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GH23家族糖苷酶的基因克隆和性質(zhì)表征

發(fā)布時(shí)間:2021-01-23 13:09
  GH23家族糖苷水解酶主要包括G型溶菌酶(lysozyme type G)、幾丁質(zhì)酶(chitinase)和肽聚糖裂解酶(peptidoglycan lyase)。幾丁質(zhì)酶主要水解幾丁質(zhì)中N-乙酰葡萄糖胺(NAG)中的β-1,4-糖苷鍵,而其它的兩個(gè)酶主要水解肽聚糖中N-乙酰胞壁酸(NAM)和NAG中的糖苷鍵。雖然這些底物存在相似性,但是三種酶對(duì)底物的裂解模式、產(chǎn)物類型存在差異。開展GH23家族糖苷水解酶的相關(guān)研究對(duì)酶的作用機(jī)制具有很好的意義。目前為止,獲得初步表征的GH23家族糖苷水解酶僅有31個(gè),其中細(xì)菌來源的酶主要屬于幾丁質(zhì)酶和肽聚糖裂解酶,而G型溶菌酶絕大多數(shù)來源于真核生物,個(gè)別的來自于枯草芽孢桿菌。因此需要對(duì)GH23家族糖苷水解酶開展新酶源挖掘、底物選擇性、催化機(jī)制等方面的研究,從而為深入闡明該家族催化的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。解纖維熱酸菌(Acidothermus cellulolyticus 11B)能夠在高溫高酸性條件下生長,以纖維素等復(fù)雜生物質(zhì)為碳源,產(chǎn)生豐富的糖苷水解酶。根據(jù)基因組測序結(jié)果,預(yù)測該菌株基因組含有4種GH23家族糖苷水解酶。因此,本論文開展了相關(guān)基因克隆、基... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

GH23家族糖苷酶的基因克隆和性質(zhì)表征


糖苷酶的結(jié)構(gòu)

糖苷酶,代謝過程,水解酶


第 1 章 前言麥芽三糖或乳糖上[21]。這種催化化學(xué)反應(yīng)屬于氧碳正離子催化機(jī)制[22-23],這個(gè)反應(yīng)由兩個(gè)階段構(gòu)成:首先是塑性過程;其次是維持立體結(jié)構(gòu)的過程。糖苷酶在將糖苷鍵逐步水解的時(shí)候,底物的端基構(gòu)型的會(huì)維持原型或發(fā)生反轉(zhuǎn),而產(chǎn)物的構(gòu)象形態(tài)是由酶的本身的構(gòu)型決定,和底物的種類沒有關(guān)聯(lián)[24-25]。

幾丁質(zhì)酶,催化機(jī)理


幾丁質(zhì)作為碳源的消化和利用非常重要,它們是甲殼素在環(huán)境中循環(huán)利用的關(guān)鍵酶[9]。幾丁質(zhì)酶由于其作為生物防治劑的用途而受到關(guān)注,并且還用于開發(fā)轉(zhuǎn)基因植物。 它們?cè)谏镅芯勘挥糜谡婢|(zhì)體的產(chǎn)生降解真菌細(xì)胞壁,也為人類衛(wèi)生保健所采用,如制作與幾丁質(zhì)酶眼用制劑。近年來,幾丁質(zhì)酶基因的克隆和表達(dá)以及具有新能力的重組菌株的構(gòu)建已成為幾丁質(zhì)酶研究和應(yīng)用的熱門領(lǐng)域之一。目前,已經(jīng)從許多微生物中克隆并表征了幾丁質(zhì)酶基 因,例如 粘質(zhì)沙雷 氏菌[10],Alteromonas[11],Enterobacteragglomerons[12], Streptomyces olivaceoviridis[13], Streptomyces iividans[14],Aeromonas caviae[15]和 Bacillus circulans[16],其中一些轉(zhuǎn)化為植物和細(xì)菌菌株以增加它們控制真菌植物病原體的能力[17,18]或在大腸桿菌細(xì)胞中高水平表達(dá)以增強(qiáng)蘇云金芽孢桿菌控制害蟲的活性[19,20]。幾丁質(zhì)酶因其在植物病原真菌和害蟲的生物防治中的潛在應(yīng)用以及貝類幾丁質(zhì)廢物的生物轉(zhuǎn)化而受到越來越多的關(guān)注。


本文編號(hào):2995271

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