提高外源基因的表達(dá)水平一直是生物技術(shù)探討的熱點(diǎn)問題。在理論上,探討更有效的基因序列改造和優(yōu)化方案,對(duì)于提高外源基因的表達(dá)水平具有重要意義和實(shí)用價(jià)值。本研究提出了針對(duì)人干擾素α-2b基因的改造和優(yōu)化方案,期望在大腸桿菌中獲得高效表達(dá)。研究?jī)蓚�(gè)部分,第一部分在理論上將人干擾素α-2b基因（IFNα-2b）編碼序列（CDS）改造成大腸桿菌高表達(dá)基因的偏好模式,然后配置選定的啟動(dòng)子區(qū)和終止子區(qū)序列以便構(gòu)成完整基因。第二部分是為了檢驗(yàn)我們的理論方法的可靠性,將改造和優(yōu)化的人IFNα-2b基因在大腸桿菌中表達(dá)。（一）人干擾素α-2b基因改造和優(yōu)化方案。對(duì)編碼序列改造分為兩步,首先將編碼序列中的密碼子置換成大腸桿菌高表達(dá)基因的最適同義密碼子。其次將編碼序列中緊鄰密碼子第三位點(diǎn)的堿基關(guān)聯(lián)置換成大腸桿菌高表達(dá)基因的強(qiáng)關(guān)聯(lián)模式。在此過程中,在強(qiáng)關(guān)聯(lián)模式和最適或次最適同義密碼子的置換上做出最佳選擇。以大腸桿菌中高表達(dá)基因lpp的啟動(dòng)區(qū)和終止區(qū)序列作為改造基因的啟動(dòng)區(qū)和終止區(qū)序列。以lpp啟動(dòng)區(qū)中的SD序列作為高表達(dá)啟動(dòng)區(qū)的SD序列,將低表達(dá)基因的SD序列替換lpp啟動(dòng)區(qū)中的SD序列作為對(duì)照序列。構(gòu)造三條完整... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大腸桿菌高表達(dá)基因密碼子間第三位點(diǎn)堿基關(guān)聯(lián)強(qiáng)度分布

圖 3.1 克隆載體 pGM-T 圖譜Fig.3.1 Cloning vector pGM-t map注：圖片來自天根克隆試劑盒說明書+)為常用的高效原核表達(dá)載體，它需要由 粒圖譜如圖 3.2 所示：

內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文3.2 質(zhì)粒與菌株-T-T 是高效克隆 PCR 產(chǎn)物的專用載體。由于 PCR 反應(yīng)是 3，端會(huì)添加一個(gè)Ａ，形成粘性末端，可正好與載體 5，：

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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