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利用STTM技術(shù)分析擬南芥miR160和miR165/166的互作網(wǎng)絡(luò)及玉米miR166的初步功能

發(fā)布時間:2021-01-12 05:03
  MicroRNA(微miRNA,miRNA)是一類非編碼小RNA,在植物生長發(fā)育和逆境脅迫響應(yīng)中起到重要作用。Short Tandem Target Mimic(短串聯(lián)靶標(biāo)模擬,STTM)技術(shù)能夠高效、特異沉默目標(biāo)miRNA家族,而其他miRNAs的表達(dá)和功能則不受影響,在miRNA的作用機(jī)制和miRNA間的互作網(wǎng)絡(luò)研究中發(fā)揮著巨大的功效。本研究利用STTM技術(shù)分析擬南芥miR160和miR165/166的互作網(wǎng)絡(luò),以及玉米miR166的作用機(jī)制。為了鑒定擬南芥中miR160和miR165/166的互作網(wǎng)絡(luò),通過兩個單突變體STTM160和STTM165/166的雜交,獲得了雙突變體STTM160×165/166,鑒定了雙突變體的葉片發(fā)育和干旱脅迫的表型轉(zhuǎn)變,分析了miR160和miR165/166及其靶基因的表達(dá)水平。利用轉(zhuǎn)錄組和小RNA測序技術(shù),比較了單、雙突變體中miRNA和基因的表達(dá)差異。利用高性能液相色譜(HPLC)技術(shù),比較了單、雙突變體中IAA和ABA的相對含量,闡明了miR160和miR165/166互作對葉片發(fā)育和干旱耐性的影響。此外,為了驗證玉米中miR166的作用... 

【文章來源】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

利用STTM技術(shù)分析擬南芥miR160和miR165/166的互作網(wǎng)絡(luò)及玉米miR166的初步功能


植物miRNA的生物合成(RogersandChen,2013)

植物,機(jī)制,靶基因,頂端分生組織


圖 2:植物 miRNA 的作用機(jī)制(Huntzinger and Izaurralde, 2011)。Figure 2. Mechanisms of microRNA-mediated gene silencing in plants (Huntzinger and Izaurralde, 2011).1.1.4 miRNA 與生長發(fā)育miRNA 及其靶基因處于基因表達(dá)調(diào)控的核心位置,在植物生長發(fā)育過程中起到重要作用,參與植物根、葉、花等器官的發(fā)育(表 1)。其中,miR165/166 和 miR394 調(diào)控頂端分生組織的發(fā)育,miR165/166 和 miR390 調(diào)控營養(yǎng)分生組織發(fā)育,miR156 和 miR172 調(diào)控生殖分生組織發(fā)育,miR164、miR319、miR396 調(diào)控葉的發(fā)育,miR169 和 miR172 調(diào)控花的發(fā)育(圖 3)。例如,miR160-ARF、miR164-NAC、miR167-ARF、miR393-AFB3 調(diào)節(jié)根的生長發(fā)育,參與根冠形成,主根和側(cè)根生長,以及不定根的生成[18,19]。miR164 高表達(dá),靶基因 NAC 的 mRNA 水平降低,側(cè)根數(shù)量增多。miR164 低表達(dá),靶基因 NAC 的 mRNA 水平升高,側(cè)根數(shù)量減少[20]。miR165/166-HD-ZIPIII、miR164-CUC 調(diào)節(jié)莖的生長發(fā)育,參與頂端分生組織的建立與維持,腋生分生組織的發(fā)育與分化[18,19]。PHB/PHV/REV 功能缺失突變 體 出 現(xiàn) 器 官 極 性 改 變 , 分 生 組 織 喪 失 , 維 管 束 發(fā) 育 缺 陷[21]。 miR164-CUC 、

生長發(fā)育,小RNA


Table1. The miRNA and target in plant development.NA Target Function156 SPL flower development159 MYB seed development160 ARF root development164 CUC root/shoot/leaf development165/166 HD-ZIPIII root/meristem/leaf development167 ARF flower/root development169 NY-FA root development171 SCL flower development172 AP2 flower development319 TCP leaf development390 TAS3 leaf development393 TIR1/AFB root development394 LCR meristem development396 GRF leaf development399 PHO2 root development


本文編號:2972205

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