 CRISPR-Cas9 基因編輯技術(shù)
        1.2.2 腺相關(guān)病毒(AAV)
    1.3 本研究思路與方法、主要研究內(nèi)容
    1.4 本研究目的與意義
第二章 miRNA調(diào)控小鼠嗅覺介導(dǎo)的行為和MOE組織神經(jīng)分化過程
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗細(xì)胞
        2.1.3 實驗試劑與配方
        2.1.4 實驗儀器
        2.1.5 實驗方法
        2.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    2.2 研究結(jié)果
        2.2.1 AC3 調(diào)控miR-200b/a的表達(dá)
        2.2.2 MOE miR-200b/a敲低小鼠構(gòu)建
        2.2.3 miR-200b/a的嗅覺行為學(xué)功能
        2.2.4 miR-200b/a敲低小鼠MOE組織中細(xì)胞增殖能力加強
        2.2.5 miR-200b/a敲低小鼠MOE組織中GBCs細(xì)胞周期異常
        2.2.6 miR-200b/a敲低小鼠MOE組織中Mash1 marked GBCs顯著增多
        2.2.7 miR-200b/a敲低小鼠MOE組織內(nèi)神經(jīng)元分化減少
        2.2.8 miR-200b/a敲低小鼠MOE組織內(nèi)神經(jīng)元凋亡增加
        2.2.9 miR-200b/a敲低小鼠MOE組織GBC增殖異常,OSN分化異常及凋亡同時發(fā)生
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 miR-200b/a通過靶基因TET3 調(diào)控小鼠嗅覺介導(dǎo)的行為和MOE組織神經(jīng)分化過程
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 實驗細(xì)胞
        3.1.3 實驗試劑與配方
        3.1.4 實驗儀器
        3.1.5 實驗方法
        3.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.2 研究結(jié)果
        3.2.1 在細(xì)胞水平上miR-200a調(diào)控TET3 表達(dá)
        3.2.2 在MOE組織水平上miR-200b/a調(diào)控TET3 表達(dá)
        3.2.3 miR-200b/a+TET3 雙敲低小鼠的構(gòu)建
        3.2.4 TET3 表達(dá)降低能夠部分恢復(fù)miR-200b/a敲低導(dǎo)致的小鼠嗅覺介導(dǎo)的行為缺陷
        3.2.5 TET3 表達(dá)降低能夠恢復(fù)miR-200b/a敲低導(dǎo)致的小鼠MOE組織神經(jīng)分化缺陷
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 REST參與調(diào)控小鼠嗅覺介導(dǎo)的行為和MOE組織神經(jīng)分化
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實驗動物
        4.1.2 實驗細(xì)胞
        4.1.3 實驗試劑與配方
        4.1.4 實驗儀器
        4.1.5 實驗方法
        4.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4.2 研究結(jié)果
        4.2.1 在小鼠MOE組織中TET3與REST相互作用
        4.2.2 miR-200b/a+REST雙敲低小鼠構(gòu)建
        4.2.3 REST表達(dá)抑制能夠恢復(fù)miR-200b/a敲低引起的小鼠嗅覺介導(dǎo)的行為缺陷
        4.2.4 REST表達(dá)抑制能夠恢復(fù)miR-200b/a敲低引起的小鼠MOE組織中GBCs增殖異常
        4.2.5 REST表達(dá)抑制能夠恢復(fù)miR-200b/a敲低引起的小鼠MOE組織中神經(jīng)細(xì)胞分化和凋亡異常
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡介及攻讀學(xué)位期間取得的研究成果



本文編號：3163750